壳聚糖、月见草、舒降之降血脂作用及机制研究

目的研究壳聚糖、月见草、舒降之的降血脂作用及机制。方法运用新西兰家兔制备高脂血症模型,各实验组分别同时饲喂壳聚糖、月见草、舒降之10周,然后分别测定给药前、后血脂水平的变化,并提取肝组织和肾皮质组织蛋白,用免疫印迹法观察受体相关蛋白的表达水平变化。结果壳聚糖、月见草与舒降之都可使血脂不同程度下降,高脂饮食加壳聚糖组实验动物肾、肝脏组织中受体相关蛋白表达水平较其他各组明显增高。结论壳聚糖、月见草、舒降之均具有一定的降血脂作用,调节受体相关蛋白RAP的表达可能是机制之一。

壳寡糖降血脂作用及与RAP的表达相关性研究

目的:研究壳寡糖降脂作用和受体相关蛋白RAP表达与壳寡糖在降血脂作用中的关系。方法:采用RT-PCR方法克隆RAP基因片段,插入表达载体PGEX获得了重组基因PGEX-RAP,转化入大肠杆菌DH5a,通过IPTG诱导表达了GST- RAP重组融合蛋白。运用单抗制备技术制备抗RAP单克隆抗体McAb-rap。用新西兰家兔制备高脂血症动物模型。分组分别观察和比较服用壳寡糖和辛伐他汀的降脂作用,TC、LDL-C含量的动态变化;观察实验各组RAP的表达量变化并进行分析。结果:体外成功诱导表达并纯化了GST-RAP融合蛋白,获得了单克隆抗体McAb-rap.其能识别天然膜抗原RAP。壳寡糖、辛伐他汀均能降低血清中TC、LDL-C浓度;壳寡糖降脂效果不如辛伐他汀显著(P<0.01);实验各组均表达RAP,但表达量各有差异。在高脂血症动物模型血管壁、心肌中RAP的表达量明显高于正常对照组。口服壳寡糖后高脂模型家兔血管壁、心肌中RAP表达量高于口服辛伐他汀组。在实验模型各组血管壁出现一条分子量约80 kD左右蛋白特异带,在正常家兔血管壁中未见。结论:壳寡糖具有一定的降血脂作用;血脂紊乱可引起血管壁、心肌RAP的表达增加;RAP的表达量与血脂水平的调控、壳寡糖在高脂血症中的降脂作用机制密切相关。80 kD左右特异表达带的蛋白性质及在血脂调节中的作用有待进一步研究。

医学院校实验师资队伍建设存在的问题与对策

针对医学院校实验室实验师资队伍建设情况进行了大量调研和了解的基础上对实验师资队伍建设中存在问题进行了分析和讨论。分别从思想意识、政策导向、师资培训和维修人才队伍建设等方面进行了分析探讨。同时对如何加强医学院校实验师资队伍建设提出了相应的对策建议,强调要重视实验室队伍建设首先要改变传统观念、建立激励机制稳定队伍建设、建立短期培训制度优化实验队伍结构和加强仪器设备的维护维修人才队伍建设等措施以适应实验室快速发展的需要。

高胆固醇血症肾皮质中RAP的表达

目的 :探讨受体相关蛋白的 (RAP)在肾皮质的表达与脂代谢的关系。方法 :应用编码 319氨基酸的RAP基因片段克隆表达的融合蛋白 ,制备针对该受体相关蛋白的抗RAP抗体 ,用免疫印迹杂交方法及免疫组化法分析家兔高胆固醇血症模型的肾皮质中RAP的表达情况。结果 :模型组与对照组在 4 4KDa处均有RAP杂交带 ,RAP在高胆固醇血症模型肾皮质中的表达量明显高于对照组。免疫组化显示RAP主要分布于肾小球毛细血管基底膜、肾小管周围间质内。结论

肾炎致病原重组受体相关蛋白的表达及纯化

用ｐＧＥＸ载体系统体外构建了Ｈｅｙｍａｎｎ肾炎致病原受体相关蛋白（ＲＡＰ）重组表达质粒，经ＩＰＴＧ诱导，该质粒表达的融合蛋白在大肠杆菌中得到了高效表达，其表达量达３９．４％，经ＧＳＴＳｅｐｈｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，得到了高度纯化，其诱导产生的抗体经蛋白质印迹法分析证明能识别肾皮质天然抗原４４ｋｕ受体相关蛋白、ＲＡＰ表达及纯化的成功为研究致病原病理性表型提供了有利条件．

44KD受体相关蛋白在实验性高脂血症家兔心肌、血管壁中的表达分析

目的 探讨 4 4KD受体相关蛋白 (RAP)与脂代谢的关系。方法 制备实验性家兔高脂血症动物模型 ,运用分子生物学技术克隆RAP基因片段 ,制备GST -RAP融合蛋白 ,用单克隆技术制备抗RAP单克隆抗体rapF2 ,用Western -Blot方法及免疫组化法观察高脂血症家兔心肌、血管壁中RAP的表达及分布。结果 与对照组相比 ,高脂血症组心肌、血管壁中RAP表达增加 ,且主要分布于心脏的外膜、冠状动脉内壁与外周血管壁的内、外膜 ,并在6 7～ 94KD间出现特异表达带。结论 血液中过量的脂质及脂质代谢的紊乱可引起血管壁的病理改变并伴随RAP表达增加 。

我国医学研究生教学模式现状及选择分析

为提高医学研究生的教学质量,培养更多的医学研究领域的高素质创新人才,调查分析了医学研究生教育采用的多种教学模式的发展现状,分析显示:灌输式、传教式的"传统教学"模式已逐渐被各具特色的新型的教学模式取代。各研究生教育机构推出了各具特色的教学模式来培养医学人才。汇总并分析了讨论会型、PBL型、网络互动型、带课题型等多种新型教学模式,各具特色。研究生教学模式的选择应"以人为本、以激发创新思维能力为主、学习知识技术方法为辅"的培养导向,培养机构应根据学生不同的学习阶段、不同生源结构选择合适的教学模式进行教学。研究生教育可以多层次化,教学模式可以多样化和综合化,选择研究生教学模式的标准,并不在于该模式能够给学习者多少已有知识,而在于它是否具备培养学习者创造性思维的特征,只有具备创造性思维的人才才能适应高科技时代的发展需要。

免疫学实验课教学改革探讨

加强实验课与理论课的联系，充分体现实验课的重要地位；加强学生实验课的考核，并极力改善实验条件，增加实验资本投入，加强学生技能训练与培养的全面性。实验课的内容整体性安排要更合理，以克服所存在的难点和缺陷，同时必须加强青年教师实验岗位培训，提高自身实验技能。

受体相关蛋白在大鼠各组织中的分布

用ＳＤ大鼠肾皮质总ＲＮＡ克隆的ＲＡＰ－ｃＤＮＡ，经原核融合蛋白表达系统获得纯化的受体相关蛋白（ＲＡＰ），由此制备特异的兔抗血清。分别提取大鼠各组织蛋白，经蛋白质聚丙酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）分离后，转移至硝酸纤维素膜，用抗ＲＡＰ抗血清进行蛋白质印迹分析（ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔＡｎａｌｙｓｉｓ）。结果显示，ＲＡＰ在大鼠肝、胰、肾皮质、肾上腺、大网膜、大脑、小脑、骨胳肌等组织内均有不同程度的表达，肺和脾脏内未见。推测ＲＡＰ参与许多组织器官的代谢过程，尤其可能是与脂蛋白代谢有关的重要物质。

大鼠肾皮质受体相关蛋白克隆基因重组表达质粒的构建及分子生物学鉴定

运用ＤＮＡ重组技术，将用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆的大鼠肾皮质受体相关蛋白３１９个氨基酸的核苷酸序列导入载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ和表达载体ｐＧＥＸ中，分别构建了重组质粒ｐＢＳＫ９ＲＡＰ和ｐＧＥＸ－９ＲＨ７，转化入大肠杆菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅ和ＤＨ５α中，经ＩＰＴＧ、ｘ－ｇａｌ和抗生素筛选阳性克隆，扩增后，重组质粒用限制性内切酶图谱分析及ＤＮＡ测序分析，证明插入子插入方向正确，表达阅读框架正确。

RAP单克隆抗体的制备及其在胰腺癌中的表达

目的:制备受体相关蛋白(receptor-associated protein,RAP)单克隆抗体,研究人胰腺癌组织中RAP的表达与定位,探讨胰腺癌发生发展的病理机制。方法:运用基因重组技术及单克隆抗体技术制备抗RAP抗体。利用制备的抗RAP抗体,分别采用Western Blot和免疫组织化学检测并比较4例胰腺癌患者癌及癌旁组织中RAP的表达及分布。结果:抗RAP单克隆抗体能特异识别分子质量为44 ku的RAP蛋白。Western Blot与免疫组织化学检测结果均显示RAP在胰腺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。免疫组织化学分析还显示RAP表达主要分布在细胞的胞质,呈强阳性;RAP在组织间质中也有少量分布,呈弱阳性。RAP在胰腺癌组织中的高表达主要分布在癌巢。结论:RAP表达与胰腺癌的发生发展密切相关。

研究生免疫学实验技术教学方法及教学内容的选择

免疫实验技术课程作为一门研究生选修课,在教学过程中应对教学形式、教学方法和教学内容进行合理的选择,才能在有限的教时内达到好的效果。教学内容的选择应考虑技术性、连贯性、可操作性、实用性等因素。教学可以选择理论和实践相结合的方法。学习技术不但要学会操作,还要掌握原理、特点、应用;更重要的是培训学生思考问题、分析问题、解决问题的能力;注重培养学生严谨的科研工作作风、实事求是的科学态度及勇于开拓、勇于创新的思维能力。

榄香烯乳对人胰腺癌移植瘤组织中凋亡相关蛋白表达的影响

目的:了解榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌裸鼠移植瘤组织中PTEN、P53、Bcl-2蛋白的表达情况,初步探讨榄香烯乳对胰腺癌凋亡的影响.方法:构建人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,随机分为阴性对照组、榄香烯乳小剂量组、榄香烯乳大剂量组、吉西他滨阳性对照组和联合用药组五组,分别干预处理;采用Western blot和免疫组织化学的方法检测榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌移植瘤组织细胞中PTEN、P53、Bcl-2蛋白表达情况.结果:Western blot结果显示榄香烯乳干预治疗后人胰腺癌移植瘤细胞中PTEN和P53蛋白表达均有升高趋势,而Bcl-2蛋白表达有下降的趋势.榄香烯乳大剂量组与阴性对照组相比,P53蛋白表达显著升高(P<0.01)而Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01).联合用药组与吉西他滨阳性对照组相比,P53蛋白表达显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白表达降低不明显(P=0.985).免疫组织化学结果显示与Western blot结果大致相同的变化趋势.结论:一定剂量的榄香烯乳可以增强胰腺癌裸鼠移植瘤组织中P53蛋白的表达而降低Bcl-2蛋白的表达,从而起到促进胰腺癌细胞凋亡的作用.

缺血-再灌注对大鼠心肌氨基酸的影响及牛磺酸的作用

心肌缺血—再灌注后可出现一系列损伤性变化,其中形态结构变化,各种酶与离子的改变都有深入的研究。本文利用大鼠离体心脏缺血—再灌注损伤模型。

缺血—再灌注损伤对大鼠心肌中氨基酸的影响及牛磺酸的保护作用

使用大鼠离体作功心脏缺血一再灌注损伤模型,观察心肌内游离氨基酸含量的变化以及牛磺酸(Taurine,Tau)对心脏的影响.发现再灌注损伤使心肌内所测17种游离氨基酸含量除Cys外部减少,其中Tau降低最显著.20 mmol·L^(-1)Tau能改善心脏的再灌注损伤,表现为:在再灌注期间促进心脏机械功能的恢复,减少室性心律失常的发生率,减少LDH与CK从心肌中漏出,减少脂质过氧化作用与钙的积聚以及减少心肌内游离氨基酸的丢失.提示:外源性Tau能够改善心脏的缺血一再灌注损伤.

镉中毒对大鼠血、尿氨基酸及酶水平的影响

１．５ｍｇ／ｋｇ氯化镉单次染毒后２４小时，测定大鼠尿及血液中β－半乳糖苷酶（β－Ｇａｌ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ），谷草转氨酶（ＧＯＴ）及各种游离氨基酸。结果发现染毒鼠尿中ＬＤＨ增高达７倍，ＧＯＴ增高６１％，但β－Ｇａｌ没有的显著增加，尿中各游离氨基酸无显著变化；血浆中丝氨酸和异亮氨酸含量明显下降（分别为Ｐ＜０．０５，＜００１）。肾超微结构见近曲小管胞浆空泡数目增加。

原油蒸气对机体影响的实验研究1．对学习记忆、心和肾的影响

本研究观察大鼠、小鼠经原油蒸气（３０ｇ／ｍ３，１５ｇ／ｍ３，３ｇ／ｍ３）吸入染毒，对学习记忆、心电图和肾的影响。结果表明；（１）原油蒸气可影响动物的学习记忆能力，其机制与脑内单胺类和氨基酸类神经递质变化有关．“神乐康”可改善原油蒸气降低的学习记忆能力。（２）其心电图和肾脏末发现有病理意义的改变。

原油蒸气吸入对大鼠肾脏的影响

使大鼠吸入原油蒸气３ｇ／ｍ３８ｈ×３０天（亚急性染毒），１５ｇ／ｍ３、１２ｈ（急生染毒Ｉ组）３０ｇ／ｍ３、１２ｈ（急性染毒Ⅱ组）后测尿量、尿中蛋白质、氨基酸、肌酐含量及尿β－Ｄ－半乳糖苷酶（βＧａｌ），乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和谷草转氨酶（ＧＯＴ）的含量，同时测定了血液中这３种酶和肌酐的含量。各染毒组与对照组相比所测全部指标均未见显著差异，提示肾脏未受损害。

RT-PCR法检测肝炎患者血清中庚型肝炎病毒核酸

为了对庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的进一步研究提供基础，设计了针对ＨＧＶ基因组５’－ＮＣＲ区的引物，建立了ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＧＶ核酸的方法。通过对１１６例肝炎患者血清中ＨＧＶ－ＲＮＡ检测，分别在乙肝、丙肝患者血清中各检出２例ＨＧＶ－ＲＮＡ阳性，阳性率分别为４．７％和８．７％。甲肝患者血清中未检出ＨＧＶ－ＲＮＡ。

小鼠CCl_4急性肝损伤体内氨基酸水平的改变

本实验用０．１６ｍｌ／２０ｇＣＣｌ４注射小鼠腹腔导致急性肝损伤，观察４８ｈ时血浆及肝组织内的氨基酸水平，发现血浆中所测１７种氨基酸除ＢＣＡＡ不变，Ａｒｇ明显下降，其余氨基酸均有明显的升高，ＢＣＡＡ／ＡＡＡ比值明显降低，而肝组织内ＢＣＡＡ明显升高，ＡＡＡ只轻度升高，ＢＣＡＡ／ＡＡＡ比值只轻度降低。揭示了ＣＣｌ４急性肝损伤的血浆氨基酸及肝组织的氨基酸的变化模式。