NF-κB抑制剂对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的 观察NF κB抑制剂———二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA表达的影响。方法 采用内毒素休克模型 ,4 7只大鼠随机分为正常对照组 (n=8)、内毒素休克组(n =2 4 )和PDTC拮抗组 (n=15 ) ,留取肝、肺、肾组织检测HMGB1mRNA表达及相应器官功能指标的变化。结果 内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织HMGB1mRNA表达广泛上调 ,分别于 2～6h显著增高 (P <0 0 5 ) ,12h呈现进一步升高趋势。PDTC处理后 12h肝、肺、肾组织HMGB1mRNA表达均显著下调 ,其中肾组织于 2～ 12h趋于伤前范围 ;同时 ,血清ALT、AST、BUN、Cr水平于 6h明显降低 (P <0 0 5 ) ,肺组织髓过氧化物酶活性各时相点均显著低于内毒素休克组 (P <0 0 5 )。结论 NF κB抑制剂能显著抑制内毒素休克动物组织HMGB1mRNA的表达 ;NF κB信号转导通路参与了内毒素介导HMGB1基因表达的调控过程 ,并与脓毒症时的多器官功能损害密切相关。

核因子-κB抑制剂对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响及机制

目的:观察核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂——二硫氨基甲酸酞吡咯烷(PDTC)对内毒素休克大鼠高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)mRNA 表达的影响及机制。方法:采用内毒素休克模型,47只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=24)和 PDTC 拮抗组(n=15),留取肝、肺、肾组织检测 HMGB1 mRNA 表达及相应器官功能指标的变化。结果:内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织 HMGB1 mRNA 表达广泛上调,分别于2～6h 显著增高(P<0.05),12h 呈现进一步升高趋势。PDTC 处理后12h,肝、肺、肾组织 HMGB1 mRNA 表达均显著下调,其中肾组织2～12h 趋于伤前范围;同时,血清丙氨酸转移酶、天冬氨酸转移酶、尿素氮、肌酐水平6h 明显降低(P<0.05),肺组织髓过氧化物酶活性各时相点均显著低于内毒素休克组(P<0.05)。结论:NF-κB抑制剂能显著抑制内毒素休克动物组织 HMGB1 mRNA 的表达,NF-κB信号转导通路参与了内毒素介导 HMGB1基因表达的调控过程,并与脓毒症时多器官功能损害密切相关。

胚胨培养液分离培养解脲脲原体(Uu)效果的实验观测

为了方便临床对Uu感染的及时确诊,我们自行试制了胚胶培养液(胚液),与目前临床常用的牛心浸液培养液(牛心液)作Uu的培养比较,对其效果进行观测,发现二者对Uu的检出率无显著差别,但胚液的颜色改变早,且Uu在胚液中存活时间较长。故而既可提前确诊,又可减少临床因延时而造成的漏诊或误诊。

《伤寒论》柴胡类方衍变探微

《伤寒论》的小柴胡汤通过药量、药味和服药次数的变化,衍化出柴胡类方,探讨它们之间的衍化过程,不仅可以领会柴胡类方病机的内在联系,同时也可以进一步理解仲景如何从药量、药味和服药次数三方面的改变,来使方剂的治疗与具体病机相适应,从而达到极高的辨证论治水平。

医学免疫学的双语教学模式

教学模式的选择是保证医学免疫学双语教学顺利开展的关键。结合国内双语教学的经验和教研室的教学实践,探讨医学免疫学双语教学模式的选择及其实践教学。

将科研融入医学免疫学教学的探索与研究

目的结合医学免疫学课程特点,本文主要探讨如何将科研的研究内容和免疫学的前沿进展引入医学免疫学的教学,提高医学免疫学的教学质量和教学效果。方法以教学为中心,以科研为基础,通过采用多种形式的教学模式和教学方法的改革,将科研融入医学免疫学理论教学中;通过科研结合实践教学培养学生的科研能力。结果教学带动科研,科研促进教学,能够激发学生的学习兴趣,提高学生学习的主观能动性,培养学生独立分析、科学解决问题的能力,增强学生科研思维能力和科研实践能力。结论将科研融入医学免疫学教学可成为提高教学质量的有效途径。

医学免疫学教学方法改革的探讨

该文根据医学免疫学的特点与教学实践,讨论医学免疫学理论与实验教学过程中的教学方法,以及在教学中应采取的一些措施,增强医学免疫学的教学效果。

试论小建中汤证与小柴胡汤证的关系

小建中汤证与小柴胡汤证是《伤寒论》中两个重要的方证,而且两者之间有密切的关系,理解其内在机理,无论对于《伤寒论》本身的研究,还是对于临床应用都是大有裨益的。

润神口服液急性毒性试验

目的:为了观测润神口服液对小鼠的急性毒性作用。方法:给小鼠腹腔注射润神口服液,持续观测5～6d,计数小鼠死亡率,按概率单位法目测该口服液LD_(50)半数致死量。结果:LD_(50)为42.17ml/kg体重。结论:润神口服液毒性非常低,而且部分毒性原因是由于门服液pH偏低,大剂量注射引起酸中毒引起的。实验小鼠脾脏明显增重,可能与免疫力增强有关,而且存活小鼠体力明显增加(P<0.05)。

润神口服液对小鼠耐缺氧能力的影响

应用常压缺氧试验观察润神口服液对小鼠耐缺氧能力的影响。结果显示注射心得安、1号口服液和2号口服液雌鼠的耐缺氧能力均极显著地高于生理盐水对照组(P<0.01)。注射心得安和1号口服液雄鼠的平均耐缺氧能力分别下降5.5％和13.6％,注射2号口服液的雄鼠则提高15.4％。说明2号口服液对雌雄小鼠的耐缺氧能力有更好的调理、平衡及提高作用。

间接血凝替代试验的应用

间接血凝试验这一免疫学技术在临床上可用于许多抗原或抗体的测定,因此在免疫学教学中占有重要地位。但随着现代免疫学的飞速发展,血凝试验在临床上的应用逐渐减少,购买试剂盒比较困难。为满足教学的需要,我室试以醛化SRBC与溶血素直接凝集法模拟间接血凝试验,收到了较好的教学效果。

润神口服液对小鼠体液免疫功能的影响

应用溶血素测定方法检测润神口服液对小鼠抗体产生的影响,发现2号口服液比1号口服液有更好稳定体液免疫功能的作用,并且能使雌鼠有效拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用(P<0.05)。伴随该实验的饮食测定,以及自然感染死亡率的观察、体力增强测定、常压耐缺氧试验等佐证资料说明,2号口服液确有“扶正固本”的功效,从而提高、稳定机体免疫功能。同时提示2号口服液如在抗肿瘤化疗中应用,可能会明显提高疗效,提高抗感染能力,减轻副作用。

生物喋呤对内毒素休克大鼠肺组织核因子-κB活化的影响及意义

目的 探讨生物喋呤对内毒素休克大鼠肺组织核转录因子 κB (NF κB)通路活化的影响及其在急性肺损伤中的意义。方法 采用内毒素休克模型 ,10 4只大鼠分为正常对照组 (n =8)、内毒素休克组(n =4 8)、 2 ,4 二胺 6 羟基嘧啶 (2 ,4 diamino 6 hydroxy apyrimidine ,DAHP)拮抗组 (n =4 8)。采用逆转录多聚酶链式反应测定肺组织三磷酸鸟苷环水解酶I (GTP CHI)mRNA的表达水平 ,采用凝胶阻滞电泳分析技术测定NF κB的DNA结合活性 ,同时测定肺组织髓过氧化物酶 (MPO)活性。结果 与正常对照组相比 ,内毒素攻击可导致动物肺组织GTP CHImRNA表达明显上调 ,6h后一直维持在较高水平 ;同时 ,NF κB活性于 0 5h迅速增加 ;且持续至伤后 4 8h ,肺组织MPO活性各时间点均显著升高 (P <0 .0 1) ,6h达峰值。采用生物喋呤合成抑制剂DAHP处理后 ,肺组织GTP CHImRNA表达早期改变不明显 ,但 12h后明显受抑 ;MF κB活性 0 5、 2 4、 4 8h明显降低 ;肺组织MPO活性 0 5、 6、 2 4、 4 8h均显著低于内毒素休克组 (P <0 0 5 )。结论 生物喋呤参与了内毒素休克动物肺组织NF κB信号通路的活化过程 ,抑制生物喋呤能降低NF κB的DNA结合活性 。

细胞外信号调节激酶在内毒素休克大鼠生物喋呤诱生中的作用机制探讨

目的观察细胞外信号调节激酶 (ERK) 通路抑制剂对生物喋呤 (BH4)和一氧化氮(NO)表达及核因子-κB (NF-κB) 活化的影响,探讨内毒素休克时ERK信号通路与NF-κB的交汇作用及其对BH4诱生NO的调控机制.方法采用内毒素休克模型,60只大鼠随机分为正常对照组(n=8)、内毒素休克组(n=32)和ERK抑制剂PD98059拮抗组(n=20).留取动物肝、肺、肾组织进行NF-κB活性分析以及三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ(GTP-CHⅠ)、诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) 基因表达的检测,并测定组织及血浆中BH4、NO水平.结果内毒素攻击可导致动物肝、肺、肾组织GTP-CHI基因表达和BH4水平明显升高,至伤后24 h仍持续于较高水平;与之相应,组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高;各组织NF-κB 迅速活化,并于2 h达峰值.采用PD98059处理后,内毒素休克动物肾组织GTP-CHⅠ mRNA表达明显受抑,肝、肺组织GTP-CHⅠ mRNA表达仅呈现降低趋势;血浆及肝、肾组织中BH4水平12 h显著降低;同样,各组织iNOS mRNA表达及NO水平早期亦显著降低.此外,PD98059处理组动物肝组织2～6 h、肺组织2 h、24 h和肾组织24 h时相点 NF-κB活性显著降低.结论内毒素休克时抑制ERK通路,能部分下调BH4和NO表达与NF-κB的活化,表明ERK与NF-κB通路间可能存在交汇作用,共同参与了BH4诱生NO的调控作用.

内毒素休克大鼠丝裂原活化蛋白激酶p38通路在生物喋呤诱生中的作用及其意义

目的 观察丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)p38信号通路抑制剂SB2 0 35 80对内毒素休克大鼠生物喋呤 (BH4 ) 一氧化氮 (NO)表达的影响及其意义。 方法 采用内毒素休克模型 ,5 6只大鼠随机分为正常对照组 (8只 )、内毒素休克组 (32只 )和SB2 0 35 80拮抗组 (1 6只 )。留取肝、肺、肾组织测定三磷酸鸟苷环水解酶I (GTP -CHI)与诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达 ,同时检测血浆与组织中BH4 和NO水平的变化。 结果 内毒素攻击后 ,各组织GTP -CHI基因表达和BH4 水平明显升高 ,至伤后 2 4h仍持续于较高水平。组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高 ,其中肝、肺改变尤为显著。SB2 0 35 80处理后 ,肝、肺、肾组织GTP -CHImRNA表达分别于 1 2 ,2 4 ,2～ 1 2h受到显著抑制 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,肝组织BH4 水平 1 2h显著降低 (P <0 .0 5 ) ;同时 ,肝、肺和肾组织iNOSmRNA表达亦有不同程度下调 (P <0 .0 5或 0 .0 1 ) ,且肝、肺组织NO水平明显下降。 结论 p38MAPK信号途径参与了内毒素介导BH4 诱生的病理生理过程 ,抑制该通路能明显下调内毒素休克动物多器官BH4 NO系统的表达。

c-Jun氨基末端激酶通路在内毒素休克大鼠生物喋呤诱生中的信号机制

目的 观察c Jun氨基末端激酶 (JNK)信号通路抑制剂———curcumin对内毒素休克大鼠生物喋呤 (BH4 )及一氧化氮 (NO)表达的影响 ,并探讨JNK途径在生物喋呤诱生中的信号转导机制。方法 建立内毒素休克模型 ,6 0只大鼠随机分为正常对照组 (n =8)、内毒素休克组 (n =32 )和curcumin拮抗组 (n=2 0 )。采用逆转录多聚酶链式反应测定肝、肺、肾组织三磷酸鸟苷环水解酶I (GTP CHI)与诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达水平 ,分别采用反相高效液相色谱法和Griess比色法测定血浆与组织中BH4 、NO水平的变化。结果 与正常对照组相比 ,内毒素使动物肝、肺、肾组织GTP CHI基因表达和BH4水平明显升高 ,至伤后 2 4h仍持续于较高水平 ;与之相应 ,组织iNOS基因表达和NO水平亦明显升高。curcumin处理可明显下调肝、肺、肾组织GTP CHImRNA表达水平 ,并且肝组织 6～ 2 4h时、肺组织 12h时BH4 水平显著降低 ;各组织iNOSmRNA表达及NO水平亦显著降低。结论 抑制JNK信号通路能明显抑制内毒素休克鼠多器官生物喋呤 /NO系统的表达 ,JNK途径参与了生物喋呤诱生的信号转导过程。

内毒素休克大鼠核因子κB活化规律及其在生物蝶呤诱生中的作用

目的观察内毒素休克大鼠血浆及主要脏器核因子(NF)κB活化规律及其对生物蝶呤(BH4)和一氧化氮(NO)表达水平的影响,探讨内毒素休克时NF-κB信号通路对BH4诱生NO的分子调控机制及其与多器官功能损害的关系。方法将47只大鼠按表格随机法分为正常组(8只)、内毒素／脂多糖(LPS)组(24只,每观察时相点8只,均同时注射LPS制成休克模型)和拮抗组[15只,每观察时相点5只,均同时注射LPS并以吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)拮抗]。休克及拮抗组于注射LPS后2、6、12 h观察,并与正常组同法处死,无菌留取大鼠血标本及肝、肺、肾组织,测定组织中NF-κB活性和三磷酸鸟苷环水解酶Ⅰ(GTP-CHⅠ)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达水平、血浆和组织中的BH4含量及NO水平、肝脏和肾脏功能指标、肺组织髓过氧化物酶活性。结果与正常组(例如肺组织中NF-κB活性为26±6)比较,LPS组大鼠组织中NF-κB迅速活化(P<0．01),并于注射后2 h达峰值(肺组织中为291±44);LPS组各组织中GTP-CHⅠ和iNOS mRNA表达、BH4和NO水平也较正常组明显升高(P<0．05或0．01),至伤后12 h仍持续较高水平。此外,该组相应器官功能均受到不同程度的损害。应用PDTC的拮抗组大鼠各组织中NF-κB活性均较LPS组有所降低,GTP-CHⅠ、iNOS mRNA表达及BH4、NO水平显著受抑,肝、肺、肾功能明显改善。结论内毒素休克时机体内NF-κB通路高度活化,并对BH4／NO系统具有明显调节效应;可通过下调BH4介导的iNOS的过度活化抑制NF-κB信号途径,从而减轻组织炎性反应,对机体脏器功能起到保护作用。