神经肽Y对猪小肠上皮细胞NaPi-Ⅱb蛋白表达及无机磷吸收的影响

本试验通过猪小肠上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)的体外培养,旨在从细胞水平、基因转录和蛋白表达3个层面探讨不同浓度神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)对猪IEC中Ⅱb型钠磷转运蛋白(Sodium dependent phosphate cotransporterⅡb,NaPi-Ⅱb)的表达及无机磷(Inorganic phosphorus,Pi)吸收的影响,阐释NPY调控Pi吸收的机理,为深入研究动物小肠Pi吸收的分子机制和调控通路提供试验依据。试验设有6个处理,对照组未加NPY,其他处理组添加不同浓度的NPY(10-11、10-10、10-9、10-8和10-7 mol·L-1),每个处理设有6~8个重复,通过噻唑蓝(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)比色法检测小肠上皮细胞的增殖情况;通过磷检测试剂盒,采用磷钼酸法测定细胞上清液Pi含量的变化;利用荧光定量PCR技术检测IEC中NaPi-Ⅱb mRNA的相对表达量,采用蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测NaPi-Ⅱb蛋白的相对表达水平。结果表明:用不同浓度的NPY刺激IEC 24h后,各处理组细胞增殖无显著性差异(P>0.05)。细胞上清液中Pi含量随时间呈显著线性(P<0.01)和二次曲线(P<0.01)下降;在干预24h后,各处理组细胞上清液中Pi含量组间呈现显著性差异(P<0.01),与对照组相比,10-10、10-9、10-8和10-7 mol·L-1处理组上清液Pi含量呈显著性下降(P<0.01),IEC对Pi的吸收量分别提高了161%、171%、168%和139%。NPY添加浓度与NaPi-Ⅱb mRNA和NaPi-Ⅱb蛋白的相对表达量均呈二次曲线关系(P<0.01,P<0.05)。适宜浓度的NPY可以通过刺激小肠上皮细胞NaPi-Ⅱb mRNA的表达,使NaPi-Ⅱb蛋白表达增多,进而诱导细胞外液中无机磷跨膜转运到细胞内液,促进小肠上皮细胞对无机磷的吸收;培养液中NPY的最佳浓度为10-10~10-8 mol·L-1。

不同铬源对肉鸡肌肉品质及氨基酸含量的影响

为了考察日粮中添加不同铬源(均为有机铬)对肉鸡肌肉品质及氨基酸含量的影响,为铬资源的合理利用提供科学依据。特选用1日龄爱拔益加(Arbor Acres,AA)肉鸡792只,随机分成6个处理组,每个处理4个重复,每个重复33只;对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中分别添加酵母铬0.2mg/kg、吡啶甲酸铬0.2mg/kg或蛋氨酸铬0.1mg/kg(Ⅰ)、0.2mg/kg(Ⅱ)、0.6mg/kg(Ⅲ)型日粮(以Cr3+计),自由采食、饮水,试验期49d。结果表明:1)酵母铬和蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著降低胸肌纤维密度(P<0.05),酵母铬还显著降低了腿肌纤维面积(P<0.05);蛋氨酸铬(Ⅰ)组能显著降低胸肌和腿肌维纤维面积(P<0.05);2)吡啶甲酸铬能显著降低胸肌蛋白质量浓度(P<0.05),蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著降低胸肌粗脂肪含量(P<0.05);3)除蛋氨酸铬(Ⅱ)能显著提高腿肌总抗氧化能力外(P<0.05),不同铬源对胸肌和腿肌其他抗氧化指标的影响差异均不显著(P>0.05);蛋氨酸铬(Ⅲ)能显著提高胸肌总抗氧化能力、提高腿肌过氧化氢酶活性(P<0.05);4)除吡啶甲酸铬显著降低胸肌丙氨酸含量外(P<0.05),不同铬源对肌肉其他氨基酸含量影响均不显著(P>0.05)。以上结果提示,与对照组相比,酵母铬和蛋氨酸铬较吡啶甲酸铬对改善肉鸡肌肉组织结构及抗氧化性能效果明显,补铬对改善肉鸡肌肉氨基酸含量、提高肉品质效果不明显(P>0.05)。

磷在动物小肠中的吸收转运及其调控机制的研究进展

磷在动物体内具有重要的生理功能。在动物小肠中,磷主要是以无机磷的形式通过小肠上皮细胞顶端膜被吸收,此过程需要Ⅱb型的钠磷协同转运蛋白(NaPi-Ⅱb)的协助,并受到多种因素的调控。文章重点综述了近年来无机磷在小肠中的吸收转运及其调控机制的研究进展,并展望了其研究前景。