亲子鉴定中Amelogenin基因荧光定量分析检出克氏综合征1例

我鉴定中心在对一亲子鉴定案例进行鉴定分析时发现,其中一份检材的短串连重复序列（short tandem repeat,STR）分型图上性别基因座分型异常,经Amelogenin等位基因XY荧光定量分析,疑为克氏综合征（Klinefelter syndrome）,后经染色体核型分析证实为克氏综合征,现报告如下。

Identifiler体系在276例单亲亲权鉴定中的应用分析

目的探讨Identifiler体系在单亲亲权鉴定案例中的应用价值。方法采用荧光标记STR-PCR复合扩增、毛细管电泳基因分型技术,应用3100 Avant遗传分析仪对276例单亲亲权鉴定的个体进行15个短串联重复串联序列(STR)基因座的基因分型。结果在276例的单亲亲权鉴定中,认定亲权关系199例,占72.10%,其中亲权指数(CPI)≥2 000,父权相对机会(RCP)≥99.95%有183例,13例CPI<2 000,3例出现一个基因座单步突变;排除亲权关系77例,占27.90%,其中2例只出现1～2个不符合遗传规律基因座,通过加测母亲样本,排除指标均大于3个。结论应用Identifiler体系的15个STR基因座对常规单亲亲权案例能成功地开展鉴定分析工作,但当CPI<2 000或有1～2不符合遗传规律基因座时,须增加检测基因座和加测母亲样本,以提高亲权指数或增加排除指标,规避可能的错误鉴定结论。

3,5-二硝基水杨酸比色法定糖的条件优化

目的优化3,5-二硝基水杨酸比色法定糖条件。方法单因素试验法。结果优化后的参数条件为波长495nm,VDA/V总为1.5/3.5,反应温度90℃,反应时间5-7min。结论改良后的3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖的结果更高效、准确和稳定。

孕中期血清标志物AFP、F-βhCG在唐氏综合征和神经管缺陷筛查中的意义

目的探讨孕中期唐氏综合征和神经管缺陷筛查方法在本地区运用的有效性,建立本实验室中位数的参考值,提高筛查效率。方法用ELISA法检测孕中期孕妇血清中的AFP和F-βhCG值,通过筛查软件计算胎儿唐氏综合征的风险值,风险值大于或等于1/275判为高危妊娠。结果358例孕妇中唐氏综合征高危15例,神经管缺陷高危20例,其阳性率分别为4.19%和5.59%,经羊水穿刺染色体分析,诊断21三体分离型1例,易位型1例。结论用孕娠中期孕母血清中的AFP和F-βhCG值可有效地筛查出唐氏综合征高危产妇,预防病残儿的出生。正常孕中期孕母血中的AFP、F-βhCG的中位数值与孕周分别呈正相关和负相关关系。

贵州汉族人群15个STR基因座遗传多态性研究

目的对贵州汉族人群在Identifiler体系中的15个短串连重复序列(STR)基因座进行遗传多态性调查。方法采用荧光标记STR-PCR复合扩增、毛细管电泳基因分型技术,对1 000名贵州汉族人群无关个体进行15个STR基因座的基因分型,计算其等位基因频率、杂合度(H)、匹配概率(PM)、个人识别力(DP)、非父排除率(PE)、多态信息总量(PIC)、父权指数(PI)等多态性参数,并进行统计学分析。结果在贵州汉族人群1 000名无关个体中共检出178个等位基因,其频率分布为0.000 5~0.531 5。15个STR基因座的基因型分布进行χ~2检验符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05)。杂合度为0.603 0~0.880 0;个人识别力为0.786 1~0.966 6,累积DP>0.999 999 999;匹配概率为0.033 4~0.213 9,累积PM=1.198×10^(-17);三联体非父排除率为0.294 5~0.754 8,累积CPE=0.999 998 925;二联体非父排除率为0.195 9~0.571 6,累积CPE=0.999 760 600;多态信息含量为0.545 1~0.849 2,累积PIC=0.999 999 999;亲权指数为1.2 594~4.1 667。结论贵州汉族人群检测的15个STR基因座具有高度多态性,是较理想的遗传标记,统计的等位基因频率等基础数据可为本地区的个人识别、三联体亲子鉴定及群体遗传学研究提供依据,但在二联体亲子鉴定中运用存在一定风险。

亲子鉴定中男性个体Amelogenin基因座X片断缺失一例报道

我鉴定中心对亲子鉴定案例进行鉴定分析时,检出1例男性个体Amelogenin基因座X片断缺失,其STR分型图上只存在Y染色体Amelogenin扩增产物,而无X染色体Amelogenin特异性扩增产物,出现AMELX等位基因缺失,现报道如下。

185例不孕不育妇女辅助生殖前TORCH抗体的检测

目的在准备作辅助生殖的不孕不育妇女中进行TORCH抗体的检测。方法运用ELISA方法进行弓形体(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)、单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)、单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ)五种病原体IgM、IgG抗体的检测。结果185名患者中这五种病原体IgM、IgG抗体的阳性率分别为1.62%、1.08%、4.32%、2.70%、2.16%和3.24%、89.73%、91.35%、90.27%、74.59%。结论CMV、HSVⅠ两种病原体有较高的感染性,HSVⅡ在不孕不育妇女中有较高的感染史。

刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34^+造血干/祖细胞增殖分化能力的影响

目的:观察刺梨提取物CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖和人脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖分化能力的影响。方法:采用MTT法测定活细胞OD值,计算CL1对胃癌SGC-7901细胞增殖抑制率。免疫磁珠分选人脐血CD34+造血干/祖细胞,细胞记数、双色直接免疫荧光标记法和流式细胞仪分析细胞增殖分化能力变化。结果:MTT检测法显示,0.01~10μmol.L-1的CL1处理,剂量依赖性和时间依赖性地抑制胃癌SGC-7901细胞生长。经14 d的培养,与细胞对照组相比,10、1μmol.L-1的CL1细胞数有下降趋势,但差异无显著性;表达粒系/单核巨噬系细胞表型CD15和CD11b的细胞百分数无显著差异。经14 d的培养,与培养0 d比较,CD15显著增高(P<0.05),CD11b有增高趋势,但无显著性差异。结论:CL1对胃癌SGC-7901细胞的体外生长具有抑制作用,但对人脐带血CD34+HSPC的增殖、和向粒细胞、单核巨噬细胞分化无明显影响,表明CL1在抗肿瘤作用剂量下,不会明显抑制造血干/祖细胞向粒-单细胞的增殖分化,提示CL1可能不会引起明显的造血抑制。

古尼虫草多糖及其解聚物的免疫活性

目的 比较研究古尼虫草纯多糖组分FP及其解聚物的免疫活性。方法 采用超声波解聚多糖 ,并用葡聚糖凝胶分离获得解聚级分 ,通过MTT法和中性红比色法测定其对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞毒T淋巴细胞杀伤功能的影响。结果 FP的解聚级分FP 1、FP 2和FP 3有更强的免疫活性 ,在中、低剂量 (1和 10 μg mL)与对照相比有显著差异 ,而其中以FP 2的活性最明显。结论 古尼虫草多糖解聚后能明显提高免疫活性 。

改良骨骼肌肌纤维分型ATP酶染色方法

目的采用经作者改良的Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法,观察其对大鼠骨骼肌肌纤维分型染色效果。方法取8μm厚度SD大鼠胸肌及肱二头肌冰冻切片,用含40 g/L多聚甲醛固定液固定5 min;Tris洗液漂洗后置预孵育液中室温下孵育15 min;Tris洗液中漂洗2次,置孵育液中于37℃恒温水浴摇床中振摇孵育60 min;10 g/L氯化钙洗3次后置20 g/L氯化钴液中3 min;蒸馏水冲洗,于10 g/L硫化铵液中孵育3 min;自来水冲洗3 min,常规梯度乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片,置显微镜下观察。结果SD大鼠胸肌和肱二头肌经改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色后均可清晰地显示出明亮色白的Ⅰ型纤维和幽暗深褐的Ⅱ型纤维。结论改良Guth-Samaha肌球蛋白ATP酶染色方法具有试剂配制简单、操作简化和肌纤维分型效果满意等优点,值得在骨骼肌相关研究中借鉴应用。

外周血T淋巴细胞HLA-B27检测辅助诊断强直性脊柱炎

目的探讨外周血T淋巴细胞HLA-B27和血清多项免疫指标检测对强直性脊柱炎(AS)的辅助诊断价值。方法采用流式细胞仪对52例疑似AS患者外周血T淋巴细胞HLA-B27表达进行检测,结合临床资料对AS作出诊断;对其中37例男性病例血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM,补体C3、C4及C反应蛋白(CRP)含量进行免疫比浊法测定。结果52例疑似AS患者共检测出HLA-B27+13例(男性12例,女性1例),确诊AS患者12人(男性患者11人,女性1人),包括男性HLA-B27+AS患者9例(最小年龄12岁,最大58岁),男性HLA-B27-AS2例(分别为20岁和78岁),女性HLA-B27-AS1例为(9岁),男性AS确诊患者的HLA-B27阳性率为82%。除补体C3外,男性AS组IgG、IgA、IgM、C4及CRP均较男性非AS组高(P<0.05)。结论AS患者体液免疫功能明显活跃,HLA-B27检测有助于临床资料疑似病例的AS诊断。

临床基因扩增检验实验室风险评估与防范措施的分析

目的按照国家有关规定对我院临床基因扩增检验实验室进行风险评估,以加强实验室的生物安全,确保规范开展临床基因扩增检验工作。方法风险评估方法采用现场评估,并综合分析所采取措施的防范效果。结果回顾分析显示贵州省细胞工程重点实验室临床基因扩增检验实验室主要存在着危害度等级2级和3级的感染性微生物危害,主要可能存在乙型肝炎病毒、人乳头瘤病毒和结核杆菌等12种常见微生物危害风险,实验室建立的4个工作区布局合理,并采取了有效的控制风险措施,质量、技术管理体系完善,并能严格贯彻执行,有效防范了生物风险。结论健全风险评估机制和建立防范措施是保证基因扩增检验实验室生物安全的关键措施,也是使实验室良好运行的重要举措。

燃煤砷中毒患者外周血淋巴细胞CD44黏附分子的变化及临床意义

目的探讨燃煤砷中毒(CAP)患者外周血CD44黏附分子水平及其临床意义。方法70例CAP患者按病程及是否癌变分为4组(CAP1<10年23例,未癌变;CAP210～19年21例,未癌变;CAP3≥20年20例,未癌变;CAP4≥20年6例,癌变),采用流式细胞仪对不同患病时间组的CAP患者外周血淋巴细胞CD44黏附分子表达水平进行检测。结果正常人对照组外周血淋巴细胞CD44水平为(36.81±10.71)%,而CAP1、CAP2、CAP3和CAP4组则分别为(36.53±9.08)%、(40.31±8.21)%、(45.18±10.48)%和(49.61±12.15)%;随着病程时间延长,CD44黏附分子表达百分率逐步增高,患病时间20年以上组增幅明显(P<0.05),但CAP4肿瘤组和同一患病年限的CAP3非肿瘤组之间的CD44表达无统计学差异(P>0.05)。结论患病20年以上的CAP患者外周血淋巴细胞CD44黏附分子明显增加,外周血CD44表达水平可作为CAP患者肿瘤风险评估、监测的重要生物学指标。

27例慢性粒细胞性白血病染色体畸变分析

目的通过染色体核型分析,了解本地区慢性粒细胞性白血病细胞遗传学特点。方法采用培养的骨髓细胞,G显带技术进行染色体核型制备、分析。结果在全部29例慢粒患者中共检出27例Ph染色体阳性患者,检出率为93.1%,其中具有典型t(9;22)(q34;q11)易位即简单型25例,2例涉及其他染色体异常的复杂型分别为伴6号染色体臂间倒位和6号染色体短臂部分缺失各1例,简单型和复杂型所占比例分别为92.6%(25/27)和7.4%(2/27)。结论本地区Ph染色体阳性慢粒患者染色体核型仍以简单型为主,但复杂型与以往其他地区报道的核型不同。

习惯性流产伴染色体核型异常21例分析

采用培养的外周血淋巴细胞,对76对习惯性流产夫妇152例样品进行染色体核型遗传学分析。发现异常染色体核型21例,其中女18例、男3例,总检出率为13.8%。在检出的21染色体异常核型中含片段易位17例(包括平衡易位11例,罗氏易位6例)、插入2例、缺失和臂间倒位各1例,平衡易位和罗氏易位分别占全部异常核型的52.4%和28.6%,提示习惯性流产夫妇染色体畸变发生率高。认为降低习惯性流产的发生率和提高其病因诊断率,应重视婚前遗传学筛查并对流产夫妇进行遗传学检测。

238例染色体异常报告

目的了解本地区染色体异常疾病的分布,并对相关疾病进行遗传学分析。方法采用培养的外周血淋巴细胞,常规方法制备染色体并对其进行核型分析。结果从1405例遗传咨询患者中,共检出异常染色体核型238例,检出率为16.94%;其中,常染色体异常152例,性染色体异常85例,两者分别占异常核型的63.87%和35.71%;21-三体综合征最为多见,占常染色体异常核型的85.53%,其次为Klinefelter综合征,占性染色体异常核型的75.29%。结论本地区染色体异常检出率高于国内部分地区。为降低出生缺陷率,应重视产前筛查及产前诊断。

Goldeneye 20A试剂盒检测发现TPOX基因座三等位基因一例

本文报道了二联体检案中孩子的TPOX基因座上检测到三等位基因1例。采用Goldeneye 20A试剂盒检测,3500DX遗传分析仪电泳,Genemapper基因分型软件基因分型,确认其基因分型为(8,9,11)。亲子鉴定中检测到三等位基因时,在排除污染前提下,至少需两种试剂盒检测确认,以保证鉴定结果及PI计算的可靠性。为提高检案的准确性,需谨慎对待三等位基因的检测、峰型判断、分析和确认,进而也可为产生三等位基因的可能机制提供基础信息。

X染色体Amelogenin基因座片段扩增峰图异常1例及荧光定量分析

AMEL基因座（amelogeni,AMEL牙釉基因座）是法医学在进行亲子鉴定和个体识别中性别确认时常用的基因座,是X、Y染色体上的同源染色体基因,位于X染色体的Xp22.1-Xp22.3和Y染色体的Yp11.2,编码牙釉质蛋白[1]。不同试剂盒扩增,这一基因的产物长度有所不同[2]。

遵义市1366例儿童发锌含量分析

锌是人体必需的微量元素之一。对于维持机体正常机能,生长发育以及治疗某些疾病等方面的作用日益受到医学界的广泛关注。我站自一九八八年十月开设微量元素门诊以来共接诊1366例儿童,现就所测定的儿童发锌含量作以下分析报道.