长链非编码RNA-8439促进肝癌细胞多能因子nanog的表达

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)-8439与多能因子nanog的关系,及lncRNA对肝癌细胞生长的影响。方法在肝癌原发灶与转移灶组织中,通过lncRNA测序与生物信息学分析方法筛选与多能因子nanog、oct4、sox2相关的差异表达lncRNA。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测差异表达的lncRNA在人肝癌细胞系Hep3B、Huh7细胞及对应的肿瘤悬浮球中的表达量。通过生物信息学分析明确lncRNA-8439与nanog结合的可能性,采用荧光原位杂交方法观察lncRNA-8439在Hep3B和Huh7细胞中的定位。敲低lncRNA-8439后,采用qPCR和蛋白质印迹法检测2种肝癌细胞中nanog的表达,观察悬浮球生长情况。过表达lncRNA-8439后,采用qPCR和蛋白质印迹法检测2种肝癌细胞中nanog的表达。结果筛选到9种与多能因子相关的差异表达lnc RNA,但仅lnc RNA-8439在2种肝癌细胞悬浮球中呈一致的上调表达,与对应的贴壁细胞相比差异均有统计学意义(P均<0.01)。LncRNA-8439的3′端有nanog结合位点。LncRNA-8439在细胞核中表达,细胞质中并无分布。敲低lncRNA-8439后,2种肝癌细胞中nanog表达量在RNA与蛋白水平均降低(P均<0.01),肝癌肿瘤悬浮球数量减少。过表达lnc RNA-8439后,2种肝癌细胞中nanog表达量在RNA与蛋白水平均增加(P均<0.01)。结论 LncRNA-8439通过促进多能因子nanog的表达影响肿瘤细胞的自我更新能力,可能是导致肝癌侵袭和转移的原因。