果汁中脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp.)的危害及其控制

脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus spp.)对果汁风味影响较大,成为果汁的主要安全性指标备受国际社会关注。本文系统分析了脂环酸芽孢杆菌的代谢产物及其对果汁的危害、污染果汁的途径及安全性问题,提出:①通过原料选择、清洗、膜过滤和高温灭菌能较有效控制果汁中脂环酸芽孢杆菌;②ClO2、乳酸链球菌素、促肠活动素等被研究证实均对脂环酸芽孢杆菌有很好的杀灭作用,但还未应用于工业化生产;③辐照杀菌、脉冲电场、超声波杀菌等非热杀菌技术亟待研究开发,在果汁中脂环酸芽孢杆菌的控制应用方面前景广阔。

浓缩苹果汁生产环境中嗜酸耐热菌的分离与初步鉴定

为了解和控制我国浓缩苹果汁中的嗜酸耐热菌,对浓缩苹果汁生产过程主要工段和生产车间的空气及用水,进行了采样和分离鉴定,并与标准菌株A.acidoterrestris和已知分离菌珠进行了比较分析。结果表明,共分离得到了3株污染浓缩苹果汁的嗜酸耐热菌;在耐热、耐酸性检验中,这3株菌均可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点。与标准菌株和已知分离菌株细胞、菌落形态观察、生长条件和生理生化反应等方面的比较表明,这3株菌与标准菌株有较大的相似性,与标准菌应为同属不同种。

转基因水稻及安全性的研究进展

水稻是世界的一大主粮,转基因水稻的发展及其安全性倍受关注。本文总结了获得转基因水稻的技术方法,概述了转基因水稻的国内外研究进展,分析了转基因水稻存在的安全性问题,并对其发展前景进行了展望。

浓缩苹果汁车间空气中嗜酸耐热菌的分离鉴定研究

对浓缩苹果汁生产车间空气进行采样分析,分离得到了1株污染浓缩苹果汁的嗜酸耐热菌。在耐热、耐酸性检验中,这株菌可以较好地生长,符合脂环酸芽孢杆菌属嗜酸耐热的特点。再通过与标准菌A.acidoterrestris进行细胞、菌落形态观察、生长条件、生理生化特征和糖、醇利用等方面的比较,结果表明这株菌与标准菌各方面都表现出较大的相似性,故与标准菌应为同属不同种。

脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus)分离鉴定研究进展

脂环酸芽孢杆菌(Alicyclobacillus)由于其耐热、嗜酸的独特生存能力而受到全球学术界和食品工业界的极大关注,本文系统介绍与分析了脂环酸芽孢杆菌的特征、结构、分类、分离方法、形态学、生理生化、生长条件、细胞膜脂肪酸组分分析、甲基萘醌分析、DNA组成及杂交试验、16SrRNA/DNA测序及系统发育分析鉴定方法,提出了我国应着力进行的几个研究领域:①脂环酸芽孢杆菌属新菌资源的开发;②脂环酸芽孢杆菌属细胞膜中ω-环状脂肪酸和藿烷类化合物的功能研究;③脂环酸芽孢杆菌属快速检测方法研究;④脂环酸芽孢杆菌属各菌种代谢动力学和基于代谢产物的快速检测技术;⑤脂环酸芽孢杆菌属控制技术方法研究;⑥脂肪酸芽孢杆菌热稳酶研究及工业化应用。

澳大利亚二噁英膳食暴露评估及其对我国的启示

二噁英作为一级致癌物质,曾在部分欧洲国家引起了巨大的食品安全风波,给消费者带来了不可接受的健康风险并导致了严重的政治危机和经济损失,引起了世界各国的普遍关注。澳大利亚从2001年开始先后就二噁英对本国居民的膳食暴露评估进行了3次专项研究,取得了较理想的研究结果。该文综述了澳大利亚二噁英膳食暴露评估的起源、发展及现状,探讨了澳大利亚经验对我国开展相关研究工作的启示,并就我国的二噁英膳食暴露评估研究现状及今后发展方向进行了展望。

转DBN9978基因抗虫抗除草剂玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的:研究喂饲转DBN9978基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法:选用断乳SD大鼠140只,随机分为7组,即3个转基因组(73.3%、36.65%、18.33%)、3个亲本玉米组(72.7%、35.35%、18.18%)、1个常规基础饲料对照组。每组20只,雌雄各半。动物2只/笼喂养,自由进食饮水,连续观察90d。观察大鼠体重、进食量、血液学指标、血生化指标,实验结束后摘取动物脏器进行病理组织学检查。结果:各剂量组动物的体重均呈增长趋势,转基因组、亲本对照组与饲养对照组每周体重及体重总增重、每周进食量、总食物利用率以及中、末期的血液学和血生化指标,各主要脏器系数及病理组织学检查比较,均未发现有生物学意义的改变。结论:现有试验结果不能证实该转DBN9978基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。

转AO基因高植酸酶玉米营养学评价分析

目的:评价转AO基因高植酸酶玉米的主要营养学价值。方法:以国标法测定转基因玉米及其亲本的主要营养成分。选择断乳SD大鼠100只随机分为5组,饲养28d。对5组大鼠饲养前、后主要营养学指标、血液和生化学指标,以及蛋白质功效比值(PER)进行比较。结果:转AO基因高植酸酶玉米与非转基因对照玉米在主要营养成分方面均有相似性。各试验组大鼠的平均增重和平均日增重量均显著高于对照组(P<0.05),且A组的平均增重亦显著高于B组(P<0.05)。雄性试验组和雌性A、B组的WBC计数显著低于对照组(P<0.05),雄性B、D组的AST,以及A组的CRE均显著高于对照组(P<0.05),雄性C组的AST显著低于D组(P<0.05)。所有试验组的PER均显著低于对照组(P<0.05),转基因玉米与对照玉米在PER和校正PER方面均无统计学差异(P>0.05)。结论:转AO基因高植酸酶玉米在蛋白质营养价值方面与非转基因玉米具有实质等同性,从营养学角度分析该类型玉米是安全的。

转C0030.2.5基因玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的:研究喂饲转C0030. 2. 5基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法:选用断乳SD大鼠140只,随机分为7组,即3个转基因组(72. 70%、36. 35%、18. 18%)、3个亲本玉米组(72. 7%、35. 35%、18. 18%)、1个常规基础饲料对照组,每组20只,雌雄各半。动物2只/笼喂养,自由进食饮水,连续观察90d。观察大鼠体重、进食量、血液学指标、血生化指标,实验结束后摘取动物脏器进行病理组织学检查。结果:各剂量组动物的体重均呈增长趋势,体重增长正常,中、末期的血液学和血生化指标中个别指标虽有统计学差异,但并无生物学意义。各主要脏器系数及病理组织学检查比较,均未发现有生物学意义的改变。结论:现有实验结果不能证实该转C0030. 2. 5基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。

超高效液相色谱——串联质谱法同时测定血清中维生素A、维生素E

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定血清中维生素A、E的方法。方法:取标准系列工作溶液、空白替代血清样品(4%BSA牛血清白蛋白溶液)各50μL,经硫酸锌、沉淀剂(甲醇/乙腈=50/50,V/V)沉淀蛋白,振荡,12000 r/min离心5 min,取上清,低压离心挥干,复溶振荡,12000 r/min离心5 min,取上清待测。采用Waters BEH Phenyl色谱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以0.1%甲酸-水溶液和0.1%甲酸-甲醇溶液为流动相等度洗脱,电喷雾(ESI)正离子模式、多反应监测模式(MRM)下检测,内标法定量。结果:UPLC-MS/MS检测血清维生素A、α-维生素E、β-维生素E线性关系良好,相关系数分别为0.9993、0.9993、0.9997;维生素A、α-维生素E、β-维生素E定量限分别为0.213、0.240、0.070 ng/mL,检出限分别为0.064、0.072、0.021 ng/mL;维生素A、E在低、高浓度加标回收率范围分别为89.7~107.4、97.6~118.1,RSD分别为2.45%~3.43%、1.48%~5.40%。结论:本研究建立的人血清维生素A、E超高效液相色谱-串联质谱法灵敏度高、准确稳定、重现性好,对血清中维生素A和维生素E的测定具很好的的应用价值。

转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性研究

目的:研究转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠的亚慢性毒性。方法:初断乳Wistar大鼠140只,随机分为7组:转基因玉米高中低3个剂量组(60%、30%、15%)、亲本玉米高中低3个剂量组(60%、30%、15%)以及1个常规基础饲料对照组,每组20只,雌雄各半。动物2只1笼喂养,自由进食饮水,连续观察90 d。每周称量饲料量及大鼠体重,在试验中、末期采集大鼠尿液和血液进行尿常规、血常规和血生化分析。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。实验末期称重脏器并计算脏器体重比,最后对大鼠脏器进行病理组织学检查。结果:90 d的实验期内,各组大鼠均未发现中毒死亡情况。转基因玉米组个别评价指标虽与亲本玉米对照组或常规基础饲料对照组存在统计学差异,但指标水平在文献报道正常范围和历史对照范围内,且均未发现有生物学意义的改变。各受检脏器未见与受试物相关的病理改变。结论:现有实验结果不能证实转Cry1Ab-ma基因玉米对大鼠有亚慢性毒性作用。

2010-2012年中国城市孕妇贫血及维生素A、维生素D营养状况

目的分析2010-2012年中国城市孕妇血红蛋白，以及血清视黄醇、25羟基维生素D水平，评价其贫血患病率以及维生素A和维生素D的营养状况。方法2010-2012年中国居民营养与健康状况监测采用多阶段分层与人口成比例的整群随机抽样方法抽样，调查对象为中国内地31个省（直辖市、自治区）的34个大城市和41个中小城市的2250名孕妇。采用问卷调查收集调查对象基本情况；氰化高铁法检测血红蛋白含量，按WHO推荐标准结合海拔校正界值进行贫血判定；高效液相色谱法检测血清视黄醇水平，按WHO推荐标准进行维生素A缺乏判定；酶联免疫法测定血清中25羟基维生素D，按照美国国家科学院医学研究所推荐标准进行维生素D缺乏判定。比较不同特征孕妇血红蛋白、血清视黄醇、血清25羟基维生素D差异，以及贫血患病率、维生素A、维生素D缺乏率（包括缺乏和严重缺乏）差异。结果最终检测了1738名孕妇的血红蛋白、594名孕妇的血清视黄醇和1027名孕妇的血清25羟基维生素D水平。孕妇血红蛋白P50（P25～P75）为122．70（114．00～131．10）g／L；大城市高于中小城市，分别为123．70（115．21—132．00）、122．00（113．30—130．40）g/L（P=0．027）。孕妇贫血率为17．0％（295／1738）。孕妇血清视黄醇P50（P25～P75）为1．61（1．20～2．06）μmol／L；大城市低于中小城市，分别为1．50（1．04—2．06）、1．63（1.31—2．05）μmol／L（P=0．033）。孕妇维生素A缺乏率为7．4％（47／639）；大城市高于中小城市，分别为11．5％（33／286）、4．0％（14／353）（P〈0．001）。孕妇血清25羟基维生素DP50（P25P75）为15．41（11．79～20．23）ng／ml；大城市低于中小城市，分别为14．71（11．15—19．07）、16．02（12．65—21．36）ng／ml（P〈0．001）。孕妇维生素D缺乏率（包括缺乏与严重缺乏）高达74．3％（763／1027）；大城市孕妇维生素D严重缺乏率为30．64％（144／470），高于中小城市[26％（267／1027）1（P=0．002）。不同年龄城市孕妇血红蛋白水平、贫血率、维生素A缺乏率、维生素D缺乏率差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论中国城市孕妇贫血状况有所改善，孕妇普遍存在较为严重的维生素D不足，同时存在一定比例的维生素A缺乏，大城市孕妇维生素A缺乏率高于中小城市，大城市孕妇维生素D严重缺乏率高于中小城市。

2010—2012年中国农村孕妇贫血及维生素A、维生素D营养状况

目的分析2010—2012年中国农村孕妇血红蛋白水平、维生素A和维生素D水平,评价该人群贫血患病率的变化,并评估其维生素A和维生素D的营养状况。方法数据来自2010—2012年中国居民营养与健康状况监测。调查对象为我国45个普通农村和30个贫困农村的孕妇。采用氰化高铁法检测1763例孕妇血红蛋白的浓度;采用高效液相色谱法检测601例血清视黄醇的水平;采用酶联免疫法测定979例25-羟基维生素D水平。计算血红蛋白水平及贫血患病率;维生素A水平及缺乏率和边缘缺乏率;维生素D水平及严重缺乏率、缺乏率和不足率。结果2010—2012年中国农村孕妇血红蛋白水平为123.60(113.80~133.50)g/L,普通农村[123.10(114.00~132.20)g/L]显著低于贫困农村[125.40(113.30~136.80)g/L](P=0.020)。中国农村孕妇贫血率为17.58%,贫困农村(20.19%)显著高于普通农村(16.10%)(P=0.029)。农村孕妇维生素A水平为1.53(1.18~1.98)μmol/L,维生素A缺乏率为3.49%,边缘缺乏率为12.81%。农村孕妇维生素D水平为15.55(11.94~19.90)ng/m L,维生素D缺乏严重,维生素D缺乏率(包括缺乏与严重缺乏)高达75.38%,普通农村缺乏率(65.36%)显著低于贫困农村(87.42%)(P<0.001)。结论 2010—2012年中国农村孕妇贫血患病率较10年前有所改善,但仍高于其他人群。孕妇普遍存在较为严重的维生素D缺乏,同时存在一定比例的维生素A边缘缺乏。

2010--2012年中国城市居民贫血状况研究

目的分析2010---2012年中国城市居民的血红蛋白水平和贫血状况。方法数据来自201{）---2012年中国居民营养与健康状况监测。采用多阶段分层与人口成比例的整群随机抽样方法抽样，调查对象为我国34个大城市和41个中小城市6岁以上居民，共74276名。采用氰化高铁法检测血红蛋白的浓度。按WHO推荐的贫血标准结合海拔校正界值进行贫血的判定分析。采用2009年国家统计局公布的人口数据，进行复杂抽样加权处理，计算血红蛋白水平（x±ss）、贫血患病率及95％凹值。结果2010--2012年中国城市居民血红蛋白水平为（144．16±0．78）g/L，男性为（152．88±0．94）g/L，女性为（135．01±0．71）JL；大城市为（145．65±1．22）g/L，中小城市为（143．90±0．89）g/L。中国城市居民（不包括孕妇）贫血患病率为9．7％（95％Ch9．4％-10．1％）；男性患病率为6．8％（95％Ch6．4％。7．3％），女性12．8％（95％CI：12．2％～13．4％），大城市居民患病率为8．5％（95％Ch8．0％～9．0％），中小城市居民患病率为10．0％（95％Ch9．5％～10．4％）。各年龄组中，18-44岁育龄期女性贫血患病率最高，为15．4％（95％CI：14．3％--16．6％）；60岁以上居民贫血患病率高于其他年龄组，为12．5％（95％CI：11．8％～13．2％）。结论2010-2012年中国城市居民贫血患病率较10年前有明显改善，但仍需重点关注育龄期妇女和老年人的贫血状况的改善。

中国城市3~12岁儿童IgE介导的食物过敏研究

目的了解中国城市儿童Ig E介导的食物过敏状况,包括食物过敏发生率和主要过敏原种类的调查。方法从中国居民营养与健康状况调查血清库根据不同年龄段和性别挑选3~12岁儿童血清样本,采用酶联免疫法测定样本的总Ig E,采用免疫印迹法对总Ig E阳性的样本进行特异性Ig E检测。结果共测定5190例血清样本,通过检测特异性Ig E获得Ig E介导的食物过敏率为3.20%,大城市食物过敏率为2.70%,中小城市食物过敏率为3.77%;随着年龄的增长食物过敏率逐渐下降,不同性别之间差异无统计学意义。最主要的食物过敏原为牛奶、鸡蛋白,其次为牛肉、坚果类。结论采用测定血清总Ig E和特异性Ig E,可初步对儿童过敏情况及主要引起过敏的食物种类进行筛查分析。

赖氨酸转基因大米与亲本大米在五指山小型猪回肠中的消化代谢比较

目的对赖氨酸转基因大米与其亲本大米中蛋白质和氨基酸在猪回肠的消化代谢情况进行比较研究。方法选择近交系五指山小型猪为实验动物,通过外科手术将T型瘘管安置于小型猪回肠末端,给其饲喂赖氨酸转基因大米和亲本大米,收集小型猪回肠末端的消化产物进行分析,采用酪蛋白饲料法测定内源性氨基酸的排出量,从而比较两种大米蛋白质和氨基酸的表观消化率和真消化率。结果赖氨酸转基因大米与亲本大米的蛋白质表观消化率和真消化率都没有显著差异;各种氨基酸的消化率结果显示,除半胱氨酸的表观消化率外,其他氨基酸的表观消化率和真消化率都没有显著差异。结论赖氨酸转基因大米与亲本大米在五指山小型猪体内的蛋白质和氨基酸消化代谢基本没有差异,均能很好地被消化吸收。

转人乳铁蛋白基因大米的营养成分及亚慢性毒性研究

目的比较转人乳铁蛋白基因（hLf）大米与其亲本大米在营养成分上的差异,并观察其是否具亚慢性毒性作用。方法对大米中的主要成分及矿物质、维生素进行测定并比较。将初断乳Wistar大鼠按性别、体重随机分为4组饲喂90天,自由进食与饮水。依据大米成分分析结果配制饲料：转hLf大米高剂量饲料（A组,大米添加量为71.45%）、转hLf大米中剂量饲料（B组,大米添加量为35.725%）、亲本大米高剂量饲料（C组,大米添加量为71.01%）和AIN-93G对照饲料（D组）。观察大鼠的体重、进食量、血常规、血生化、脏器系数、骨密度情况,并对大鼠的脏器进行病理学检查。结果转hLf大米与亲本大米在总的主要营养成分、矿物质、维生素上没有显著差异,但在乳铁蛋白及Fe含量上具明显差异。转hLf大米组血常规（WBC、HGB、RBC、MCH）、血生化（AST、Glu）、脏器系数、骨密度的个别指标与亲本对照组或AIN-93对照组存在显著差异（P〈0.05）;其他观察指标与两个对照组均无显著差异。结论部分指标虽然存在组间差异,但仍在正常范围内,未发现转hLf大米对健康具有毒副作用。

转人乳铁蛋白基因大米主要营养素的体内消化率及蛋白质营养价值评价

目的对转人乳铁蛋白基因大米(hLF大米)与亲本大米(PR大米)主要营养素在体内的消化代谢及蛋白质的营养价值进行初步比较评价。方法以6头近交系五指山小型去势公猪为实验动物,进行回肠末端造瘘手术安置T型瘘管,采用交叉法分别饲喂hLF大米、PR大米,收集回肠末端消化产物分析比较两种大米主要营养素的体内消化率,采用经消化率校正的氨基酸评分法(PDCAAS)对两种大米蛋白质的营养价值进行初步评价。结果 hLF大米与PR大米在蛋白质/氨基酸、碳水化合物、脂肪、纤维素的消化率上均无显著差异。人乳铁蛋白基因的插入使hLF大米中各氨基酸的含量配比得到了一定的优化,且其PDCAAS比亲本大米提高了2.66%。结论 hLF大米与PR大米在五指山小型猪体内主要营养素的消化代谢上满足"实质等同性"的要求,PDCAAS的结果显示hLF大米中蛋白质的质量略有提高。

豇豆胰蛋白酶抑制剂的非融合表达纯化

目的探索一种能获得具豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)活性、免疫原性且氨基酸序列与天然蛋白一致的CpTI蛋白表达纯化方法,为评价转CpTI水稻的安全性提供重要材料。方法将CpTI基因克隆到PET41EK表达载体中,构建该基因的非融合表达载体PET41EK-CpTI,将表达载体转入大肠杆菌BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中进行表达,对诱导表达的时间、温度及IPTG浓度进行优化获得表达产物,对表达产物进行超滤和阴离子交换纯化从而获得纯化蛋白,对获得的纯化蛋白进行免疫原性、活性及N端测序鉴定等,并测定其浓度。结果在大肠杆菌Rosetta(DE3)、20～25℃、130r/min、0.5mmol/L IPTG、过夜诱导表达条件下,经过30kDa超滤和DAEE FF阴离子交换纯化,可以获得可溶表达量高、具有CpTI免疫原性和活性的纯化蛋白,其纯度达到95%。结论利用本研究建立的非融合表达方法可以得到在活性、免疫原性、分子量及氨基酸序列等方面与天然CpTI蛋白基本一致的CpTI蛋白,该法简单易行,能够满足大量生产表达的要求。

植物源高营养型转基因食品的研究进展

近年来植物源的高营养型转基因食品成为转基因技术研究的热点,旨在为消费者提供更富营养、高生物利用率及低致敏性的营养食品,为人类健康造福。本文对植物源高营养型转基因食品的发展现状、安全性问题进行了综述,并就我国转基因食品的发展进行了展望。