组织块消化法原代培养大鼠输精管平滑肌细胞及鉴定

目的建立一种稳定高效、存活率高的大鼠输精管平滑肌细胞体外分离及培养方法,为相关研究提供理想的细胞模型。方法采用组织块消化法对大鼠离体输精管平滑肌细胞进行原代培养。采用形态学观察、HE染色、抗α-SMA免疫细胞化学荧光染色对细胞进行鉴定,台盼蓝染色计算细胞存活率及细胞总数,胰酶消化传代并绘制生长曲线。结果对照实验表明胶原酶Ⅱ消化效果优于胶原酶Ⅰ,最佳消化时间为60 min,同时控制吹打次数、沉淀时间及培养环境,获得了理想的平滑肌细胞总数及存活率。平滑肌细胞呈典型的梭形、长条形,可传代,且出现平滑肌细胞培养典型的"峰-谷"状特征,生长曲线为"S"型。经抗α-SMA免疫荧光鉴定,培养细胞为平滑肌细胞,纯度为(92.6±4.3)%。结论采用组织块消化法成功建立了大鼠输精管平滑肌细胞的体外分离及培养方法。

肾移植治疗家族性低血镁高尿钙肾钙化症一例报告

患者,男,20岁。2015年6月3日因腰腹部绞痛11个月入院。11个月前于当地医院就诊,体征以及尿常规、尿培养检查无明显感染征象。行双侧输尿管支架管置入术,术后血肌酐1 200μmol/L,维持血液透析治疗11个月,其间有泌尿系结石自行排出,结石成分分析结果为一水草酸钙。查体:体温36.8℃,心率101次/分,呼吸20次/分,血压156/100 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)。双肾区轻度压痛、叩击痛,输尿管走行区无明显结节及压痛。

自体管状肉芽组织重建兔全周尿道的功能组织学评估

目的探讨应用自体皮下诱导生成的管状肉芽组织重建兔全周尿道的可行性。方法 18只雄性兔分为实验组与对照组,每组9只,全周游离并切除1.0 cm前尿道,实验组应用自体皮下诱导生成的管状肉芽组织原位修复尿道缺损,对照组行单纯端端吻合。术后1、2及6个月行尿道造影、大体观察、组织学检测及Western blotting检测,动态评估新尿道通畅度及组织再生。结果组织学及透射电镜检测显示,新生管状肉芽组织富含胶原纤维及肌成纤维细胞。实验组术后尿道腔保持通畅,对照组则发生进行性狭窄。实验组术后移植物表面逐渐覆盖完整的尿路上皮层,上皮下可见排列日趋致密规则的新生平滑肌束。Western blotting示实验组随术后时间延长,移植物细胞广谱角蛋白AE1/AE3及α-平滑肌肌动蛋白表达量均逐渐增加,术后6个月其表达量接近正常尿道。结论自体皮下诱导生成的管状肉芽组织可成功修复兔1.0 cm长前尿道缺损。