目的:根据荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)的原理,构建一种基于上转换荧光纳米材料的新型免疫标记荧光猝灭试纸条检测牛奶中的兽药磺胺喹恶啉(sulfaquinoxaline,SQX)残留。方法:通过热分解方法合成上转...目的:根据荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)的原理,构建一种基于上转换荧光纳米材料的新型免疫标记荧光猝灭试纸条检测牛奶中的兽药磺胺喹恶啉(sulfaquinoxaline,SQX)残留。方法:通过热分解方法合成上转换纳米荧光材料,通过柠檬酸三钠还原法制备胶体金纳米颗粒。将合成的上转换荧光颗粒固定在试纸条C线上,并将上转换荧光颗粒与SQX包被抗原的混合物固定在T线上,将胶体金标记的SQX单克隆抗体喷涂在金标垫上。滴加样品后,随着样品液的流动,金标抗体会移动到T线处并与SQX包被抗原结合,这种结合会导致抗体上的纳米金颗粒(受体)与T线上的上转换颗粒靠近(供体),从而发生FRET,产生荧光猝灭。在980 nm激发器激发波长下通过目测检测荧光强弱变化,从而实现对SQX的检测。结果:该免疫荧光猝灭试纸条检测SQX的方法检测限为1μg/L,牛奶样品的检测限为8μg/L。整个检测过程不超过15 min。结论:该方法操作简便、灵敏度高、检测时间短、结果易于判断,可以满足牛奶中SQX残留的现场快速检测的要求。展开更多
建立一种动物源性食品中兽药恩诺沙星可视化凝胶柱快速免疫检测新方法。采用活化酯法制备恩诺沙星与辣根过氧化氢酶(HRP)的偶联物作为酶标抗原。整个检测在一个标准的1 m L SPE固相萃取柱中进行,柱中包含两层:一个结合了恩诺沙星特异性...建立一种动物源性食品中兽药恩诺沙星可视化凝胶柱快速免疫检测新方法。采用活化酯法制备恩诺沙星与辣根过氧化氢酶(HRP)的偶联物作为酶标抗原。整个检测在一个标准的1 m L SPE固相萃取柱中进行,柱中包含两层:一个结合了恩诺沙星特异性抗体的凝胶检测层和一个结合了HRP抗体的凝胶质控层。将样品提取液与酶标抗原预混合后加入到检测柱中,基于抗原抗体的竞争结合反应和辣根过氧化物酶的酶促反应,根据检测柱的检测层颜色的深浅和有无来定性半定量检测恩诺沙星的含量。该凝胶检测柱的检测限为5μg/L,整个检测过程可以在10 min内完成,猪肉、牛肉、鸡肉、鱼肉、虾肉和牛奶等动物源性食品中恩诺沙星检测限为100μg/kg。该方法具有准确、灵敏、特异性好、操作简便快速、成本低等优势,适合动物源性食品中恩诺沙星残留的快速筛查。展开更多
文摘建立一种动物源性食品中兽药恩诺沙星可视化凝胶柱快速免疫检测新方法。采用活化酯法制备恩诺沙星与辣根过氧化氢酶(HRP)的偶联物作为酶标抗原。整个检测在一个标准的1 m L SPE固相萃取柱中进行,柱中包含两层:一个结合了恩诺沙星特异性抗体的凝胶检测层和一个结合了HRP抗体的凝胶质控层。将样品提取液与酶标抗原预混合后加入到检测柱中,基于抗原抗体的竞争结合反应和辣根过氧化物酶的酶促反应,根据检测柱的检测层颜色的深浅和有无来定性半定量检测恩诺沙星的含量。该凝胶检测柱的检测限为5μg/L,整个检测过程可以在10 min内完成,猪肉、牛肉、鸡肉、鱼肉、虾肉和牛奶等动物源性食品中恩诺沙星检测限为100μg/kg。该方法具有准确、灵敏、特异性好、操作简便快速、成本低等优势,适合动物源性食品中恩诺沙星残留的快速筛查。
