用EIA微板法直接检测血清HBcAg的临床应用

用EIA微板法直接检测血清HBcAg，在乙肝HBcAg阳性者中，HBcAg阳性检出率为32．49％，在乙肝HBcAg、HBeAg、抗-HBc阳性者中，HBcAg阳性检出率为82．08％，在乙肝HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性者中，HBcAg阳性检出率为8.12％。HBcAg与Prc－S1有良好的相关性，HBcAg与HBV－DNA探针的阳性符合率为92.68％，特异性与HBV－DNA探针一致。

ELISA15分钟温育法对乙型肝炎“两对半”检测的研究

采用含ＰＥＧ的稀释液稀释酶标记物，ＥＬＩＳＡ温育时间可缩短到３７℃１５分钟，检测二肝“两对半”其持异性达到１００％，ＨＢｓＡｇ最低检出量为ｌｎｇ／ｍｌ，抗－ＨＢｓ为２ｍＵ／ｍｌ，ＨＢｅＡｇ的３种参比血清（３７＃，４９＃，５６＃），抗ＨＢｅ的３种参比血清（５５＃，５７＃，６１＃），抗。ＨＢｃ的３种参比血情（２＃，３＃，４＃），部颁的最高稀释度均可测出，１５分钟法对乙肝标志物检出稀释度高于常规法，批内变异ＣＶ３．１４％～１４．４７％，批间变异ＣＶ５．６１％～９．０９％，冷（４℃），热（３７℃）气温操作结果与室温操作结果无显著性差异，稀释的酶标记物于４℃保存６个月仍保持活性。

EIA微板法检测血清内乙型肝炎病毒HBcAg预包被的研究

采用预包被的方法，用ＥＩＡ微板法检测血清ＨＢｃＡｇ。微孔板经预包被１～６个月的研究表明，其ＨＢｃＡｇ阳性血清的Ｐ／Ｎ值无明显下降，ＣＶ值均在１０％以下，特异性为１００％，精密性检测为９．９３％。在临床应用上，现包被极与预包被６个月的微板比较，ＨＢｃＡｇ检出的阳性符合率为１００％。

ELISA微板法检测乙型肝炎病毒核心抗原的研究

以双抗体包被的抗体夹心法，用微板ＥＬＪＩＳＡ检测血清ＨＢｃＡｇ，确定双包被工作度ＭＣ－抗－ＨＢＣ（效价１：１０００）为０．０４μｌ／孔，ＭＣ－抗－ＨＢＳ（１ｍｇ／ｍｌ，５ｍｇ／ｍｌ）为３～４μｌ／孔；最佳裂解剂及其工作度为７％ＮＰ－４０巯基乙醇溶液。分别用不同的酶标记抗体检测，均证明双包被具有特异性。加入抗－ＨＥｃ进行阻断试验，其阻断率为７９．３％。对临床８４４例ＨＢｓＡｇ阴性的血清及１１４例ＨＢＶ－ＤＮＡ探针阴性血清用本法进行ＨＢｃＡｇ检测，均为阴性。在临床应用上，本法阳性率明显高于试管法，与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针阳性符合率为９１．４％，且特异性与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针一致。

30NCU/ml抗-HBc酶免疫法试剂盒的研制

本文研制了能直接检测原倍血清的30NCU/ml抗-HBc试剂盒(下称30NCU/ml试剂盒),结果判定仍以抑制率≥50％为阳性。30NCU/ml试剂盒特异性100％;精密性批内CV11％、批间CV12.3％;检测HBV血清盘阳性符合率96.2％,阴性符合率100％;稳定性:4℃6个月、37℃3周内仍稳定;与本室1NCU/ml试剂盒对比符合率98.1％,与市售1NCU/ml试剂盒对比符合率96.3％。

用ELISA微板法检测乙型肝炎病毒核心抗原

以双抗体包被的抗体夹心法，用微板ＥＬＩＳＡ检测血清乙型肝炎病毒核心抗原（ＨＢＣＡｇ），确定双包被工作浓度ＭＣ－抗－ＨＢｃ（效价１０００）为０．０４μｌ／孔，ＭＣ－抗－ＨＢｓ（１ｍｇ／ｍｌ）为３～４μｌ／孔；最佳裂解剂及其工作浓度为７％ＮＰ－４０巯基乙醇溶液。分别用不同的酶标记抗体检测，均证明双包被具有特异性。加入抗－ＨＢｃ进行阻断试验，其阻断率为７９．３％。对８４４例ＨＢｓＡｇ阴性的血清及１１４例ＨＢＶ－ＤＮＡ探针阴性血清用本法进行ＨＢｃＡｇ检测，均为阴性。在临床应用上，本法的阳性率明显高于试管法的，与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的阳性符合率为９１．４％，并且特异性与ＨＢＶ－ＤＮＡ探针的一致。

30NCU/ml抗-HBc酶免疫法试剂盒的研制

为了直接用原倍血清检测30NCU/ml 抗-HBc,我们研制出 CO 值30NCU/ml 抗-HBc 试剂盒(下称30NCU/ml 试剂盒)应用于临床,取得了满意的效果,现报告如下.一、材料与方法1.聚苯乙烯12微孔条购自厦门宏达塑料制品厂;HBcAg基因产品,武汉科卫生物技术研究所提供;二种单克隆抗-HBc混合物(MC·抗-HBc)北京302医院及本室自制,辣根过氧化物酶(HRP)购自上海丽株东风生物技术公司,抗-HBc 酶结合物(抗-HBc·HRP)系 MC·抗-HBc 用改良过碘酸钠法标记;稳定剂为本室研制;高浓度抗-HBc 血清,HBV 血清盘(54支)由卫生部临床检验中心提供;抗-HBc