以临床案例为导向培养急诊科住培医师临床思维能力的探索与实践

目的 以临床案例为导向,探索提升急诊科住培医师临床思维能力的教学方法。方法 选取温州医科大学附属第一医院急诊科专业基地培训的2017~2022届住院医师104名,根据是否通过临床案例教学法培训分为未培训组(n=63),培训组(n=41)。分析两组住培医师自主学习能力、写作能力、临床思维能力及年度考核、结业考核成绩。结果 住培第一年末及结业后住培医师自我感知自主学习能力、写作能力、病史采集能力、体格检查能力及技能操作能力均有所提升,且差异有统计学意义(t值分别为18.19、14.68、11.61、20.82、19.59,P<0.001)。没有通过临床案例教学法培训的已结业住培医师自我感知自主学习能力、写作能力、病史采集能力、体格检查能力及技能操作能力较通过临床案例教学法培训的已结业住培医师差。培训第二年年度考核临床思维能力成绩较第一年好(分:82.23±1.69 vs.80.70±1.52;t=2.71,P=0.016),结业考核临床思维能力成绩较第二年好(分:84.20±2.60 vs.82.23±1.69;t=2.22,P=0.043)。结论 以临床案例为导向的教学方法在一定程度上有助于提升急诊科住培医师的临床思维能力,为不断完善我国急诊科住院医师规范化培训提供参考,推动我国住院医师规范化培训工作不断走向进步。

黄苓昔对脂多糖诱导的H9C2心肌细胞炎症的保护作用及机制研究

目的探讨黄芩苷对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的H9C2心肌细胞炎症反应的保护作用及可能机制。方法培养H9C2心肌细胞,用终浓度为10、20、30 μmol/L黄芩苷预处理12 h后,加入终浓度为1 μg/mL的LPS刺激6 h,对照组加入等量的生理盐水,收集细胞样本。CCK-8(The Cell Counting Kit-8)检测细胞活力,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)的蛋白表达水平的变化。采用SPSS 23.0统计软件,两组样本比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析检验。结果对照组心肌细胞存活率为(93.67±1.453)%,而LPS刺激组存活率为(60.33±2.603)%。与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞存活率降低(P<0.05)。对照组H9C2心肌细胞IL-6表达量为(49.33±2.42)pg/mL,TNF-a表达量为(86.33±1.85)pg/mL,IL-1β表达量为(28.67±4.66)pg/ml。与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平升高(P<0.05),p-NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-IκBα蛋白水平升高(P<0.05),IκBα蛋白水平降低(P<0.05),而NF-κB p65及p38 MAPK蛋白表达无明显变化(P>0.05)。与LPS组相比,黄芩苷干预组H9C2心肌细胞存活率升高(P<0.05),IL-6、IL-1β及TNF-α表达水平降低(P<0.05),p-NF-κB p65、p-p38 MAPK、p-IκBα蛋白水平降低(P<0.05),IκBα蛋白水平升高(P<0.05),而NF-κB p65及p38 MAPK蛋白表达无明显变化(P>0.05)。结论黄芩苷可能通过抑制NF-κB、p38 MAPK的激活来减轻LPS诱导的心肌细胞炎症反应,提高细胞的存活率。

黄芩苷调节STIM1介导的钙超载减轻脂多糖诱导的心肌细胞凋亡

目的探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法培养H9C2心肌细胞,分为正常组、黄芩苷组(10μmol/L的黄芩苷预处理12 h)、LPS组(1μg/ml,刺激作用6 h)、LPS+黄芩苷组(10μmol/L的黄芩苷预处理12 h,再加入终浓度为1μg/ml刺激6 h),收集细胞样本。CCK-8(The Cell Counting Kit-8)检测细胞活力,TUNEL(Terminal-deoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling)法检测细胞凋亡,共聚焦显微镜观察细胞钙库操控性钙离子内流(SOCE)水平的变化,免疫印迹法检测细胞cleaved-caspase3、Bcl-2及Bax蛋白表达水平的变化,荧光定量聚合酶链反应(PCR)、免疫印迹法检测细胞上蛋白基质交感分子1(STIM1)分别在mRNA和蛋白表达水平的变化。结果与对照组相比,LPS诱导后H9C2心肌细胞存活率降低[(93.8±1.7)%与(65.6±1.2)%,P<0.05],凋亡百分率升高[(8.7±1.2)%,LPS组为(47.4±5.2)%,P<0.05],钙离子内流增加(P<0.05),cleaved-caspase3、Bax蛋白表达水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),STIM1 mRNA及蛋白水平升高(P<0.05)。与LPS组相比,黄芩苷干预组H9C2细胞心肌细胞存活率升高(P<0.05),凋亡百分率降低(P<0.05),钙离子内流减少(P<0.05),cleaved-caspase3、Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),STIM1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。结论黄芩苷具有减轻LPS诱导心肌细胞凋亡的能力,其通过改善其调控STIM1-SOCE钙超载减轻LPS引起的心肌细胞凋亡。

姜黄素上调线粒体融合蛋白2减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的探讨姜黄素对脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法取120只清洁级BALB/c雄性小鼠随机(随机数字法)分成8组,即假手术组、脓毒症组、姜黄素对照组、姜黄素干预组、阴性病毒-脓毒症组、阴性病毒-姜黄素干预组、线粒体融合蛋白(Mfn2)干扰-脓毒症组、Mfn2干扰-姜黄素干预组,每组15只。脓毒症组及姜黄素干预组通过盲肠结扎穿孔术(cecal ligation and puncture,CLP)造模,姜黄素干预组及姜黄素对照组予姜黄素200 mg/(kg·d)灌胃1周,阴性病毒-脓毒症组及阴性病毒-姜黄素干预组通过尾静脉注射阴性腺相关病毒来建立,Mfn2干扰-脓毒症组及Mfn2干扰-姜黄素干预组通过尾静脉注射携带Mfn2干扰序列的腺相关病毒建立模型,各组均于24 h后处死小鼠。通过肺湿干比和病理学检查反映肺损伤程度,ELISA法检测肺泡灌洗液的炎症因子TNF-α和IL-6,Western blot检测细胞凋亡的关键分子caspase-3的活化,并通过TUNEL检测细胞凋亡。采用SPSS 22.0软件进行统计分析,计数资料比较采用χ^2检验,计量资料组间比较采用单因素方差分析。结果与假手术组比较,脓毒症组小鼠肺组织湿干重比显著增加(71.11±3.78 vs 31.11±5.61,P=0.002);与假手术组相比,脓毒症组织病理评分明显增加(P=0.006),炎症因子TNF-α(P=0.001)和IL-6(P=0.012)显著增高,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样明显增加(P=0.001)。与脓毒症组比较,姜黄素干预组小鼠肺组织湿干重比明显降低(32.84±6.15 vs 71.11±3.78,P=0.004),组织病理评分显著降低(P=0.004),炎症因子TNF-α(P=0.013)和IL-6(P=0.003)均明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达同样显著减少(P=0.012)。在下调Mfn2后,Mfn2干扰-姜黄素干预组与Mfn2干扰-脓毒症组相比,小鼠肺组织干湿重比无明显降低,组织病理评分也无显著降低,炎症因子TNF-α和IL-6均无明显降低,肺组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白caspase-3 cleaved表达无显著减少。结论姜黄素可能通过上调线粒体融合蛋白2的表达减轻脓毒症急性肺损伤。

不同评分系统对急性中毒预后评估价值的比较

目的比较PSS、APACHEII、SAPSII、SOFA 4种评分系统在急性中毒预后评估中的价值。方法回顾性分析2015年1月至2016年10月收住我院急诊重症监护室EICU的231例急性中毒患者的临床资料,收集入院24h内PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分,根据28d临床结局分为存活组和死亡组,比较两组临床资料的差异,分析两组患者的的PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分的相关性,并对4种评分系统分值及ROC曲线下面积进行比较,评估4种评分系统的预测价值。结果与死亡组比较,存活组PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分的差异有统计学意义(P<0.01)。PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分之间呈明显正相关关系(P<0.01),4种评分系统的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.833、0.887、0.843、0.843。APACHEII评分曲线下面积大于PSS评分、SAPSII评分、SOFA评分,差异有统计学意义(z=2.351,2.317,2.217;P=0.019,0.021,0.027),另3种评分曲线下面积(AUC)比较的差异无统计学意义(P>0.05)。PSS评分、APACHEII评分、SAPSII评分、SOFA评分截断值(cut-off)、灵敏度、特异度、准确率分别为(2.5,93.1%,50.9%,61.5%)、(14.5,82.8%,75.7%,77.48%)、(31.5,77.6%,76.90%,77.08%)、(5.5,77.60%,74.60%,75.35%)。结论4种评分系统均可对急性中毒患者的预后进行评估,APACHEII评分对预后的评估能力及准确率优于其他3种评分系统。