疣鼻天鹅TLR4基因克隆及生物信息学分析

【目的】克隆疣鼻天鹅Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)基因,并对其编码蛋白进行生物信息学分析,为进一步探索疣鼻天鹅TLR4蛋白抗病原微生物免疫机制提供重要参考依据。【方法】利用PCR扩增并克隆疣鼻天鹅TLR4基因CDS序列,应用NCBI-BLAST、Mega-X软件进行序列比对并构建系统进化树;利用ProtParam、SWISS-MODEL等软件预测TLR4基因编码蛋白的结构、功能及与宿主蛋白的相互作用关系,并进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】试验成功克隆疣鼻天鹅TLR4基因CDS区序列,全长2550 bp,已提交至NCBI,登录号为:OP908241。疣鼻天鹅TLR4基因CDS区序列中存在79个稀有密码子,其中含6段连续稀有密码子,编码849个氨基酸,与灰雁和鸿雁相似度较高,亲缘关系最近。TLR4蛋白的跨膜结构域位于第647―667位氨基酸处,N-端包含由36个氨基酸组成的信号肽,信号肽切割位点在第36―37位氨基酸之间,置信度为67.85%,含有10个N-糖基化位点和85个磷酸化位点,是亲水性蛋白,主要存在于细胞质中,与人TLR4蛋白有相似的三级结构,相似率为45.48%。TLR4蛋白共存在10个主要互作蛋白,富集得到96个GO功能条目和7条KEGG通路,其中GO功能条目包括物种间相互作用、免疫反应、应激反应、信号转导等;KEGG通路包括甲型流感、单纯疱疹病毒Ⅰ型感染及沙门氏菌感染等。【结论】疣鼻天鹅TLR4基因与灰雁和鸿雁亲缘关系最近,有明显的密码子种属选择性,含有6段连续稀有密码子,其蛋白存在跨膜结构域和信号肽,并与天然免疫应答、信号转导和应激反应密切相关。

由产气荚膜梭菌引起东北虎幼虎死亡的诊断报告

2010年7月初，沈阳市森林野生动物园1只东北虎幼虎（1岁龄，雄性）死亡，死前无明显临床症状。经过临床病理剖检、实验室诊断等方法，确诊为由产气荚膜梭菌引起的死亡，报告如下。

松香法应用于犬的全身肌肉干制标本制作技术的探讨

为探索松香在犬的全身干制标本中的制作技术,本试验以成年金毛犬为实验动物,将犬放血处死,经灌注定形和梯度乙醇彻底脱水后,依据相似相溶原理,将封固液中松香短时间快速渗入犬的全身肌肉组织内,基于乙醇和松节油易挥发性加速松香对肌肉组织的支撑和固化定形过程,再刷漆包被干制得到犬的全身干制标本。结果显示,该技术方案能有效的将松香渗入犬的组织内部,制得标本呈淡琥珀色,组织器官皱缩不明显,可清晰反映出其肌肉、器官等解剖位置,经长时间放置标本组织器官固有形态结构清晰,未出现虫蛀、霉变、油脂渗出以及腐败等现象。以上结果表明,松香法制备的犬的全身肌肉干制标本,具有很好的驱虫、防腐、防潮和防渗脂效果,能有效解决标本保存中虫蛀、霉变、腐败和渗脂等问题,从而长久保存。

离子色谱法测定循环水中的六种阴离子

为了检测循环水冷却水中的F^(-)、Cl^(-)、NO_(2)^(-)、SO _(4)^(2-)、NO_(3)^(-)、PO_(4)^(3-)含量,建立了离子色谱法。结果表明:这六种离子在相应的浓度范围内,峰面积与浓度之间具有良好的线性关系(r≥0.9990);相对标准偏差<2%;其中F-和PO_(4)^(3-)加标回收率在90%~110%之间,其它离子的加标回收率均在95%~105%之间;在15 min内这六种离子能够完全分离;具有测定简便、快速、准确、精密度高、数据可靠的特点,同时在分析过程中不添加任何试剂,不对环境造成二次污染,具有广泛的应用和推广价值。

艰难梭菌毒素及致病基因的研究进展

艰难梭菌是一种革兰阳性厌氧芽胞梭菌,是人类肠道感染的主要致病菌,以肠道病理损伤及菌群失调为主的感染性疾病。使用抗菌药物后可导致艰难梭菌过度生长,分泌大量毒素A(肠毒素)和毒素B(细胞毒素),通过毒素介导致病。毒素A启动细胞损伤后,毒素B即可侵入肠黏膜,引起细胞病变,导致一系列与感染相关的临床表现。少数强毒株艰难梭菌还可以产生二元毒素,该毒素可以导致细胞骨架破坏,增强毒素A和毒素B的作用导致严重病变。研究发现,人和动物艰难梭菌之间具有同源性,成为人类感染艰难梭菌的传染源。对艰难梭菌产生毒素的致病机理进行综述,为治疗艰难梭菌感染提供依据。

如何准确测定化学水中的游离二氧化碳

游离二氧化碳的含量是化学水装置的一项重要工艺参数,如何选择适当的分析方法准确测定游离二氧化碳尤为重要。测定方法有直接法和固定发两种,通过实验决定选用"固定法"测定化学水中游离二氧化碳含量,此方法灵敏度较高,滴定终点颜色易于判断,适于现场控制分析。

艰难梭菌对临床常用药物耐药机制的研究进展

艰难梭菌（Clostridium difficile，CD）是梭菌属中的一种革兰阳性专性厌氧菌，它是肠道中的正常菌群，广泛分布于动物和人类的粪便中，主要是通过粪-口途径传播。CD从发现至今已有70多年的历史，是引起人医源性腹泻的主要病原体，临床上约有50％的抗生素相关性腹泻和90％～100％的伪膜性肠炎与此细菌相关，因此对人类的健康造成了严重的威胁。

丹顶鹤住白细胞虫病的诊治

2010年7月初,沈阳市动物园的一批出壳2月龄丹顶鹤突然食欲下降,口腔黏膜苍白,黏膜表面有黄白色高粱米粒大的结节,结节大小均匀。到7月末时出现死亡病例。通过临床症状、病理变化、外周血涂片镜检等方法初步诊断为住白细胞虫病,采用相应的药物进行治疗后,疫情得到了控制,现报告如下。

标准节流式流量计在线校准系统的不确定度评定

由于工艺及现场条件的限制,石化企业在用标准节流式流量计无法实现离线检定或校准的情况较为普遍,对运行中出现的计量数据偏差束手无策,该文根据标准GB/T 21446-2008的规定,对标准节流式流量计进行不确定度评定。首先,对标准节流式流量计进行现场校准找出计量中存在的问题,然后提出解决方案进行改造。结果表明,通过标准节流式流量计的在线校准,计量系统的误差得到降低,不确定度满足企业计量要求。

速眠新、鹿眠宁对东北虎麻醉效果的观察

目前,动物园对东北虎的化学保定多选用复方氯胺酮,沈阳森林动物园自建园以来,多次应用速眠新和鹿眠宁对东北虎在进行治疗、串笼、运输等作业中实施麻醉,效果较好。现将麻醉效果的观察报道如下：

剑羚下颌骨骨折的诊治

1999年10月末,沈阳森林野生动物园从南非引进一批剑羚。在隔离检疫期间,由于检疫需要11月2日在对5号剑羚实施药物保定,麻醉药注入8min该兽卧地,当工作人员进入笼舍将接近该剑羚时,其突然跳起,跌撞到暖气片上,造成右侧下颌骨骨折,治疗20d后痊愈。

一例长颈鹿肺炎诊治报告

沈阳市森林野生动物园1只6岁半雌性长颈鹿出现咳嗽、流鼻汁、胸腹式呼吸等症状，根据临床症状和实验室检查，确诊为肺炎。经过20d综合治疗痊愈，现将诊治情况报告如下。

斑马金黄色葡萄球菌性蜂窝织炎的诊疗

2000年11月，沈阳森林野生动物园一匹草原斑马左臀部患蜂窝织炎，采用手术切开，彻底清创，4个月后痊愈。现将诊疗情况报告如下。

岩羊传染性角膜结膜炎

2001年2月,沈阳森林野生动物园12只岩羊双眼相继出现流泪,角膜和结膜混浊,个别出现角膜翳。根据临床症状和病原检查,诊断为岩羊传染性角膜结膜炎。经过近1个月的临床治疗,1只岩羊因采食困难死亡,其余的11只岩羊中有2只双目失明。

关于非洲狮耳部纤维血管瘤诊治一例

这只非洲狮为雄性，5岁龄，最初发现其右耳蜗内有一圆形肿物（直径约1cm），后迅速增大并扩至外耳，摩擦损伤流血。该狮精神状态良好，食欲稍差，排便未发现异常，于是麻醉检查，对肿物实施治疗，取肿物组织时表现出血较重。眼观肿物凹凸不平，深褐色，无被毛，稍有弹性，呈直径2cm的半球样，初步诊断为血管瘤，疑是恶性。

犬脾胃扭转综合症的防控

本文对犬常见的急腹症之一，即胃扩张一扭转综合症进行诊断、治疗方法及可能引起的继发性疾病。