男性脆性X综合征快速筛查

脆性X综合症(FraX)是较为常见的遗传性智力低下疾病,发病率仅次于唐氏综合征的遗传性智力低下综合征,在xq28存在两个脆性位点FRAXA,FRAXE,以FRAXA为最常见,该病是由于脆性X智力低下基因FMR1功能丧失所致,约占全部儿童的0.05%,呈X隐性遗传,占X连锁智能低下的40%,分子遗传学研究表明,脆性X综合征最主要的致病突变FMR1基因5′-非翻译区中不稳定的三核苷酸重复序列(CGG)n扩增.

还少丹的脑保护机制研究

目的：为探讨中药古成方“还少丹”的脑保护机制，观察了该药对脑兴奋性损伤模型的预防及治疗作用。方法：利用小鼠双侧颈总动脉结扎及反复再灌的手术造成小鼠智力下降（避暗实验次数增多）的脑损伤模型，从行为学方面观察了还少丹对脑损伤小鼠学习记忆能力的改善作用，并进一步利用受体研究方法考察了该药的脑保护机制。结果：还少丹可明显减少术后小鼠避暗实验的错误次数（模型组为２．００±０．３４次／５ｍｉｎ，单纯治疗组为０．７５±０．２５次／５ｍｉｎ，Ｐ＜０．０１；预防加治疗组为０．３８±０．１８次／５ｍｉｎ，Ｐ＜０．０１）。受体结合实验表明，还少丹明显抑制小鼠脑损伤后引起的大脑皮层、海马两部位Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（即ＮＭＤＡ）受体的激活，与模型组比较，有明显差异（Ｐ均＜０．０１）；同时发现用药后胆碱乙酸化转移酶（ＣＡＴ）的活性明显提高（Ｐ＜０．０１）。结论：揭示该药具有对抗兴奋性氨基酸毒性的作用。还少丹还可明显增强脑损伤模型的皮层、海马部位的ＣＡＴ活性。

肝细胞生长因子抑制MRC-5成纤维细胞所致的纤维化作用

本研究采用人胎儿肺来源的成纤维细胞株MRC 5 ,作为体外研究肝细胞生长因子 (HGF)抗组织纤维化的模型。成纤维细胞MRC 5被转化生长因子 β1(TGF β1)转化为肌成纤维细胞后 ,应用外源人重组HGF修饰细胞 ,检测细胞中分子表达水平的变化。研究发现 ,TGF β1在诱导成纤维细胞株MRC 5转化为肌成纤维细胞的同时 ,上调HGF受体 c Met在肌成纤维细胞中的表达。而且 ,应用外源人重组HGF修饰细胞后 ,内源性TGF β1的表达水平被降低 ,内源性HGF的表达水平上调 ,基质金属蛋白酶I (MMP I)mRNA表达增加 ,从而加速了细胞外基质主要成分—胶原蛋白I [Col (I) ]的水解。结果显示在组织纤维化过程中 ,HGF通过其受体c Met直接作用于肌成纤维细胞 ,抑制细胞内TGF β1的表达 ,在一定程度上抑制组织纤维化的发生和发展。研究中我们还发现 ,肝素结合表皮生长因子样生长因子 (HB EGF)上调肌成纤维细胞中HGF的表达 ,是其抑制肌成纤维细胞形成。

山莨菪碱，川芎嗪预防肺水肿时大鼠动脉血浆及支气管肺泡灌洗液中6－Keto－PGF1α和TXB2含量的变化

用肾上腺素所致肺水肿模拟临床上常见的神经源性肺水肿，如颅脑创伤，高原缺氧，脑血管病等所致肺水肿就属此类，具有动力性和非动力性双重机制，既有肺毛细血管压力升高，又有肺毛细血管通透性增高，大鼠在数分钟内迅速死亡．而从股静脉注射山莨菪成（３０ｍｇ·ｋｇ－１）和川芎嗪（１２０ｍｇ·Ｋｇ－１）进行预防，绝大部分动物均不形成肺水肿。为了探讨ＰＧＩ２与ＴＸＡ２在此模型中的作用，我们先后测定了用山莨菪碱和川芎嗪预防后大鼠颈动脉血和支气管肺泡灌洗液６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１α和ＴＸＢ２的含量变化，结果表明，山莨菪碱和川芎嗪能有效地降低血浆和支气管肺泡灌洗液的ＴＸＢ２含量（Ｐ＜０．０１），对６－Ｋｉｔｏ－ＰＧＦ１α无明显影响（Ｐ＜０．０５），推测山莨菪碱和川芎嗪在预防肺水肿的发生中，ＴＸＡ２参与动力学和非动力学机制来达到ＰＧＩ２与ＴＸＡ２的平衡。Ｐ＜０．０１速恢复，存活时间＞３０ｍｉｎ者３０ｍｉｎ时取血，收集支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）；第四组为川芎嗪预防组，先于股静脉注射川芎嗪１２０ｍｇ·ｋｇ－１作为预防，再注射上述过量Ａｄｒ，动物经一度呼吸困难甚至暂停后迅速恢复，存活者注射Ａｄｒ后３０ｍｉｎ取血，收集ＢＡＬＦ。颈总动脉的血直接?

去卵巢大鼠心肌肾上腺素和胆碱受体活性的改变

为探索雌激素对植物神经系统调节心肌功能的影响，观察切除卵巢、补充雌激素及应激时心肌β、M受体活性的改变。成年雌性大鼠切除卵巢（OVX）后心肌与胆碱能M受体配基3H－QNB的结合活性明显高于对照组。经浸水制动应激后，OVX鼠心肌与肾上腺素能β受体配基3H－DHA结合活性明显低于对照组。补充苯甲酸雌二醇（200μg／日，三天一次，持续五周）后，上述变化明显消失。结果提示卵巢激素，特别是雌激素在对心脏的植物神经系统调节方面具有重要作用。

(一)蝙蝠葛苏林碱对兔淋巴细胞内钙含量的影响

采用钙荧光指示剂Fura—2/Am定量测试法检测了静息淋巴细胞胞浆内游离钙浓度,并以Ca^(2+)载体A23187作为阳性对照.观察了(一)蝙蝠葛苏林碱(8701)对兔淋巴细胞胞浆内Ca^(2+)浓度的影响。结果表明:8701的各种实验浓度均可显著地促进淋巴细胞内Ca^(2+)浓度增加,在浓度为10^(-4)mol·L^(-1)时,增加细胞内Ca^(2+)浓度的作用显著高于Ca^(2+)载体A23187的作用(P<0.01),提示该药有可能作为淋巴细胞的刺激剂或在高浓度时可能造成淋巴细胞的Ca^(2+)中毒作用。

雌激素水平对应激引起的大鼠心血管前列腺素代谢的影响

本文观察了去除卵巢（ＯＶＸ）大鼠在水浸拘束条件下，心肌和主动脉血栓素及前列环素（测其代谢产物ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏＰＧＦ＿（１ａ））含量的变化，并观察补充雌激素后的影响。结果：在实施应激后，ＯＶＸ鼠血管ＴＸＢ＿２和６－ｋｅｔｏＰＧＦ＿（１ａ）比值（Ｔ／Ｋ）明显高于假手术应激组（Ｐ＜０．０１），补充雌激素后恢复正常（Ｐ＜０．０５）。提示：雌激素对维持正常心血管舒缩功能，提高机体对外界刺激的适应性方面具有重要作用。

DMD散发型病例产前诊断对策

目的杜氏/贝氏肌营养不良症的散发病例的产前诊断分析,为临床服务提供依据。方法采用 DMD/BMD 基因的5’启动子区域、基因缺失热区的内含子及基因的3’不翻译区的多个短串联重复序列(STR)位点进行缺失检测和单体型连锁分析。结果应用此诊断程序可检测到大部分的缺失病例,对于非缺失病例,可以通过单体型连锁分析确定(风险)基因的标记。无家族史的散发病例中新生突变可发生在不同的层次上,新生突变可发生于男性生殖腺中;在产前诊断中,对获得风险染色体标记的男性胎儿要慎重对待。结论散发病例中基因突变可发生在不同世代,父源的生殖腺嵌合值得注意。

原纤维蛋白1基因新突变导致单纯性晶状体异位

目的 研究我国单纯性晶状体异位家系的致病基因 ,并确定基因突变。方法 对单纯性晶状体异位一家系进行临床研究和系谱分析。采集家系中 7例患者和 3例健康成员的静脉血 ,提取基因组DNA。通过连锁分析确定致病基因的染色体位点后 ,应用聚合酶链反应 (PCR)扩增原纤维蛋白(FBN) 1基因外显子 ,直接测序确定致病的基因突变。采用PCR和限制性内切酶法进行群体分析。结果 单纯性晶状体异位患者的FBN1基因外显子 6发生了错义突变 ,cDNA 6 4 0位的鸟嘌呤被腺嘌呤取代 (G6 4 0A) ;对应的甘氨酸改变为丝氨酸 (G2 14S)。突变后EagⅠ内切酶位点消失。家系中健康成员和5 0名正常人均未发现该突变。结论 FBN1基因新突变G6 4 0A (G2 14S)是该家系单纯性晶状体异位的致病基因突变。

家族性复发性葡萄胎的临床特征及遗传学分析

目的探讨家族性复发性葡萄胎(FRM)的临床及遗传学特征。方法回顾性分析2例FRM患者的临床资料,并对2例FRM及6例散发性葡萄胎患者及葡萄胎组织的DNA进行微卫星多态性检测,以鉴定葡萄胎的遗传学起源。结果2例FRM患者均为罕见的双亲来源的完全性葡萄胎(BiCHM);6例散发性葡萄胎患者中,1例部分性葡萄胎为双亲三倍体,其余5例完全性葡萄胎均为孤雄完全性葡萄胎。2例FRM患者在葡萄胎之后都继发了侵蚀性葡萄胎或绒毛膜癌,并发生了肺转移,但经过化疗和(或)肺叶切除,均已达到完全缓解。结论从遗传学起源上分类,FRM常为BiCHM,具有较高的恶变率及转移率。通过基因分析可确定葡萄胎的遗传学起源,对评估预后有重要意义。