复方高滋斑片对自发性高血压大鼠的降压作用及对RAAS调控机制的研究

目的评价复方高滋斑片(Compound gaoziban tablet,CGT)对自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)的降压药效并探讨其对RAAS(Renin-angiotensin-aldosterone system)调控的机制研究。方法将40只12周龄的SHR随机分为:模型组、阳性药组(酒石酸美洛托尔片组)、复方高滋斑片高、中、低剂量组;另设对照组为8只同周龄的Wistar-Kyoto大鼠(WKY)。每天以10 mL·kg-1的灌胃体积,连续口服给药9周,并每周定时测量大鼠收缩压(Systolic pressure,SBP)。给药9周后处死各组大鼠并取材,检测血清血脂水平、肝功能水平,用ELISA法检测肾素(Renin)、血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(Aldosterone,ALD)、内皮素1(Endothelin-1,ET-1)的水平;通过HE染色和Masson染色观察大鼠脏器组织的病理变化。qRT-PCR法检测血管紧张素转化酶(Angiotensin-converting enzyme,ACE)、血管紧张素Ⅱ1型受体(AngiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)和内皮型一氧化氮合成酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的相对表达量。结果与模型组相比,CGT对收缩压均有一定程度的降低(P<0.05)。检测血清中血脂水平,发现与模型组比较,CGT对大鼠血清中的甘油三酯(Triglyceride,TG)和高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)的水平有显著性的降低作用(P>0.05),但对大鼠血清中的葡萄糖(Glucose,Glu)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)和低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)均无影响。检测血清样本中的转氨酶水平,发现与模型组比较,CGT对大鼠血清中的谷草转氨酶(Aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)和谷胱甘肽S转移酶(Glutathione Stransferase,GST)的水平均有不同程度的降低作用(P<0.05,P<0.01)。检测血清样本中Renin、AngⅡ、ALD、ET-1的含量,与模型组比较,CGT对大鼠血清中的Renin、AngⅡ、ALD和ET-1的含量均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01)。qRT-PCR结果显示CGT能显著下调ACE、AT1R mRNA的表达(P<0.05,P<0.01),显著上调eNOS mRNA的表达(P<0.05,P<0.01)。结论复方高滋斑片具有一定的降压效果,且对高血压引发的肝脏和肾脏的病变具有一定的缓解作用;其降压机制可能与调节RAAS有关。

复方高滋斑片通过PI3K/AKT改善自发性高血压大鼠肾损伤的研究

目的通过自发性高血压大鼠模型来探究复方高滋斑片改善高血压引发的肾损伤机制的研究,为临床应用提供理论基础和实验依据。方法将40只12周龄的自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertension rats,SHR)随机分为:模型组、阳性药组(酒石酸美洛托尔片组)、复方高滋斑片高、中、低剂量组;另设正常组为8只同周龄的Wistar-Kyoto(WKY)大鼠。每天以10 mL/kg的灌胃体积,连续口服给予复方高滋斑片9周,并每周定时测量大鼠收缩压(SBP)。通过HE染色和Masson染色观察大鼠肾脏的病理变化,并对胶原面积进行统计学分析。实时荧光定量PCR法检测大鼠肾脏中磷酸肌醇3-激酶(Phosphoinositide3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)的相对表达量。蛋白免疫印迹反应检测大鼠肾脏中PI3K、AKT、p-AKT(Phospho-protein kinase B,磷酸化蛋白激酶B)的相对表达水平。结果血压结果显示,与模型组比较,经复方高滋斑片灌胃9周后,高剂量组和中剂量组大鼠的收缩压均明显下降(P<0.05)。病理组织学观察显示,与模型组比较,复方高滋斑片能有效改善自发性高血压大鼠肾小球和肾小管的形态,减少炎性细胞的浸润,使其形态更接近正常组。Masson染色结果显示,与模型组比较,经复方高滋斑片给药后,高剂量组和中剂量组大鼠肾脏中的胶原纤维面积显著减少(P<0.05)。Western blot结果显示,经复方高滋斑片治疗后,各组的大鼠肾脏中的PI3K蛋白和p-AKT蛋白表达均有上调(P<0.05),且呈一定的剂量依赖性。PCR结果显示,经复方高滋斑片治疗后,各组的大鼠肾脏中的PI3K和AKT mRNA表达均有上调(P<0.05),且呈一定的剂量依赖性。结论复方高滋斑片能显著改善高血压引发的肾脏的损伤,通过激活PI3K/AKT通路,显著上调PI3K和AKT的表达,从而改善了肾脏的损伤,大大的减缓了肾脏纤维化的进程,有效减缓高血压病的发生和发展、预防和修复肾脏的器质性损伤。