CRP、PCT和D-D与脓毒血症患者病情严重程度及预后的相关性研究

分析C反应蛋白 (CRP)及降钙素原 (PCT)?D-D(D-dimer)与脓毒血症患者病情严重程度及预后的相关性分析?方法 随机选取2019年8月至2021年8月在我院急救创伤中心收治的脓毒血症患者78例,将脓毒血症的患者分为3组,分别为脓毒症?严重脓毒症与脓毒性休克三组,再根据28天内患者是否死亡,将脓毒血症的患者分为生存组与死亡组?统计CRP?PCT?D-D与脓毒血症患者病情严重程度?预后的关系? 结果 (1)脓毒性休克组CRP?PCT和D-D水平高于脓毒症?严重脓毒症组,严重脓毒症组PCT?CRP?D-D水平高于脓毒症组患者,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)死亡组 CRP?PCT?D-D水平高于存活组差异有统计学意义(P<0.05)。(3)根据患者28天预后绘制ROC曲线,SOFA评分曲线下面积为0.879、CRP曲线下面积为0.817、PCT曲线下面积为0.807。结论 炎症指标CRP、PCT、D-D与脓毒血症患者严重程度及患者预后密切相关。

柚皮苷通过抑制Kupffer细胞的焦亡改善脂多糖诱导的肝损伤

目的探究柚皮苷(naringin,Nar)在脂多糖(LPS)诱导的肝损伤中的作用及相关作用机制。方法60只C47BL/6野生型雄性小鼠随机分为4组(每组15只):对照组(Control),柚皮苷组(Nar),脂多糖模型组(lipopolysaccharide,LPS)与柚皮苷组处理的LPS模型组(Nar+LPS),其中Nar组与Nar+LPS组小鼠予以100 mg·kg^(-1)·d^(-1)的柚皮苷持续灌胃10天,而LPS与LPS+Nar组小鼠经腹注射5 mg·kg-1LPS进行肝损伤造模,6 h后脱颈处死各组小鼠;试剂盒检测各组小鼠外周血中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspertate aminotransferase,AST)含量,ELISA检测炎症因子白介素-6(interlukin-6,IL-6)、白介素-1β(interlukin-1β,IL-1β)与肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的水平;取小鼠肝脏组织,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling,TUNEL)观察各组小鼠肝组织病理改变与细胞焦亡水平,反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝组织中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达,试剂盒检测氧化应激标志物丙二醛(malondialdehyde,MDA)与谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;体外培养小鼠Kupffer细胞,CCK-8筛选LPS与Nar的最佳作用浓度后,将细胞同样分为Control组、Nar组、LPS组与Nar+LPS组;ELSIA检测各组细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α的表达;试剂盒检测细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、MDA与GSH水平;cleaved Caspase-1/TUNEL染色检测各组细胞的焦亡情况,Western blot检测细胞中焦亡相关蛋白,核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotidebinding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1裂解片段(cleaved-cysteinyl aspartate specific proteinase-1,cleaved Caspase-1)、gasdermin D的N端寡聚化(Gasdermin D N-terminal oligomerization,GSDMD-N)、IL-1β的表达水平和核因子-κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)的磷酸化水平(p-NF-κB/NF-κB)。结果与Control组相比,LPS组与Nar+LPS组的血清中ALT、AST与IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著增加(P<0.05或P<0.01),肝组织病理损伤加重,肝细胞焦亡率升高,细胞中IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNAs水平与MDA的含量均显著升高(P<0.05),而GSH明显降低(P<0.05),Nar组无明显改变(P>0.05),但较LPS组相比,Nar+LPS组中除肝组织中GSH含量明显升高外,上述其他检测指标均明显降低(P<0.05);体外细胞实验中筛选出100 ng·mL-1的LPS与200μmol·L-1的Nar为最佳作用浓度;与Control组Kupffer细胞相比,LPS组与LPS+Nar组的IL-6、IL-1β、TNF-α与MDA、LDH含量和细胞焦亡水平及焦亡相关蛋白NLRP3、cleaved Caspase-1、GSDMD-N、IL-1β的表达均明显升高(P<0.05),NF-κB的磷酸化水平(p-NF-κB/NF-κB)亦显著升高,而GSH含量明显降低(P<0.05),但与LPS组相比,LPS+Nar组除GSH明显升高外,其他检测指标均显著降低(P<0.05)。结论柚皮苷可在体内外降低炎症反应与氧化应激来减轻LPS诱导的肝损伤与功能障碍,这可能与其能通过NF-κB途径抑制Kupffer细胞焦亡的机制相关。

过表达SIRT1通过增强自噬水平调控巨噬细胞M2型极化减轻脓毒症诱导的急性肺损伤

目的:探究过表达沉默信息调节因子1(SIRT1)对脓毒症诱导的急性肺损伤(ALI)巨噬细胞表型转化的影响及调控机制。方法:体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,LPS+IFN-γ与IL-4定向诱导其M1与M2型极化,Western blot检测细胞SIRT1和M1型标志物iNOS、CD86与M2型标志物Arg1、Mcr1蛋白表达。转染过表达SIRT1的质粒,RT-PCR检测转染效率,LPS诱导脓毒症ALI体外细胞模型,并分为4组:LPS组、LPS+pcDNA3.1-SIRT1组、LPS+pcDNA3.1-NC组和Control组,Western blot检测各组细胞iNOS、CD86与Arg1、Mcr1和自噬标志物LC3B-Ⅱ/Ⅰ、Beclin1与p62及SIRT1/FOXO1信号通路SIRT1、FOXO1蛋白表达。免疫荧光检测各组细胞LC3B荧光表达。采用盲肠结扎穿孔(CLP)术构建脓毒症ALI小鼠模型,通过慢病毒在小鼠体内过表达SIRT1,并分为4组:假手术(Sham)组、CLP组、CLP+LV-NC组、CLP+LV-SIRT1组,RT-PCR、HE染色、ELISA检测各组小鼠肺组织SIRT1 mRNA表达、病理损伤及支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子TNF-α、IL-6与IL-10分泌,记录并分析造模72 h后各组小鼠存活率。结果:体外成功诱导了RAW264.7细胞M1、M2型极化,且M1型巨噬细胞SIRT1蛋白表达明显降低(P<0.05),而M2型巨噬细胞SIRT1表达显著升高(P<0.05)。转染pcDNA3.1-SIRT1后细胞SIRT1 mRNA表达明显升高(P<0.05)。与LPS组或LPS+pcDNA3.1-NC组相比,LPS+pcDNA3.1-SIRT1组iNOS、CD86、p62蛋白表达显著降低(P<0.05),而Arg1、Mcr1、LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1、SIRT1、FOXO1表达明显升高(P<0.05),LC3B荧光斑点数显著增加(P<0.05)。小鼠体内实验显示,与CLP组或CLP+LV-NC组相比,CLP+LV-SIRIT1组SIRT1 mRNA表达、BALF中抗炎因子IL-10分泌和造模72 h后小鼠存活率均明显升高(P<0.05),而肺组织病理损伤、BALF中促炎因子TNF-α、IL-6水平显著降低(P<0.05)。结论:过表达SIRT1可在体内外改善脓毒症ALI,而通过SIRT1/FOXO1通路提高自噬水平促进巨噬细胞M2型极化可能是其发挥保护作用的机制之一。

老年糖尿病并发痴呆的危险因素分析

目的:检测老年糖尿病合并痴呆患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)、β淀粉样蛋白(Aβ1-40)及糖尿病临床相关指标的变化。探讨老年糖尿病并发痴呆的危险因素,提高糖尿病、老年痴呆病的预防和诊治,改善老年糖尿病患者的生活质量,延长人类的人均寿命。方法:清晨抽取受试者空腹静脉血测定IGF-1、Aβ1-40及糖尿病临床相关指标。IGF-1、Aβ1-40测定采用酶联免疫法,血糖测定采用葡萄糖氧化酶法,胰岛素测定采用放射免疫法,糖化血红蛋白测定采用高压液相离子交换层析分离法,其他指标由全自动生化仪完成。按HOMA模型计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果:发现老年糖尿病患者并发痴呆与血清IGF-1、Aβ1-40水平、冠心病、高血压、HbA1C、FINS、HOMA-IR等因素有密切关系。结论:以上7个因素是老年糖尿病患者并发痴呆的危险因素。

miR-135b-5p抑制脓毒症引起的小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制

目的:探究miR-135b-5p在小鼠脓毒症(sepsis)引起的急性肺损伤(ALI)模型中的表达水平及其对小鼠肺部炎症反应和细胞焦亡的影响。方法:将C57BL/6小鼠随机分为6组,每组8只,通过盲肠结扎穿刺法(CLP)手术构建CLP诱导的脓毒症小鼠模型:腹腔注射0.1 mg/kg的巴比妥麻醉,腹部纵向切开暴露盲肠,结扎盲肠并用注射器针头进行穿孔,挤出部分肠道内容物后缝合伤口。假手术组(Sham组)开腹后不做任何处理缝合伤口,无CLP手术处理。治疗组分为CLP+NC mimic组,CLP+miR-135b-5p mimic组,CLP+NC mimic+empty vector组,CLP+消皮素D(GSDMD)组,CLP+miR-135b-5p mimic+GSDMD组。治疗组小鼠在CLP手术前一周皮下注射200μl溶解于生理盐水的NC mimic(200 nmol/L),miR-135b-5p mimic(200 nmol/L),empty vector(100 nmol/L),GSDMD vector(100 nmol/L),每天注射1次,连续一周。术后24 h采用二氧化碳窒息法实施安乐死。采用qRT-PCR检测小鼠肺组织样本中miR-135b-5p和GSDMD mRNA的表达水平;苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠肺组织形态和损伤状态;采用5 ml生理盐水冲洗小鼠右肺3次,每次持续约3~5 min,收集肺泡灌洗液(BALF),酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠肺泡灌洗液(BALF)中GSDMD、白介素1β(IL-1β)和白介素18(IL-18)的表达水平;蛋白免疫印迹法检测小鼠肺组织内含NLR家族PYRIN域蛋白3(NLRP3),半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase 1)以及切割后的N-端GSDMD端蛋白结构域(cleaved-GSDMD-N)的表达水平。双荧光素酶报告基因检测系统验证miR-135b-5p与GSDMD的靶向结合关系。结果:与对照组相比,CLP组小鼠肺组织中有大量的炎症细胞浸润,肺泡损伤,细胞间质水肿及肺泡塌陷等病理特征,小鼠肺组织内细胞焦亡相关蛋白(NLRP3,caspase-1和GSDMD)的表达水平明显增加(P<0.01),但miR-135b-5p的表达水平明显下调(P<0.01);与CLP组相比,超表达miR-135b-5p能够明显抑制CLP诱导的小鼠肺组织内细胞焦亡(P<0.01),靶向抑制GSDMD的表达水平(P<0.01);超表达GSDMD能够逆转超表达miR-135b-5p对肺组织细胞焦亡的抑制作用(P<0.01),超表达miR-135b-5p能够通过靶向GSDMD抑制小鼠BALF中IL-1β及IL-18的表达水平(P<0.01)。结论:miR-135b-5p靶向下调GSDMD抑制细胞焦亡,改善脓毒症引起的ALI,为脓毒症诱导的ALI治疗提供了潜在的治疗靶点和理论依据。

重症急性左心衰竭患者治疗中有创机械通气的应用时机探讨

目的探讨重症急性左心衰竭患者早期应用有创机械通气治疗的临床效果。方法对85例重症急性左心衰竭患者进行回顾性分析,采用随机数字表法将85例患者分为观察组和对照组。其中观察组47例,发病即采取气管插管有创机械通气治疗,对照组38例,发病后采用无创通气治疗,如治疗1小时患者症状未见改善,即采用有创机械通气治疗,对比两组治疗效果。结果观察组与对照组治疗即刻动脉血氧分压(PaO_2)、呼吸频率(RR)、心率(HR)、血氧饱和度(SaO_2)测定值差异无显著性(P>0.05);治疗后0.5、1、3小时两组患者的平均PaO_2、RR、HR、SaO_2测定值较本组治疗前均显著好转(P<0.05),其中观察组好转效果均优于对照组(P<0.05);治疗后第3小时观察组平均动脉压(MAP)、pH均显著高于对照组(P<0.05);治疗1小时后,观察组治疗总有效率91.49%,显著高于对照组(P<0.05)。结论早期应用有创通气抢救重症急性左心衰竭患者有利于及时改善患者缺氧及生命体征指标,提高治疗效果。

胰岛素样生长因子1、胰岛素抵抗与前列腺体积的相关性分析

目的探讨胰岛素样生长因子1(Insulin-like growthfactor1,IGF-1)、胰岛素抵抗程度与前列腺体积的相关性。方法收集我院老年病科良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia,BPH)患者90例,根据下尿路症状(lower urinary tract symptoms,LUTS)、国际前列腺症状评分(international prostate symptoms score,IPSS)、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)以及经腹超声前列腺体积测定分为观察组和对照组。观察组有下尿路症状且IPSS为中重度症状并确诊为BPH,对照组没有下尿路症状。收集这些患者的一般资料和生化特征。结果与对照组相比,观察组的空腹血糖(FBG)[(6.29±0.77)vs(4.77±0.33)mmol/L]、空腹胰岛素(FINS)[(12.92±3.81)vs(8.49±2.04)mU/L]、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)[(3.60±1.27)vs(1.89±0.36)]、低密度脂蛋白(LDL-c)[(3.74±0.37)vs(2.05±0.48)mmol/L]水平较高(P<0.05),而IGF-1[(104.63±26.14)vs(169.78±53.70)μg/L]与高密度脂蛋白(HDL-c)[(1.12±0.20)vs(1.75±0.21)mmol/L]水平较低(P<0.01)。结论 IGF-1、胰岛素抵抗与前列腺增生的程度有关,是BPH发生、发展的危险因素。

四逆汤联合血液净化对脓毒症患者心肌损伤标志物及短期预后的影响

目的观察四逆汤联合连续性血液净化(Continuous blood purification,CBP)对脓毒症患者心肌损伤标记物及短期预后的影响。方法选取2020年7月—2021年7月期间河南省中医院收治的120例脓毒症患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为观察组和对照组,每组各60例。两组患者均接受CBP治疗,观察组在此基础上联合应用四逆汤。治疗5 d后,观察比较两组患者治疗前后血清白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-8及肿瘤坏死因子-ɑ(Tumor necrosis factor-ɑ,TNF-ɑ)炎性因子表达水平,血浆N-末端脑钠肽前体(N-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)、血清心型脂肪酸结合蛋白(Heart-type fatty acid-binding protein,H-FABP)及可溶性髓系细胞触发受体-1(Souble triggering receptor expressed on myeloid cells-1,sTREM-1)心肌标记物水平;比较两组患者28 d病死率及分析影响患者28 d病死率的影响因素。结果观察组58例入组,28 d死亡7例,病死率12.07%。对照组55例入组,28 d死亡19例,病死率34.55%。观察组28 d病死率低于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗5 d后两组患者血清IL-6、IL-8、TNF-ɑ、血浆NT-proBNP、血清H-FABP、血清sTREM-1水平均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);且观察组血清IL-6、IL-8、TNF-ɑ、血浆NT-proBNP、血清H-FABP、血清sTREM-1水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox风险回归模型分析显示APACHEⅡ评分(OR=1.968,95%CI=1.207~3.209,P=0.007)、血清IL-6(OR=1.309,95%CI=1.032~1.660,P=0.026)、血浆NT-proBNP(OR=1.907,95%CI=1.221~2.978,P=0.005)、血清H-FABP(OR=2.796,95%CI=1.461~5.351,P=0.002)、血清sTREM-1(OR=2.146,95%CI=1.162~3.963,P=0.015)及四逆汤干预(OR=0.679,95%CI=0.582~0.792,P<0.001)是脓毒症患者死亡的独立影响因素。结论四逆汤联合CBP治疗脓毒症有助于抑制心肌标记物和炎性因子表达,改善短期预后。

健脾补督汤联合美沙拉嗪对缓解期溃疡性结肠炎患者的临床疗效

目的探讨脾补督汤联合美沙拉嗪对缓解期溃疡性结肠炎患者的临床疗效。方法120例患者随机分为对照组和观察组,每组60例,对照组给予美沙拉嗪,观察组在对照组基础上加用健脾补督汤,疗程5周。检测临床疗效、中医证候评分、血清炎症因子(hs-CRP、TNF-α、IL-17、IL-23)、肠道菌群(大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌)、肠黏膜屏障功能指标(D-乳酸、ET、DAO)变化。结果观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组中医证候评分、血清炎症因子、大肠杆菌、肠黏膜屏障功能指标降低(P<0.05),乳酸杆菌、双歧杆菌升高(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。结论健脾补督汤联合美沙拉嗪可改善缓解期溃疡性结肠炎患者临床症状、肠道菌群数量、肠黏膜屏障功能,降低中医证候评分和血清炎症因子水平。

热休克处理骨髓Sca-1^+细胞移植治疗小鼠心肌梗死

背景:近年来的研究发现,干细胞可以直接定向分化为成熟心肌细胞或促进其再生,为心肌梗死治疗提供一种全新的治疗策略,但是细胞移植率低使其向心肌细胞分化和执行心肌修复能力下降。目的:探讨热休克Sca-1^+细胞在小鼠心肌梗死治疗中的作用。方法:磁珠分选骨髓中Sca-1^+细胞,对Sca-1^+细胞进行热休克处理3 h。建立心肌梗死小鼠动物模型,将其随机分为2组,分别经尾静脉注入1 mL热休克Sca-1^+细胞悬液、1 mL非热休克Sca-1^+细胞悬液。移植后检测细胞存活率、小鼠心脏功能恢复情况、心肌细胞凋亡数目、心肌纤维化程度以及左心室HSF、HSP70及miR-34a表达。结果与结论:1热休克Sca-1^+细胞移植组小鼠心脏sry基因表达显著高于非热休克Sca-1^+细胞移植组。2热休克Sca-1^+细胞移植组小鼠射血分数及左心室短轴缩短率显著高于非热休克Sca-1^+细胞移植组,左心室的舒张末期内径以及收缩末期内径显著低于非热休克Sca-1^+细胞移植组。3热休克Sca-1^+细胞移植组小鼠的心脏纤维化程度及心肌细胞凋亡均显著低于非热休克Sca-1^+细胞移植组。4热休克Sca-1^+细胞移植组小鼠左心室HSF和HSP70表达明显高于非热休克Sca-1^+细胞移植组,miR-34a表达明显低于非热休克Sca-1^+细胞移植组。结果表明热休克Sca-1^+细胞移植能够减少心肌细胞凋亡和心肌梗死面积,改善心脏功能。

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌脓毒症患者分离株CRKPⅠ类整合子和插入序列共同区分布

目的分析碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)脓毒症患者分离株Ⅰ类整合子、插入序列共同区(ISCR)分布情况。方法选择2020年1月-2021年1月河南省中医院重症监护病房(ICU)收治的脓毒症患者60例,分离非重复CRKP菌株51株,采用全自动微生物鉴定仪行菌株鉴定和药敏试验,聚合酶链式反应(PCR)检测耐药基因及CRKPⅠ类整合子、ISCR分布情况。结果51株CRKP菌株对碳青霉烯类完全耐药,对β-内酰胺类耐药率>85%,对替加环素和多黏菌素B具有较高敏感性,耐药率分别为9.80%和7.84%;KPC-2基因阳性菌株51株,阳性率为100.00%,SHV基因阳性菌株49株(96.08%),CTX-M9基因阳性菌株36株(70.59%),NDM-1基因阳性菌株6株(11.76%),CTX-M1基因阳性菌株2株(3.92%),未检出VIM、IMP、OXA48及GES阳性菌株;检出Ⅰ类整合子阳性42株(82.35%),其中可变区阳性38株(74.51%),携带耐药基因aadA2和aadA5,检出ISCR阳性5株(9.80%),其中可变区1株,携带耐药基因sul1,检出同时携带Ⅰ类整合子和ISCR菌株3株。结论脓毒症患者分离的51株CRKP菌株均携带KPC-2基因,同时携带其他耐药基因,CRKP菌株中Ⅰ类整合子分布广泛,ISCR分布较少,二者以串联形式存在并可能造成耐药基因在不同CRKP克隆株之间水平传播,从而导致CRKP菌株耐药的复杂性以及多样性。

ICU患者睡眠障碍相关因素调查

目的调查影响重症加强护理病房(ICU)患者睡眠障碍的相关因素。方法选择2018年2月~2019年2月我院320例ICU患者为研究对象,采用匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)调查进行睡眠质量调查,并划分为睡眠障碍组与非睡眠障碍组,调查两组患者疼痛程度、焦虑(SAS)评分、疾病种类等临床特征,采用单因素分析与多因素Logistic回归分析调查ICU患者睡眠障碍的相关因素。结果320例ICU患者中122例存在睡眠障碍;睡眠障碍组与非睡眠障碍组在疼痛程度、SAS评分、合并急性应激障碍(ASD)、夜间治疗、机械通气、年龄存在差异(P<0.05),两组性别、疾病种类无明显差异(P>0.05);Logistic回归分析显示,严重疼痛、SAS评分>50分、合并ASD、夜间治疗是ICU患者睡眠障碍的影响因素。结论ICU患者睡眠质量较差,易出现睡眠障碍,睡眠受到疼痛程度、焦虑情绪、合并ASD、夜间治疗等因素的影响。

动态血糖监测在2型糖尿病中的应用及效果研究

目的评价不同血糖监测方式对2型糖尿病患者的糖尿病知识水平、自我管理水平的影响。方法随机选取2009年11月至2010年3月在郑州大学第一附属医院老年内分泌科住院的80例2型糖尿病（T2DM）患者并随机分为两组，运用动态血糖监测系统（CGMS）组为试验组，应用自我血糖监测（SMBG）组为对照组。结果CGMS与SMBG在提高2型糖尿病患者的糖尿病知识水平、自我管理水平方面比较差异有统计学意义。结论CGMS能更好地反映T2DM患者血糖真实水平，有效提高T2DM患者的糖尿病知识水平及自我管理水平。