高血压性脑出血患者血清miR-132、miR-34a水平及其与预后的关系

目的探讨微小RNA-132(miR-132)、miR-34a在高血压性脑出血患者血清中的表达及其与预后的关系。方法选取2020年6月—2022年6月西南医科大学附属医院、四川绵阳四〇四医院神经外科治疗高血压性脑出血患者120例为观察组。根据患者病情严重程度分为轻度亚组32例、中度亚组58例和重度亚组30例;根据患者预后分为预后良好亚组76例和预后不良亚组44例。另选取同期医院健康体检者120例为健康对照组。检测各组血清miR-132、miR-34a水平;采用多因素Logistic回归分析高血压性脑出血患者预后的影响因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-132、miR-34a水平对高血压性脑出血患者预后的预测价值。结果与健康对照组比较,观察组血清miR-132、miR-34a水平显著升高(t/P=11.907/<0.001、12.148/<0.001);血清miR-132、miR-34a水平比较,重度亚组>中度亚组>轻度亚组(F/P=35.229/<0.001、33.573/<0.001);与预后良好亚组比较,预后不良亚组患者糖尿病、家族遗传史比例及收缩压、血清miR-132、miR-34a显著升高[χ^(2)(t)/P=11.666/<0.001、5.083/0.024、3.557/0.001、3.208/0.002、3.592/<0.001],格拉斯哥预后评分(GOS评分)显著降低(t/P=12.458/<0.001)。Logistic回归分析结果显示,miR-132高、miR-34a高、收缩压高、有糖尿病史是高血压性脑出血患者预后的危险因素[OR(95%CI)=2.077(1.352~3.190)、3.458(1.613~7.412)、1.528(1.104~2.116)、2.778(1.448~4.657)],GOS评分高为独立保护因素[OR(95%CI)=0.682(0.501~0.928)];血清miR-132高、miR-34a高及二者联合预测高血压性脑出血患者预后的AUC分别为0.719、0.727、0.782,二者联合优于单独预测价值(Z/P=2.588/0.011、2.453/0.014)。结论高血压性脑出血患者血清miR-132、miR-34a水平显著上调,两者联合可较好地预测高血压性脑出血患者预后。

高血压脑出血患者脑组织microRNA表达谱及生物信息学分析

目的构建高血压脑出血患者脑组织差异表达miRNA,并进行生物信息学分析。方法选取行高血压脑出血手术患者脑血肿腔壁脑组织标本16例,同期选择重型颅脑损伤且具有高血压病史患者脑组织标本16例作为对照组。通过Trizol法提取标本总RNA,筛选出差异表达的miRNA。利用生物信息学技术分析差异表达miRNA的特点,通过String数据库得到靶基因蛋白互作分析结果,Cytoscape软件进行miRNA-mRNA核心调控网络可视化。结果实验组与对照组相比较共筛选出差异表达miRNA 43个(P<0.05),其中上调miRNA共7个,下调miRNA共36个。对差异miRNA的靶基因进行KEGG/GO富集分析,得到与高血压脑出血相关的信号通路:cAMP信号通路、ErbB信号通路、Calcium信号通路、Wnt信号通路(P<0.05)。构建miRNA-mRNA可视化网络图,发现关联度最高的miRNA为:hsa-miR-1303、hsa-miR-1972、hsa-miR-362-3p、hsa-miR-101-3p、hsa-miR-378d,PPI蛋白互作分析发现连接度最高的前三个基因为:MAPK1、GRB2和RAC1。结论差异miRNA可能在自发性高血压脑出血的发病机制中具有重要作用,可能为自发性高血压脑出血的治疗及预防提供潜在治疗靶点及方向。

微小RNA在高血压相关性脑出血患者中表达的初步分析

目的探讨微小RNA对高血压相关性脑出血(HRICH)患者脑血管组织的影响。方法回顾性连续纳入2018年9月至2019年12月四川绵阳四〇四医院神经外科自发性高血压脑出血住院患者9例为观察组,回顾性连续纳入同期四川绵阳四〇四医院神经外科因颅脑外伤需行颅内减压术且伴高血压病史的住院患者9例为对照组。术中取两组患者术区皮质造瘘口的少量脑血管标本,通过Trizol法提取标本总RNA,筛选差异表达的微小RNA。从微小RNA差异表达谱中随机选择3种微小RNA,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)技术验证结果的可靠性。采用TargetScan、miRDB、miRanda三种在线分析工具预测差异表达微小RNA的靶基因,并对靶基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,富集程度越高,相应的P值越小。结果(1)与对照组标本比较,观察组患者脑血管组织细胞中有35种差异表达的微小RNA,其中15种微小RNA表达下调,即hsa-let-7g-3p、hsa-miR-103a-2-5p、hsa-miR-126-5p、hsa-miR-130a-3p、hsa-miR-210-3p、hsa-miR-214-3p、hsa-miR-28-5p、hsa-miR-34a-5p、hsa-miR-378a-3p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-4785、hsa-miR-549a-5p、hsa-miR-574-3p、hsa-miR-590-3p、hsa-miR-660-3pg表达降低(均P<0.05);20种微小RNA表达上调,即hsa-miR-1180-3p、hsa-miR-1224-3p、hsa-miR-128-2-5p、hsa-miR-1298-3p、hsa-miR-137-5p、hsa-miR-139-3p、hsa-miR-139-5p、hsa-miR-2682-5p、hsa-miR-370-3p、hsa-miR-433-3p、hsa-miR-485-5p、hsa-miR-541-3p、hsa-miR-543、hsa-miR-598-5p、hsa-miR-6505-5p、hsa-miR-668-3p、hsa-miR-7-5p、hsa-miR-744-5p、hsa-miR-873-3p、hsa-miR-942-3p表达升高(均P<0.05)。(2)对已知的差异表达微小RNA采用TargetScan、miRDB、miRanda三种在线分析工具进行基因预测,结果显示,共同交集预测得到的靶基因有87个交集。(3)随机抽取3种差异表达的微小RNA进行荧光定量逆转录PCR验证,结果显示,与对照组(颅脑外伤伴高血压病史者)比较,观察组(自发性高血压脑出血者)hsa-miR-145-5p、hsa-miR-28-5p表达降低(0.22±0.17比1.00±0.29,t=0.153;0.13±0.03比1.00±0.62,t=0.421),hsa-miR-139-3p表达升高(1.95±0.29比1.00±0.52,t=0.492),组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。(4)交集靶基因的KEGG富集分析结果显示,主要涉及Ras相关蛋白1信号通路、黏附斑激酶、肿瘤微小RNA、环磷酸鸟苷-环磷酸鸟苷依赖性蛋白激酶信号通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、人乳头状瘤病毒、肿瘤蛋白聚糖、肿瘤通道蛋白,其中MAPK信号通路的富集程度较高(P<0.01)。结论微小RNA可能在调控HRICH的相关生物学功能中具有重要作用。