人体子宫内膜血管内皮生长因子的研究

目的 :对人体子宫内膜增殖期 (n =3)、分泌期 (n =6 )和增生过长 (n =6 )标本 ,进行VEGF的免疫定位和半定量测定 ,了解雌激素对子宫内膜VEGF的影响。方法 :研究组用免疫组织化学方法 ,对照组用无关的免疫球蛋白代替第一及第二抗体 ,用辅助视频图像分析系统进行计算。结果 :增殖期VEGF在腺体 (P <0 .0 0 1)和间质 (P <0 .0 1)的浓度 ,明显高于分泌期和子宫内膜增生过长 ,总的看来 ,腺体的VEGF高于间质。结论 :雌激素提高子宫内膜的VEGF的含量 ,并与增殖晚期新的血管形成和血管通透性增加有关。此外 ,子宫内膜增生过长的腺体VEGF并不升高 ,提示人体子宫内膜的腺体生长和血管生成调节是不同的。

南方鲇生长激素完整cDNA的克隆及其DNA序列分析

采用RT-PCR法和3'、5'RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从南方鲇脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH)cDNA。此cDNA全长1087nt(含 Poly(A)》,其5'端非编码区长52nt、阅读框(Open reading frame,ORF)长603nt、3'端非编码区长415nt。其推导的GH由200个氨基酸组成,其中前24个氨基酸为信号肽部分。氨基酸序列比较表明,南方鲇GH与Pangasianodongigas、Ictaluruspunctatus和Heteropneustes fossilis三种鲇类的同源性分别为97.5%和95.0%,与鲢、鳙、草、鲤和鲫鱼的GH同源性达76.0%以上,而与人的GH(Ⅰ、Ⅱ)同源性最低为31.0%和29.5%.

黄颡鱼RAPD标记及其遗传多样性的初步分析

以雌、雄黄颡鱼 DNA池为模板 ,从 42 2个引物中筛选出 6 1个 RAPD反应重复性好、带型清晰明亮的引物 ,这些引物可用于黄颡鱼的分子标记或鉴定 .采用 10～ 11个引物先后对两批黄颡鱼 (简称群体 A和群体 B)进行群体 RAPD多样性分析 .在群体 A(2 1尾 )中共检测到 95个位点 ,其中 2 7个为多态位点占总位点数2 8.42 % ,其群体 Nei& L i氏遗传相似率为 90 .6 7% ,Shannon信息指数为 0 .0 918比特 ;在群体 B中共检出 46个位点 ,其中多态位点 12个占 2 6 .0 9% ,其群体 Nei& L i氏遗传相似率为 93.2 7% ,Shannon信息指数为 0 .0 6 70比特 .

普通鲫鱼的RAPD标记及其遗传多样性

采用了 387个引物对普通鲫鱼进行了 RAPD( random am plified polym orphic DNA)分析 ,筛选出了 31个重复性好、可用于普通鲫鱼 RAPD标记的引物 .另用 8个引物对普通鲫鱼 ( 2 0尾 )进行了遗传多样性分析 :这 8个引物共检出 45个位点 ,其中多态性位点数 2 4个 ,占总位点数的 5 3.33% ;据个体间共有带数和 Nei′s遗传相似率计算公式 ,计算出普通鲫鱼平均遗传相似率为 88.6 8% .上述两项指标的初步分析表明 。

尼罗罗非鱼RAPD标记及其遗传多样性分析

采用 4 18个引物对尼罗罗非鱼进行了RAPD分析 ,筛选出 4 6个重复性好、可用于尼罗罗非鱼RAPD标记的引物 .另用 12个引物对尼罗罗非鱼群体 (2 3尾 )进行了遗传多样性分析 :共检出 5 8个位点 ,其中 18个位点表现出多态性 ,多态位点比例达 31.0 3% ,其群体的Nei&Li氏遗传相似率为 90 .2 3% ,申农信息指数为0 .10 0 5bit.上述三项指标表明 ,该尼罗罗非鱼群体保持着较高水平的遗传变异 .

6种重要经济鱼类生长激素完整cDNA的克隆和序列分析(英文)

通过RT PCR、3′ RACE、5′ RACE方法 ,从 6种重要经济鱼类———大眼鳜 (Sinipercakneri)、石斑鱼 (Epinepheluscoioides)、黄鳝 (Monopterusalbus)、鲶鱼 (Silurusasotus)、泥鳅 (Misgurnusanguillicaudatus)和方正银鲫 (CarassiusauratusgibelioBloch ,FangZhengcruciancarp)中克隆了生长激素 (GrowthHormone ,GH)的完整cDNA序列 (除石斑鱼序列外 ,其他生长激素序列均系第一次克隆 ) ,并详细分析了其序列特征。测序结果显示 ,克隆的 6种GHcDNA长度依次为95 3bp、10 2 3bp、82 5bp、10 82bp、115 4bp和 1180bp ,它们均包含一个长度为 6 0 0个左右核苷酸的完整阅读框 ,分别编码一个 2 0 0个左右氨基酸的蛋白 :大眼鳜、石斑鱼和黄鳝GH为 2 0 4个氨基酸 ,鲶鱼GH为 2 0 0个氨基酸 ,泥鳅和方正银鲫GH为 2 10个氨基酸。这 6种蛋白序列与其他已知的鱼类GH序列都有较高的同源性 ,特别是与相同目的鱼类序列相比。通过序列比对 ,在这些蛋白序列内鉴定了许多保守的氨基酸残基 ,其中的大多数聚集而成 5个保守域。基于这 6种鱼类序列的编码区和其他鱼类的GH编码序列进行分子系统学分析 ,结果 (MP和NJ树 )与根据形态特征构建的系统发育树基本一致 ,特别是在硬骨鱼类较大分类阶元 (目间、目以上 )的系统发育研究方面?

依据RAPD片段克隆而建立的团头鲂PCR鉴定法

通过对团头鲂 RAPD片段的克隆、Southern杂交筛选和 DNA序列分析 ,设计出 3对 PCR引物 :M1F/ M1R、M3 F/ M3 R和 M5 F/ M5 R.这 3对引物分别扩增出约 1.0 0、1.15、0 .5 6kb的 DNA主带 ;H ae 能将前两个片段酶解成两个几乎相等或相似的小片段 .经部分团头鲂群体和其它 12种鱼 DNA PCR验证 ,除三角鲂外 ,这 3对引物具有很强的团头鲂特异性 ,重复性 10 0 % ,可以用于除三角鲂以外的团头鲂的分子标记或分子鉴定 .

核糖体蛋白rpl15cDNA序列在真骨鱼类系统进化研究中的价值

应用RTPCR,从真骨总目(Teleostei)5目15种鱼类中首次克隆了核糖体大亚基蛋白L15(rpl15,ribosomalproteinL15)的完整cDNA序列。以海鲢形亚组(Elopomorpha)的鳗鲡作为外类群,对这些真骨鱼类的核糖体蛋白L15cDNA序列进行了系统发育分析,结果表明:(1)rpl15基因在真骨鱼类等许多真核生物进化中高度保守;(2)系统树中各物种之间的关系与形态分类一致。rpl15编码区适合于真骨鱼类目以上分类阶元的分子系统学研究。

食蟹猴疟原虫 (Plasmodium cynomolgi)中一个真核翻译起始因子4A(eIF-4A)同源蛋白的cDNA克隆、表达和ATP酶活性测定(英文)

真核翻译起始因子 4A(eukaryoticinitiationfactor 4A ,eIF 4A)是DEAD盒蛋白家族的ATP依赖性的RNA解旋酶类中的一个原型成员 .它在真核细胞的蛋白质合成的起始过程中起着关键性作用 .通过PCR扩增和放射探针杂交相结合的方法筛选食蟹猴疟原虫 (Plasmodiumcynomolgi)的cDNA文库 ,克隆了一个eIF 4A同源蛋白的完整cDNA序列 ,命名为CH1F .CH1F全长 1 75 3bp ,包含一个1 1 97bp的完整阅读框 ,推测编码一个由 398个氨基酸组成的蛋白 .对CH1F的蛋白序列用BlastP进行搜索和分析 ,提示它应该是DEAD盒家族的一个eIF 4A同源蛋白 ;用DNAStar将其与许多典型的DEAD盒蛋白序列进行比对分析 ,结果显示 :比起其它的DEAD盒蛋白 ,它与eIF 4A或eIF 4A的同源蛋白具有更高的同源性和更多序列上的相似结构域 .将包含完整阅读框的片段亚克隆进表达载体pET 2 8a (+) ,在大肠杆菌DH5α中表达 ,产生的融合蛋白大小在 4 5kD左右 .对该融合蛋白进行纯化、重新折叠和初步鉴定 .ATP酶活性检测显示 ,该融合蛋白只有很低的ATP酶活性 ,而且它的ATP酶活性似乎不依赖于核酸底物 .对这一检测结果给出 3种可能的原因 .这一检测结果与根据序列分析得到的推论———CH1F蛋白可能是一个eIF

末端标记限制性片段的基因组DNA指纹法

报道了分析基因组DNA多态性的方法：末端标记限制性片段的基因组DNA指纹法（RFEL－DNAFingerprinting）。通过此方法对莫桑比克非鲫核DNA进行了初步的分析。结果表明，此方法是一种简单、灵敏、稳定、可变换谱带复杂程度和有着广泛应用前景的一种鉴定生物基因型的方法。

哺乳动物性腺分化的分子子基础

哺乳动物性腺分化的分子子基础宋平，胡珈瑞（武汉大学生命科学院，武汉４３００７２）１性别决定和分化哺乳动物性别决定和分化始于建立染色体性别时卵细胞受精的那一瞬间。有一条正常Ｙ染色体的哺乳动物为雄性，缺少Ｙ染色体的则为雌性；Ｙ染色体上含有ＳＲＹ（Ｓｅｘｄ...

在斑马鱼Ⅰ和Ⅱ期卵母细胞中优势表达基因zRAP55的鉴定(英文)

通过性腺特异性表达基因的筛选,作者发现了一个在斑马鱼卵巢中富集的基因zRAP55。zRAP55蛋白由382个氨基酸组成并含有一个高度保守的Lsm区。zRAP55蛋白与其他脊椎动物一致性在56%以上。RT-PCR结果表明,zRAP55优势表达于卵巢中。原位杂交和免疫组织化学结果表明:在Ⅰ期和Ⅱ期卵母细胞中,zRAP55的阳性信号强烈,均匀地分布于整个细胞质中,但是在Ⅲ期和Ⅳ期卵母细胞中均检测不到信号。作为一个RNA相关蛋白,zRAP55可能在早期卵母细胞中具有调节蛋白质翻译的重要作用。

结扎子宫动脉上行支对剖宫产术出血的防治

目的 探讨结扎子宫动脉上行支对剖宫产术出血时的防治意义。方法 回顾性分析 1998～ 2 0 0 3年 70例剖宫产术中出血或术后可能出血患者施行子宫动脉上行支结扎法的适应证 ,方法及效果等。结果 对 5 5例剖宫产术中出血患者及 15例可能术后出血患者施行了该术 ,其中单侧结扎 11例 ,双侧结扎 5 9例 ,所有病例止血效果满意 ,无晚期产后出血 ,1例并发阔韧带血肿。结论 正确掌握该方法需注意结扎时部位、深度、宽度、单双侧等。该方法止血简单迅速、效果确切。

25例异位妊娠误诊分析

我院１９８６年２月～１９９１年７月收治异位妊娠２８０例，其中误为急性阑尾炎、盆腔包块、流产、急性胃肠炎、急性胰腺炎等疾病２５例，误诊率为８．９％。由此提示：对成年女性急腹症患者应排除异位妊娠。