膀胱癌患者尿液外泌体中miR-494-3p,LncRNA MAGI2-AS3表达水平及临床价值研究

目的探讨膀胱癌患者尿液外泌体中微小核糖核酸(microRNA,miR)-494-3p,长链非编码RNA(long noncoding RNA,LncRNA)MAGI2-反义RNA 3(MAGI2-antisense RNA 3,MAGI2-AS3)表达水平及临床应用价值。方法选取重庆两江新区第一人民医院2021年7月~2023年6月收治的105例膀胱癌患者为癌变组,另选取同期膀胱良性疾病患者101例作为良性组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3水平。Kappa检验分析尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3与病理活检诊断膀胱癌的一致性;受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3水平对膀胱癌的诊断价值。结果癌变组尿液外泌体miR-494-3p水平(1.41±0.32)高于良性组(1.02±0.24),LncRNA MAGI2-AS3水平(0.79±0.19)低于良性组(1.05±0.22),差异具有统计学意义(t=9.866,9.089,均P<0.05)。miR-494-3p高表达组肿瘤直径>3 cm,T3~T4期以及淋巴结转移的占比显著高于miR-494-3p低表达组,差异具有统计学意义(χ^(2)=5.806,6.999,8.289,均P<0.05)。LncRNA MAGI2-AS3低表达组T3~T4期及发生淋巴结转移的比例明显高于LncRNA MAGI2-AS3高表达组,差异具有统计学意义(χ^(2)=9.244,7.795,均P<0.05)。尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3联合与病理活检诊断膀胱癌的一致性较高(Kappa值=0.718,P<0.05)。ROC曲线显示,尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3水平单独诊断膀胱癌的AUC(95%CI)分别为0.812(0.752~0.863)和0.779(0.716~0.833),尿液外泌体miR-494-3p和LncRNA MAGI2-AS3水平联合诊断膀胱癌的AUC(95%CI)[0.877,(0.824~0.918)]显著高于两者分别单独诊断(Z=2.053,2.647,P=0.040,0.008)。结论膀胱癌患者尿液外泌体中miR-494-3p水平升高,LncRNA MAGI2-AS3水平下降,二者联合对膀胱癌的诊断价值较高。

白芍总苷对肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM耐药性的逆转作用及机制探讨

目的观察白芍总苷(TPG)对肝癌耐药细胞BEL-7402/ADM耐药性的逆转作用,并探讨其作用机制。方法体外培养人肝癌ADM敏感细胞BEL-7402(亲本组)和ADM耐药细胞BEL-7402/ADM(耐药组),将BEL-7402/ADM细胞转染HDAC3基因siRNA干扰质粒(干扰组)及空载质粒(空载组)24 h,用白芍总苷孵育BEL-7402/ADM细胞48 h(用药组)。取亲本组、耐药组、用药组细胞,分别以不同浓度ADM作用48 h;MTT法测算增殖抑制率,计算各组ADM的半数抑制浓度(IC_(50))。取亲本组、耐药组、空载组、干扰组及用药组细胞,分别采用RT-q PCR法和Western blot法检测细胞多药耐药基因MDR1和去乙酰化酶(HDAC3)mRNA和蛋白。结果亲本组、耐药组和用药组细胞ADM的IC_(50)分别为0.139、8.807、4.890 nmo L/L;用药组细胞对ADM耐药的逆转倍数为1.80倍,逆转率为45.23%。MDR1 mRNA及蛋白相对表达量耐药组、空载组>用药组>干扰组>亲本组(P均<0.05或0.01),HDAC3 mRNA及蛋白相对表达量耐药组、空载组>干扰组>亲本组、用药组(P均<0.05或0.01)。结论白芍总苷通过抑制HDAC3的表达,引起MDR1表达下调,从而逆转BEL-7402/ADM细胞的耐药性。

医学检验专业临床实习教学的规范化管理

医学检验是一门实践性和技术性很强的临床学科[1]。临床实习教学既是学生由理论向临床实践的过程,更是提高学生综合素质和实际工作能力的教育过程,也是学生角色转换的非常关键的阶段,是必不可少的环节。临床实习教学是医学教育极为重要的一个阶段,临床实习教学质量的好与坏,对学生今后的工作能力和态度影响很大,这与医院的实习教学管理水平密切相关[2]。重庆医科大学附属永川医院检验科在临床实习教学过程中非常注意规范教学管理体系,

MDR1短发夹RNA表达质粒的构建及其功能的初步研究

目的 构建在哺乳动物细胞中表达MDR1短发夹RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)的表达质粒 ,并初步探讨其对耐药肝癌细胞MDR1mRNA的抑制作用及抗肿瘤药物耐药性的影响。方法 根据Genbank中MDR1mRNA设计的两条多聚核苷酸序列 ,退火形成双链DNA ,再与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建 pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌细胞株BEL 74 0 2 /ADM ,RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测阿霉素对细胞的半数抑制浓度 (IC50 )。结果 PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制BEL 74 0 2 /ADMMDR1mRNA的表达 ,对阿霉素的耐药指数降低了17.5倍 ( 2 99.2 / 17.1)。结论 构建的 pshRNA MDR1表达质粒能有效地抑制转染细胞MDR1mRNA ,从而提高肿瘤细胞的药物敏感性。

急性脑梗死患者血浆B型脑钠肽检测的临床意义

目的探讨血浆B型脑钠肽(BNP)在急性脑梗死患者血浆中的含量变化及其临床意义。方法采用免疫化学发光法测定80例脑梗死急性期患者血浆BNP浓度,并以30例健康自愿体检者作为对照组。结果急性脑梗死组患者血浆BNP水平(153.24±69.76)ng/L,显著高于健康对照组(85.16±28.15)ng/L,差异具有统计学意义(P<0.01),大〔(183.94±85.06)ng/L〕、中〔(155.66±57.13)ng/L〕面积脑梗死组血浆BNP水平均显著高于小面积脑梗死组〔(90.38±31.82)ng/L〕,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆BNP水平在急性脑梗死患者中明显升高,提示其与脑梗死的发生密切相关,可能在脑梗死的发病过程中起重要作用。

乳腺癌患者联合检测CA15—3、CA125、CEA、SF的临床价值

目的探讨糖类抗原（cA）153、CA125、癌胚抗原（CEA）与血清铁蛋白（SF）联合检测对乳腺癌患者的互补诊断价值及在疗效观察中的临床意义。方法利用化学发光免疫方法检测36例乳腺良性疾病（乳腺良性疾病组）和30例健康体检者（对照组）以及70例乳腺癌患者（乳腺癌组）治疗前后血清CA15—3、CA125、CEA和SF的水平，并进行分析。结果乳腺癌组血清CA15—3、CA125、CEA和SF水平明显高于乳腺良性疾病组和对照组（P〈0．05）；乳腺癌组血清CA15—3、CA125、CEA和SF治疗前的水平明显高于治疗后的水平（P〈0．05），且治疗前水平明显高于对照组（P〈0．01）；四种肿瘤标志物联合检测均高于单一检测，其诊断敏感度达82．8％。结论血清CA15—3、CA125、CEA、SF联合检测可提高乳腺癌的阳性检出率和检测特异性，对乳腺癌的早期诊断、疗效监测以及预后判断均有重要意义。

2型糖尿病肾病患者同型半胱氨酸、C反应蛋白检测的临床意义

目的:探讨同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)和C反应蛋白(CRP)水平在2型糖尿病(T2DM)伴发糖尿病肾病(DN)中的意义。方法:根据尿白蛋白排泄率(UAE)将86例2型糖尿病(DM)患者分为单纯糖尿病组(SDM组)、糖尿病肾病组(DN组),36名健康者作为对照组,分别测定各组血清Hcy和CRP的水平,采用化学发光法测定Hcy,免疫比浊法测定CRP。并与对照组比较。结果:糖尿病肾病组血清Hcy、CRP水平与2型糖尿病组及正常对照组比较均显著升高,具有统计学意义(P<0.05)。另外Hcy和CRP分别与UAE呈显著正相关(r=0.528,0.442,P<0.01)。结论:DN患者血清Hcy和CRP水平随着UAE的增加而升高,两者之间关系密切,可能与DN的进展有关,可作为糖尿病肾病患者病情监测指标。

血清NSE水平与急性颅脑损伤患者预后的相关性

目的检测血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)在急性颅脑损伤患者中的水平,并探讨NSE与颅脑损伤及其预后之间的相关性。方法采用ELISA方法测定了98例颅脑损伤患者的血清NSE水平,结合Glasgow昏迷和预后分级进行分析。结果重型、中型、轻型颅脑损伤患者与对照组比较,血清NSE水平存在显著性差异(P<0.05);预后不良组和恢复良好组的血清NSE水平对比差异明显(P<0.05)。结论血清NSE水平与脑损害的严重程度呈正相关,是较重要的颅脑损伤的预后评估指标之一。

糖尿病肾病患者C-反应蛋白和纤维蛋白原的变化及意义

目的探讨血浆C-反应蛋白(CRP)和纤维蛋白原(Fbg)在糖尿病肾病(DN)患者中的变化及应用价值。方法根据尿清蛋白排泄率(UAER)将102例2型糖尿病(T2DM)患者分为单纯糖尿病组(SDM组)、早期糖尿病肾病组(EDN组)和临床糖尿病肾病组(CDN组);33例健康者作为对照组。分别测定各组CRP和Fbg的水平。结果各糖尿病组CRP和Fbg水平与健康对照组比较均具有统计学意义(P<0.05),EDN组和CDN组显著高于SDM组(P<0.05),CDN组显著高于EDN组(P<0.05)。CRP和Fbg分别与UAER呈显著正相关(r=0.485,0.357,P<0.01)。结论CRP和Fbg是糖尿病患者早期肾损伤的敏感指标,DN患者CRP和Fbg水平随UAER的增加而升高,可能与DN的进展有关。

AFP、AFU、TSGF、SF联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的探讨甲胎蛋白（AFP）、α-岩藻糖苷酶（AFU）、肿瘤相关物质群（TSGF）、铁蛋白（SF）联合检测对原发性肝癌（PHC）的互补诊断价值和提高诊断率的意义。方法对82例原发性肝癌患者（PHC组）、56例良性肝病患者（良性肝病组）及33例健康体检者（对照组）检测TSGF、AFP、SF和AFU，并进行比较。结果PHC组患者血清AFP、AFU、TSGF、SF均显著高于良性肝病组及对照组（P〈0．05），联合检测血清AFP、AFU、TSGF、SF诊断PHC的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均显著高于各单项标志物检测，联合检测诊断灵敏度为95．3％，特异度为84．2％。结论联合检测AFP、AFU、TSGF、SF四项指标，可提高PHC尤其是AFP阴性的PHC诊断率，对PHC的早期诊断有一定的指导意义。

血清淀粉样蛋白A与2型糖尿病及其合并大血管病变的关系

目的探讨血清淀粉样蛋白A(serumamyloid A,SAA)与2型糖尿病及其合并大血管病变患者的关系。方法将65例2型糖尿病患者按一定的纳入标准分成不伴血管病变34例和合并大血管病变组31例,另抽取30名健康体检者作为健康对照组。在特种蛋白仪上采用比浊法测定血清SAA水平,并进行分析。结果2型糖尿病组SAA水平显著高于健康对照组,差异具有统计学意义P<0.05),并发大血管病变患者SAA与不伴大血管病变患者组比较差异也具有统计学意义(P<0.05)。结论SAA在2型糖尿病及并发大血管病变患者中明显升高,在其发生发展中具有重要的临床意义,可能是2型糖尿病大血管病变的重要的危险因素。

肝细胞癌患者RhoC蛋白、CD44v6与微血管密度的关系

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者RhoC蛋白表达、细胞黏附分子CD44v6水平与微血管密度的关系。方法用免疫组织化学法检测HCC组织及正常肝组织(对照组)的RhoC蛋白、CD44v6与微血管密度(MVD),并进行分析。结果 HCC组织中RhoC蛋白、CD44v6阳性表达率及MVD均高于对照组(P<0.05);RhoC蛋白、CD44v6与HCC的组织分化程度、肿瘤有无侵袭转移相关(P<0.05),与肿瘤大小无关(P>0.05);RhoC蛋白与CD44v6表达呈正相关(P<0.05),且均与MVD呈正相关(P<0.05)。结论 HCC组织中RhoC蛋白、CD44v6水平均增高,它们可能协同促进血管形成,参与HCC的发生、发展。

SAA、VCAM-1检测在2型糖尿病并发大血管病变中的临床价值

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、血管细胞间黏附分子1(VCAM-1)与2型糖尿病及其合并大血管病变患者的关系。方法将65例2型糖尿病患者按一定的纳入标准分成无并发症组34例和合并大血管病变组31例,另抽取30例健康体检者作为健康对照组。采用ELISA法测定血清SAA和VCAM-1的水平,并进行相关性分析。结果 2型糖尿病并发大血管病变患者SAA、VCAM-1水平与无并发症组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);另外,相关分析显示,SAA与VCAM-1呈显著正相关(r=0.507,P<0.05),SAA、VCAM-1分别与空腹血糖(r=0.312、0.296,P<0.05)呈正相关。结论 SAA、VCAM-1在2型糖尿病并发大血管病变患者中明显升高,在其发生、发展中具有重要的临床意义,可能是2型糖尿病并发大血管病变的重要危险因素。

缺血性脑卒中患者血清LP(a)和CRP水平与预后的相关性

目的:探讨缺血性脑卒中患者血清脂蛋白a[liporotein-a,LP(a)]和C-反应蛋白(C-reactiveprotein,CRP)水平与疾病预后的相关性。方法:采用透射比浊法分别在急性期和恢复期检测46例脑梗死患者的血清LP(a)和超敏CRP的浓度,并与30例正常人进行对照。结果:(1)缺血性脑卒中组急性期和恢复期LP(a)分别为(315.05±142.16)mg/L和(311.68±169.20)mg/L,与正常对照组(189.57±152.49)mg/L比较,两次结果差异均有显著性(P<0.05),但是急性期与恢复期LP(a)差异无显著性(P>0.05)。(2)与正常对照组(4.93±1.39)mg/L比较,缺血性脑卒中组急性期CRP(15.32±1.73)mg/L和恢复期CRP(6.17±1.45)mg/L差异有显著性(P<0.05),而其恢复期CRP与急性期比较差异有显著性(P<0.05)。结论:LP(a)与CRP可作为缺血性脑卒中的观察指标。

多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对肿瘤的筛查价值

目的:探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对于肿瘤诊断的临床应用价值。方法:使用多肿瘤标志物蛋白芯片检测仪检测46例健康体检者、63例已知的各期各种肿瘤患者和39例良性疾病患者的12种肿瘤标志物。结果:63例肿瘤患者中,51例结果异常,阳性率为80.95%,显著高于健康体检者与良性疾病患者(P<0.05)。被检测46例健康体检者中,一项以上超出参考值范围的结果有9例,占19.57%。结论:多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统具有较高灵敏度和特异性,对肿瘤的早期诊断具有一定的价值。

载体介导的RNA干扰技术抑制肝癌耐药细胞MDR1表达的研究

目的 :构建含多药耐药基因MDR1的短发夹状RNA(shorthairpinRNA ,shRNA)表达质粒 ,观察对肝癌耐药细胞Bel 740 2 /R的MDR1mRNA的抑制作用。方法 :利用分子克隆技术 ,将含MDR1的双链DNA ,与经双酶切后的载体PGE 1连接 ,构建pshRNA MDR1重组质粒 ,在脂质体的介导下转染肝癌耐药细胞株Bel 740 2 /R ;RT PCR分析MDR1mRNA的表达 ,MTT法检测细胞对药物的敏感性 ,流式细胞仪检测细胞内罗丹明 12 3 (Rh12 3 )的潴留和P gp的表达。结果 :PCR和DNA测序证实了表达质粒构建成功 ,并能明显地抑制MDR1mRNA的表达 ;对盐酸表柔比星和顺铂的半数抑制浓度IC50明显降低 ,P <0 0 5 ;P gp的表达阳性率降低了 5 7 3 % ;细胞内Rh12 3的浓度显著增高 ,P <0 0 5。结论 :构建的pshRNA MDR1表达质粒能有效地降低肝癌耐药细胞MDR1mRNA和P gp的表达。

血清淀粉样蛋白A和白细胞介素-18与2型糖尿病及合并大血管病变的关系

目的探讨血清淀粉样蛋白A（SAA）、白细胞介素（IL）-18与2型糖尿病（他DM）及其合并大血管病变的关系。方法将65例T2DM患者（T2DM组）分为T2DM无并发症组（34例）和T2DM合并大血管病变组（31例），另选取30例健康体检者作为对照组。采用ELISA法测定SAA和IL-18水平，并进行相关性分析。结果T2DM组患者SAA、IL-18水平[（3．09±0．96）mg／L和（98．8±36．4）ng／L]显著高于对照组[（1．06±0．45）mg／L和（58．9±15．6）ng／L]，差异均有统计学意义（P〈0．05），T2DM合并大血管病变组患者SAA、IL-18水平[（6．34±1．52）mg／L和（141．2±48．3）ng/L]与T2DM无并发症组患者[（2．65±0．39）mg／L，（80．2±20．1）ng／L]比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。另外相关分析显示：SAA与IL-18呈正相关（r=0．615，P〈o．05），SAA、IL-18分别与空腹血糖呈正相关（r=0．312、0．428，P〈0．05）。结论SAA、IL-18在T2DM及合并大血管病变患者中明显升高，在其发生和发展中具有重要的临床意义，可能是T2DM合并大血管病变的重要危险因素。