[目的]探讨异柠檬酸脱氢酶(IDH)132、140、172位精氨酸突变对骨巨细胞瘤细胞增殖水平的影响。[方法]纳入2020年1月-2022年1月骨巨细胞瘤患者76例,检测骨巨细胞瘤组织和血清中IDH1和IDH2的基因序列和IDH底物2-羟基戊二酸(2HG)的水平。构...[目的]探讨异柠檬酸脱氢酶(IDH)132、140、172位精氨酸突变对骨巨细胞瘤细胞增殖水平的影响。[方法]纳入2020年1月-2022年1月骨巨细胞瘤患者76例,检测骨巨细胞瘤组织和血清中IDH1和IDH2的基因序列和IDH底物2-羟基戊二酸(2HG)的水平。构建IDH1和IDH2敲除的骨巨细胞瘤细胞GCT-404细胞系,转染IDH野生型或突变型后检测细胞的增值水平。根据转染的IDH1或IDH2的基因型进行实验分组:(1)IDH1野生型组;(2)IDH2野生型组;(3)IDH1 R132H组;(4)IDH2 R140Q组;(5)IDH2 R172S组。[结果]骨巨细胞瘤患者中IDH突变型占比32.89%,野生型占比67.11%。IDH野生型患者肿瘤组织和血清中2HG的水平低于IDH突变型患者[(0.22±0.07)nmol/mg vs(2.58±0.24)nmol/mg,(1.73±0.29)μmol/L vs(9.89±1.08)μmol/L,P<0.05]。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著促进GCT-404细胞的增殖(2.20±0.09 vs 4.25±0.12,P<0.05)和2HG水平(31.34±5.33 vs 56.32±8.32,P<0.05)。敲除IDH1或IDH2后,GCT-404细胞中2HG的水平显著下降(25.78±4.56 vs 10.22±2.04,P<0.05)。2HG处理后,GCT-404细胞的增殖水平均显著上升(1.56±0.08 vs 2.41±0.10,P<0.05)。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著增加GCT-404细胞中HIF1A的表达。敲低HIF1A后GCT-404细胞的增殖水平显著下降(1.50±0.04 vs 0.94±0.03,P<0.05)。[结论]IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S通过调控2HG水平和HIF1A水平能显著增强骨巨细胞瘤细胞的增殖水平。展开更多
[目的]探究APOLD1对骨折后深静脉血栓形成和NF-κB信号通路的影响。[方法]将大鼠随机分为3组(每组n=10):假手术(Sham)组、ADV-NC组和ADV-APOLD1组。通过病理染色分析静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析NF-κB信号通路的变化。酶联...[目的]探究APOLD1对骨折后深静脉血栓形成和NF-κB信号通路的影响。[方法]将大鼠随机分为3组(每组n=10):假手术(Sham)组、ADV-NC组和ADV-APOLD1组。通过病理染色分析静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析NF-κB信号通路的变化。酶联免疫吸附剂测定分析血清中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α和组织因子的水平。通过多功能血液凝固分析仪检测凝血功能相关指标变化(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间以及D-二聚体水平)。[结果]和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组下腔静脉有部分血栓形成(98.27±1.26 vs 173.29±6.23;P<0.05),少量血管壁炎性细胞浸润、炎症因子水平(IL-1β、IL-6和TNF-α)和组织因子水平显著降低(5.92±0.15 vs 11.29±0.23;4.05±0.06 vs 7.09±0.03;7.19±0.32 vs 13.01±0.13;226.18±10.13 vs 399.02±10.03;P<0.05)、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间水平显著增加,D-二聚体水平降低。此外,和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组的右下肢静脉组织中NF-κB p65磷酸化水平降低(0.57±0.06 vs 0.81±0.02;P<0.05)。[结论]过表达APOLD1能够抑制骨折后深静脉血栓形成,这一过程可能与抑制NF-κB信号通路相关。展开更多
[目的]探究缬草酸对骨折后深静脉血栓形成及Sirtuin1/NF-κB通路的影响。[方法]所有Sprague Dawley大鼠被随机分为3组(每组n=10):假手术组、模型组和缬草酸组。通过HE染色分析下腔静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析Sirtuin1/NF-κ...[目的]探究缬草酸对骨折后深静脉血栓形成及Sirtuin1/NF-κB通路的影响。[方法]所有Sprague Dawley大鼠被随机分为3组(每组n=10):假手术组、模型组和缬草酸组。通过HE染色分析下腔静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析Sirtuin1/NF-κB通路的变化。通过酶联免疫吸附剂测定分析炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平。通过全自动凝血分析仪检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间。[结果]病理分析发现,缬草酸治疗后,模型组大鼠血栓染色变淡,血管再通,血管壁有少数炎症细胞。此外,缬草酸治疗后,模型组大鼠血栓重量逐渐减小(6.36±0.02 vs 11.03±0.02,P<0.05),长度逐渐缩短。此外,模型组大鼠在经过缬草酸治疗后炎症因子水平明显降低(4.67±0.08 vs 7.02±0.01;5.99±0.05 vs 11.02±0.03;5.81±0.06 vs 10.02±0.03;P<0.05),凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间水平明显上升。蛋白免疫印迹结果发现,与模型组相比,缬草酸组大鼠的下腔静脉组织中NF-κB p65磷酸化水平降低(0.58±0.02 vs 0.92±0.03;P<0.05),Sirtuin1水平增加(0.69±0.01 vs 0.16±0.03;P<0.05)。[结论]缬草酸能够改善下腔静脉血栓导致的病理损伤、抑制下腔静脉血栓形成,并能抑制血浆中炎症因子的水平。这一作用可能与Sirtuin1表达上调而NF-κB的抑制相关。展开更多
文摘[目的]探讨异柠檬酸脱氢酶(IDH)132、140、172位精氨酸突变对骨巨细胞瘤细胞增殖水平的影响。[方法]纳入2020年1月-2022年1月骨巨细胞瘤患者76例,检测骨巨细胞瘤组织和血清中IDH1和IDH2的基因序列和IDH底物2-羟基戊二酸(2HG)的水平。构建IDH1和IDH2敲除的骨巨细胞瘤细胞GCT-404细胞系,转染IDH野生型或突变型后检测细胞的增值水平。根据转染的IDH1或IDH2的基因型进行实验分组:(1)IDH1野生型组;(2)IDH2野生型组;(3)IDH1 R132H组;(4)IDH2 R140Q组;(5)IDH2 R172S组。[结果]骨巨细胞瘤患者中IDH突变型占比32.89%,野生型占比67.11%。IDH野生型患者肿瘤组织和血清中2HG的水平低于IDH突变型患者[(0.22±0.07)nmol/mg vs(2.58±0.24)nmol/mg,(1.73±0.29)μmol/L vs(9.89±1.08)μmol/L,P<0.05]。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著促进GCT-404细胞的增殖(2.20±0.09 vs 4.25±0.12,P<0.05)和2HG水平(31.34±5.33 vs 56.32±8.32,P<0.05)。敲除IDH1或IDH2后,GCT-404细胞中2HG的水平显著下降(25.78±4.56 vs 10.22±2.04,P<0.05)。2HG处理后,GCT-404细胞的增殖水平均显著上升(1.56±0.08 vs 2.41±0.10,P<0.05)。相比于IDH野生型,IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S显著增加GCT-404细胞中HIF1A的表达。敲低HIF1A后GCT-404细胞的增殖水平显著下降(1.50±0.04 vs 0.94±0.03,P<0.05)。[结论]IDH1 R132H、IDH2 R140Q或IDH2 R172S通过调控2HG水平和HIF1A水平能显著增强骨巨细胞瘤细胞的增殖水平。
文摘[目的]探究APOLD1对骨折后深静脉血栓形成和NF-κB信号通路的影响。[方法]将大鼠随机分为3组(每组n=10):假手术(Sham)组、ADV-NC组和ADV-APOLD1组。通过病理染色分析静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析NF-κB信号通路的变化。酶联免疫吸附剂测定分析血清中炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α和组织因子的水平。通过多功能血液凝固分析仪检测凝血功能相关指标变化(凝血酶原时间、凝血酶时间、活化部分凝血活酶时间以及D-二聚体水平)。[结果]和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组下腔静脉有部分血栓形成(98.27±1.26 vs 173.29±6.23;P<0.05),少量血管壁炎性细胞浸润、炎症因子水平(IL-1β、IL-6和TNF-α)和组织因子水平显著降低(5.92±0.15 vs 11.29±0.23;4.05±0.06 vs 7.09±0.03;7.19±0.32 vs 13.01±0.13;226.18±10.13 vs 399.02±10.03;P<0.05)、凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间水平显著增加,D-二聚体水平降低。此外,和ADV-NC组比较,ADV-APOLD1组的右下肢静脉组织中NF-κB p65磷酸化水平降低(0.57±0.06 vs 0.81±0.02;P<0.05)。[结论]过表达APOLD1能够抑制骨折后深静脉血栓形成,这一过程可能与抑制NF-κB信号通路相关。
文摘[目的]探究缬草酸对骨折后深静脉血栓形成及Sirtuin1/NF-κB通路的影响。[方法]所有Sprague Dawley大鼠被随机分为3组(每组n=10):假手术组、模型组和缬草酸组。通过HE染色分析下腔静脉组织病理变化。通过蛋白免疫印迹分析Sirtuin1/NF-κB通路的变化。通过酶联免疫吸附剂测定分析炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平。通过全自动凝血分析仪检测凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间。[结果]病理分析发现,缬草酸治疗后,模型组大鼠血栓染色变淡,血管再通,血管壁有少数炎症细胞。此外,缬草酸治疗后,模型组大鼠血栓重量逐渐减小(6.36±0.02 vs 11.03±0.02,P<0.05),长度逐渐缩短。此外,模型组大鼠在经过缬草酸治疗后炎症因子水平明显降低(4.67±0.08 vs 7.02±0.01;5.99±0.05 vs 11.02±0.03;5.81±0.06 vs 10.02±0.03;P<0.05),凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间水平明显上升。蛋白免疫印迹结果发现,与模型组相比,缬草酸组大鼠的下腔静脉组织中NF-κB p65磷酸化水平降低(0.58±0.02 vs 0.92±0.03;P<0.05),Sirtuin1水平增加(0.69±0.01 vs 0.16±0.03;P<0.05)。[结论]缬草酸能够改善下腔静脉血栓导致的病理损伤、抑制下腔静脉血栓形成,并能抑制血浆中炎症因子的水平。这一作用可能与Sirtuin1表达上调而NF-κB的抑制相关。