丙酮酸激酶M2与miRNA-122在脓毒症相关AKI中的表达及其相关性研究

目的:探讨丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)与miRNA-122在脓毒症相关急性肾损伤(sepsis-associated acute kidney injury,S-AKI)中的表达及其相关性。方法:通过盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)法诱导S-AKI小鼠模型,正常小鼠作为对照组。各模型组CLP术后4、8、12及24 h分别取血清及肾组织备用,生化分析仪检测各时间点尿素氮、肌酐水平。比色法检测各组小鼠血清及肾组织中的乳酸水平。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠肾组织中miRNA-122及pkm2 mRNA表达情况。Western blotting法检测各组小鼠肾组织中PKM2蛋白表达情况。采用Pearson法分析miRNA-122、PKM2与乳酸水平两两相关性。结果:(1)与对照组比较,CLP处理12、24 h后尿素氮、肌酐水平明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)与对照组比较,CLP处理12、24 h后血清及肾组织中的乳酸水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)与对照组比较,CLP术后4 h miRNA-122在肾组织中表达开始降低,12~24 h明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,CLP术后4 h PKM2的mRNA与蛋白在肾组织中的表达开始增加,12~24 h明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)相关性分析显示miRNA-122与乳酸水平呈明显负相关(P<0.0001,r=-0.7167)。pkm2 mRNA与乳酸水平呈明显正相关(P<0.0001,r=0.6817)。miRNA-122与pkm2 mRNA的表达呈明显负相关(P<0.0001,r=-0.8122)。结论:在S-AKI中,miRNA-122的表达失调可能通过调控PKM2水平,促进有氧糖酵解与乳酸水平,加剧急性肾损伤的发生与发展。