控制性超促排卵大鼠模型的建立

目的选择理想的符合临床实际的控制性超促排卵(COH)大鼠模型,为后续的实验提供良好的实验基础。方法将75只大鼠随机平均分为正常组(N),模型10组(M10),模型20组(M20),模型40组(M40)和模型100组(M100),每组各15只。各模型组分别于动情期后一日的下午5:00给予腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)10单位、20单位、40单位和100单位,并于48 h后,再分别给予腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10单位、20单位、40单位和100单位,注射完后立即合笼,以次日行阴道涂片见大量精子记为怀孕1 d。在第8天,行剖宫探查,记录大鼠的妊娠情况和着床的胚泡数。另取25只大鼠,按上述方法随机分对照组和不同剂量干预组,每组5只,各组大鼠在妊娠第5天取材,处理后观察子宫内膜胞饮突和LIF蛋白的表达。结果各组大鼠交配率无统计学差异(P>0.05)。与N组相比,M10组大鼠怀孕率无明显降低(P>0.05),M20、M40和M100组大鼠怀孕率明显降低(P<0.01);和N组相比,M10组大鼠胚泡着床位数无明显增加(P>0.05),M20、M40和M100组大鼠胚泡着床数明显增高(P<0.05)。和N组相比,M10大鼠子宫内膜LIF蛋白表达量无明显差异(P>0.05);M20、M40和M100组大鼠子宫内膜LIF蛋白表达量明显降低(P<0.05);M40和M100组大鼠子宫内膜LIF蛋白表达量比M20组更少,但差异无统计学意义(P>0.05)。N组大鼠在妊娠第5天子宫内膜腺上皮细胞表面胞饮突丰富;M20大鼠子宫内膜腺上皮细胞表面几乎未见明显胞饮突表达。结论M20组大鼠妊娠率较正常组明显降低,且平均胚泡数较高,胞饮突提前出现,LIF表达较正常组降低,是较为符合临床实际的理想模型。

乳腺癌术后患侧上肢水肿中西医治疗进展

乳腺癌(Breast Cancer)是女性发病率最高的恶性肿瘤,是导致全世界女性癌症相关死亡的第二大原因[1]。乳腺癌术后患侧上肢水肿(breast cancer-related lymphedema,BCRL)是常见术后并发症,其发生率高达 21%[2]。患者会出现上肢肿胀、乏力、疼痛、硬如象皮肿等症状,甚至导致患侧上肢功能障碍,严重影响患者生存质量。随着中医、西医对其研究的深入,提出了不同的病因病机以及治疗方案,在减轻乳腺癌术后患侧上肢水肿的症状、提高患者生活方面取得了良好疗效。现将乳腺癌术后患侧上肢水肿中西医治疗进展作为综述。

辅助生殖领域不同患者群体针灸临床应用述评

目前关于针灸介入辅助生殖技术(ART)正处于积极探索阶段,有关的临床研究也日益增多。针灸在ART临床中应用形式多样化、作用广泛、选穴多样化与治疗个体化。“肾虚”被认为是常规行ART患者的关键病机,气血亏虚、肝郁等则为次要病机,选穴多以补肾、健脾、疏肝与补中益气等为主要治则。但是,对于合并有多囊卵巢综合征(PCOS)、卵巢低反应与卵巢早衰(POI)等疾病的ART患者,原本所患合并症本身会导致机体存在相应的中医气血阴阳失衡状态或有既定的中医病因病机,而在行ART之后,加上控制性超促排卵(COS)的干预,其病机必将有所变化。本研究分别就合并PCOS、卵巢低反应、POI与反复着床失败等不同并发症的患者群体,结合目前的临床研究进展,对不同患者群体的病机和治疗策略以及针灸在ART并发症的应用进行述评,以期为后续的研究提供思路。

从AMPK/PKC信号通路探讨盐酸药根碱促进NCI-H716细胞分泌GLP-1的作用机制

目的研究盐酸药根碱(JAT)对NCI-H716细胞分泌GLP-1的促进作用,并初步阐明JAT恢复内源性GLP-1分泌作用与AMPK/PKC信号通路相关。方法采用CCK-8法检测不同浓度JAT(6、30、60、90、150、300μmol/L)对NCI-H716细胞活性的影响,筛选150μmol/L JAT作为本实验基本浓度。分别选择JAT低、中、高浓度(100、150、200μmol/L)、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Dorsomorphin(2、10、50μmol/L)、150μmol/L JAT+不同浓度抑制剂Chelerythrine(2、10μmol/L)对NCI-H716细胞进行干预,采用CCK-8方法检测细胞活性,酶联免疫吸附法(ELISA)测定GLP-1含量,RT-PCR法检测GLP-1 mRNA水平,Western blot法检测GLP-1蛋白表达。结果JAT可促进NCI-H716细胞分泌GLP-1(P<0.05);AMPK通路抑制剂Dorsomorphin和PKC通路抑制剂Chelerythrine均可抑制JAT的作用(P<0.05),且抑制剂Dorsomorphin的作用具有浓度依赖性。结论JAT通过AMPK/PKC信号通路促进NCI-H716细胞分泌GLP-1,具有恢复内源性GLP-1分泌作用。

从中医体质学说浅析新型冠状病毒肺炎的预防与早期干预

体质是辨证的基础,决定着临床证候的类型,不同体质感邪后表现为不同的证型。平和质对疾病抵抗力较强,病邪入体后也更易恢复,预防以益气药物为主,也可不服药。气虚质、阳虚质者,因正气虚弱,可多症并发,若平素有基础疾患,脏腑失和,则更易转为重症,预防需益气固表,扶正解毒,多以玉屏风散为基础方。气郁质、血瘀质者,易气滞血瘀,感邪后恢复较慢,预防需调畅气机,补肾活血与益气祛邪兼顾,可用黄芪、当归、川芎、补骨脂等药物。痰湿质、湿热质者,平素湿盛于内,易出现肺气郁闭证、湿邪困脾证、阳明热盛证和阳明腑实证。痰湿质者预防需芳香化湿,开窍醒神,以藿香正气散为基础方;湿热质者预防需调和表里,扶正解毒,湿热同祛,以小柴胡汤为基础方;阴虚质者,平素阴液亏虚,可发展为阴阳俱虚、正气衰微之证,预防需益气养阴生津,补肺阴肝阴,可用北沙参、西洋参、百合、桑叶、菊花等。早期(轻症)阶段,除注意患者平素体质,需以辨证分型为重。若平素阳盛,可转化为表里俱热的实热证,多用清热解毒方剂如清瘟败毒饮、银翘散等,或外寒内热,可用大青龙汤等。若平素气虚、阳虚,正气虚弱,易出现阳虚寒凝证,可用麻黄加术汤等;若热毒邪气逆传心包,或者毒邪内陷、肺气衰败,要注意内闭外脱之危证。气郁质和血瘀质者,可用达原饮等;痰湿质、湿热质者,可用藿香正气丸等;阴虚质者,可用甘露消毒丹、人参败毒散等。

黄连不同方法提取物治疗2型糖尿病大鼠的比较研究

目的比较黄连不同方法提取物中有效成分的含量及其对2型糖尿病大鼠的治疗效果,探讨其主要成分含量与其疗效的相关性。方法①高效液相色谱法(HPLC)测定黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物中代表性有效成分的含量;②90只成年雄性Wistar大鼠作为研究对象,随机抽取15只作为正常对照组(N组),予以标准鼠饲料喂养,其余大鼠予以高脂饲料喂养联合尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型对照组(M组)、阳性对照组(D组)、黄连超临界萃取物治疗组(A组)和黄连模拟胃液提取物治疗组(B组);连续治疗9周后,比较各组大鼠的体重、OGTT血糖水平、血清三酰甘油(TG)及白介素-6(IL-6)水平以及肠道组织病理状态。结果①2种提取物在相同剂量时,黄连超临界萃取物中各代表性有效成分的含量均高于黄连模拟胃液提取物;2种提取物在有效剂量时,黄连超临界萃取物中仅小檗碱与巴马丁的含量高于黄连模拟胃液提取物;②以有效剂量治疗9周后,D组、A组、B组大鼠OGTT血糖水平、体重、血清TG及IL-6水平均明显低于M组大鼠(P<0.05);A组与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05);光镜下,D组、A组、B组大鼠肠道组织石蜡切片HE染色显示炎性改善均显著优于M组。结论黄连超临界萃取物及黄连模拟胃液提取物对2型糖尿病大鼠均有一定的治疗作用,可显著降低血糖、血脂、体重及血清IL-6水平,改善肠道慢性炎症,其主要成分含量与其疗效无相关性。

早发性卵巢功能不全致病因素及机制研究进展

早发性卵巢功能不全(premature ovarian insufficiency,POI)是指女性40岁之前出现卵巢功能减退甚至衰竭[1]。POI以高促性腺激素和低雌激素血症为特征,临床症状多表现为月经紊乱(闭经或月经稀发)、生育能力下降甚至不孕,常伴有潮热、盗汗、失眠等围绝经期症状。此外,在POI患者中,心血管疾病、骨质疏松症等疾病的患病风险及死亡风险均增高,严重影响了患者的生活质量和生命安全[2]。POI发病具有年龄特异性,在<40岁的女性中发病率约为1%,而在<30岁的女性中约为0.1%[3]。近年来POI患病率持续上升,全球自发性POI患病率已高达3.7%[4]。POI病因复杂,已确诊的POI病例中70%~90%的患者病因尚未明确。明确POI的病因及发病机制对寻求有效治疗方案、避免女性生殖损害、维护女性生殖健康具有积极意义。基于此,本文对近年来有关POI的致病因素及有关机制进行综述如下。

母胎界面树突状细胞在病理性妊娠中的作用机制研究进展

妊娠过程中,母胎界面少量的树突状细胞(DC)即可与母胎界面其他细胞滋养细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞、调节性T细胞(Treg细胞)等相互联系、相互影响,通过参与调控辅助性T细胞(Th细胞)1/Th2平衡、促进Treg细胞增殖、调控NK细胞等免疫耐受环节发挥重要的免疫耐受调控作用。此外,DC还可以表达一系列信号分子、细胞因子和趋化因子等,直接或间接参与调控蜕膜化、血管生成、胎盘形成等过程。而DC的数量、分化和功能异常会直接或间接导致各种病理性妊娠,如自然流产、先兆子痫、HELLP综合征、异位妊娠等。

新型冠状病毒肺炎所致的例外灾难状态下若干伦理问题

2019年12月新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疫情在武汉地区暴发,迅速波及全国。2020年3月12日,世界卫生组织宣布该疫情为全球大流行,目前已经累及200多个国家。在COVID-19所致的例外灾难状态下,既往长期持续存在的就医秩序和医患关系发生了急剧的变化。在此过程中,暴露出不少值得深入探讨的伦理问题。本文结合自身经历,总结出对COVID-19所致的例外灾难状态下的若干伦理问题的思考,比如COVID-19灾难状态形成的“医患命运共同体”面临的挑战、COVID-19患者的隐私权的保护、疫情期间应充分重视交叉感染保护医患双方权益、如何保障医疗资源的分配公平性、如何规范COVID-19相关科研伦理的审查和监管等,以供伦理学家,管理部门、临床和科研决策者参考。

从改善子宫内膜容受性文献厘析中药复方的治疗法则

子宫内膜容受性是指子宫内膜允许胚胎黏附、侵袭的能力,为决定胚胎能否成功着床的关键因素。尽管以体外受精-胚胎移植为主的辅助生殖技术已取得了显著发展,提高了患者在每个周期的胚胎移植率,但胚胎着床率一直徘徊在较低水平。其中,子宫内膜容受性不足是导致着床失败的重要原因之一。中医药应用于生殖领域历史悠久,由于多环节、多靶点的特点,其在改善子宫内膜容受性方面具有独特的优势。鉴于中药复方的异质性较大,目前尚缺乏规律总结,本研究拟通过分析改善子宫内膜容受性相关复方的药物成分,归纳中医治疗法则,以期为临床工作提供更多指导和启示。

外泌体miRNA在卵巢早衰中的研究进展

卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)是指各种原因导致的女性40岁以前卵巢功能病理性下降,并伴有闭经、性腺功能减退和不孕症等疾病,严重影响女性生殖健康。据统计[1],POF在30岁以下女性中的发病率约为0.1%,在40岁以下女性中的发病率为1%,其病因包括染色体异常、自身免疫因素、环境因素、心理因素和医源性因素等。目前治疗POF的方法主要包括激素治疗、卵母细胞和胚胎冷冻保存、卵巢组织移植和干细胞移植等,然而这些治疗方法往往存在不同程度的治疗局限性、操作侵袭性、质量不可控性,甚至可能产生同种异体移植的免疫反应,并且常常涉及伦理问题等[2]。外泌体为细胞产生的直径在30~100 nm的囊泡,是细胞间信号传递及药物治疗的载体,在肿瘤、免疫、心血管等领域已有深入研究,但在卵巢疾病尤其是POF方面的研究目前仍较为有限。微小RNA(microRNA,miRNA)是外泌体携带的主要功能因子,其在卵巢早衰的发生及治疗中具有重要意义。鉴于此,本文总结了目前外泌体miRNA在POF治疗中的研究现状,以期为POF的治疗提供新的思路和方法。

黄连有效成分盐酸小檗碱、盐酸药根碱、黄连碱及其混合物对NCI-H716细胞分泌胰高血糖素样肽1(GLP-1)的影响

目的:研究黄连有效成分对NCI-H716细胞分泌胰高血糖素样肽1(GLP-1)的影响。方法:分别设置空白对照组、盐酸药根碱(JAT)组、盐酸小檗碱(BER)组、黄连碱(COP)组、盐酸巴马汀(BM)及BER十COP十JAT高剂量组和BER+COP+JAT低剂量组,同时以BER组为阳性对照组。采用CCK-8法检测各组药物不同浓度下对细胞增殖的抑制作用,确定药物浓度范围;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NCI-H716细胞分泌GLP-1的量;采用聚合酶链式反应(PCR)检测NCI-H716细胞表达GLP-1RNA的量。结果:COP、JAT,以及高、低浓度BER+COP+JAT均能促进NCI-H716细胞分泌GLP-1(P<0.05),其中,BER+COP+JAT高浓度组及BER+COP+JAT低浓度组促GLP-1分泌作用均优于阳性对照组(P<0.05);COP、JAT组与阳性对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论:JAT、COP对NCI-H716细胞分泌GLP-1均有促进作用,且BER+COP+JAT混合组效果优于其单体组。

针刺辅助体外受精-胚胎移植临床研究的回顾与思考

针灸应用于生殖领域历史悠久。近20年来,许多临床研究致力于探讨针刺在辅助生殖技术中的应用价值。但由于研究结果的不一致性,针刺辅助体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的临床安全性和有效性一直备受争议。究其原因,与针灸临床试验缺乏规范化和标准化治疗方案密切相关。因此,本文回顾了1999年至2020年期间国际上发表的16项有关针刺辅助IVF-ET的代表性临床研究,归纳并总结了其分组设计、针刺方法(针刺时机、针刺频率、针刺穴位、针刺方式)和妊娠结局(妊娠率、临床妊娠率、持续妊娠率、活产率),并针对临床方案设计中的若干关键环节进行探讨,以期为今后的临床研究工作提供些许参考和帮助。

孕妇对COVID-19的易感性分析与治疗对策

新型冠状病毒肺炎(COVID-19)具有较强的传染性和致病性。孕妇作为特殊人群,其免疫状态、身体机能特点与普通人群存在差异,在妊娠期间可能处于一种免疫抑制的状态且血管紧张素转化酶2(ACE2)在妊娠期的基因上调、表达增加及活性升高,提示孕妇可能对COVID-19更易感。现有临床报道分析发现,COVID-19可能并不会增加孕产妇重病率和不良妊娠结局的发生。笔者认为合并COVID-19感染的孕妇,应及时诊治,其用药较一般患者需要更加谨慎。本团队在既往制定的诊疗方案和临床用药经验基础上,制定了"妊娠合并COVID-19的中医药治疗的同济推荐诊疗方案",以供临床参考。