肿瘤相关碳水化合物抗原的适配体研究

肿瘤细胞异常的糖基化模式是癌症的标志,在恶性转化和癌症进展中起着至关重要的作用。不同机制导致的肿瘤相关碳水化合物抗原(tumor-associated carbohydrate antigens,TACAs)不仅是临床肿瘤学诊断中公认的生物标志物,也为治疗干预提供了特定的靶点。适配体作为抗体或凝集素的有力替代品,近年来在碳水化合物的识别中展现了潜在的应用价值。本文聚焦于癌症中异常的糖基化改变,综述了目前TACAs识别适配体的开发进展。依据适配体筛选程序中的靶标来源,阐述了针对3种类型靶标,包括糖类分子、蛋白质聚糖表位,以及血清糖类抗原的筛选策略。从筛选方法、性能指标及相关应用性方面对适配体进行了总结,并讨论了当前研究中存在的问题和未来发展方向。

导师的指导能力与基础医学研究生培养质量关系浅析

目的在分析影响导师指导能力因素的基础上,阐述提升导师指导能力所面临的新挑战,探讨提升导师指导能力对于提高研究生培养质量的重要意义。方法结合郑州大学基础医学院在导师遴选及研究生培养工作中的体会进行分析阐述,论证提升导师指导能力对于提高研究生培养质量的必要性。结果通过分析导师的科研水平、管理水平、责任心、基础医学的生源和质量,研究生的科研态度及整体学习氛围等,提出了提升导师指导能力的关键因素,最终对提高研究生培养质量的新途径进行了有益的探索,对河南省高校研究生培养工作提供了参考和借鉴。结论新形势下只有提高导师的遴选和考核标准,同时提高研究生毕业标准,实行淘汰制,才能加强研究生创新能力培养并进一步提高研究生培养质量。

SNF2家族新成员Ercc6l的cDNA克隆与表达分析(英文)

SNF2家族蛋白在基因组复制、修复与表达中具有重要作用 .报道了SNF2家族新成员Ercc6l (excisionrepaircross complementingrodentrepairdeficiency,complementationgroup 6 like)的cDNA克隆、特性与表达分析 .通过表达序列标签 (EST)搜索和组装 ,获得了cDNA全长 4 0 0 2bp的新基因Ercc6l (GenBankAcc .NoAY172 6 88) ,然后通过RT PCR在小鼠胚胎心脏成功克隆了该基因 .Ercc6l在小鼠基因组中由两个外显子和一个内含子组成 ,定位于X染色体 ,最大开放阅读框 (ORF)编码一个含 12 4 0个氨基酸的假定蛋白质 .该假定蛋白质含有SNF2蛋白的 8个保守基序 (SNF2结构域 ) .通过与SNF2家族各亚家族的成员进行多重比对 ,初步确认Ercc6l属于ERCC6亚家族成员 .将Ercc6l编码区克隆到pEGFP C3然后转染HeLa ,3T3和B16细胞 ,融合蛋白主要定位于胞浆 .BLAST搜索检索出 6 9条小鼠EST与Ercc6l同源 ,这些EST主要来自胚胎和肿瘤组织 .对小鼠不同发育时期的多种组织进行RT PCR ,发现Ercc6l在胚胎期强表达 ,出生产后表达显著下调 .

心脏特异新基因Lrrc10的分子克隆与特性分析

采用表达序列标签 (EST)介导的基因克隆和表达谱分析 ,从小鼠心脏克隆了一个心脏特异新基因Lrrc10(GenBankAccNo .AF5 2 7781) .该基因cDNA全长为 14 10bp ,定位于小鼠染色体 10D2 ,在基因组中无内含子 .Lrrc10的最大开放阅读框编码的假想蛋白由 2 74个氨基酸组成 ,含有 7个亮氨酸重复基序 .同源性检索未发现有整体同源性的已知基因 .EST数据库中支持该基因cDNA序列的全部 18条EST均来自小鼠心脏组织 .对小鼠的不同组织cDNA的RT PCR检测证实该基因主要在心脏中强表达 ,在肺低表达 ,而在其他组织中不表达或表达很弱 .

阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元bcl-2、bax基因表达的影响

目的:探讨阿魏酸钠(SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及bcl-2、bax基因表达的影响。方法:采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/LSF预处理后,用50μmol/L SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡,Western blotting及RT-PCR检测bcl-2、bax基因表达。结果:不同剂量SF(10-160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯状"改变;增加bcl-2mRNA及蛋白的表达,降低baxmRNA及蛋白的表达。结论:SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与其增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,增高Bcl-2/Bax的比值有关。

硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响

目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3 mRNA表达变化;Western印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化。结果SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度。随着SNP剂量的增加,NF-κB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/LSNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值。结论SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关。

阿魏酸钠对硝普钠诱导的原代培养海马神经元凋亡的保护作用

目的：探讨阿魏酸钠（sodium ferulate，SF）对NO供体硝普钠（SNP）引起的大鼠海马神经元凋亡保护作用的可能机制。方法：原代培养的大鼠海马神经元，经终浓度为10～160μmol·L^-1的SF预处理6h后，用50μmol-L^-1的SNP处理24h，采用MTT法检测细胞存活率，Hochest 33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡，Western blot及RT-PCR检测bcl-2基因表达。结果：不同浓度SF（10～160μmol·L^-1）预处理6h可显著提高神经元的存活率，减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象；DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变；增加bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结论：SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用，其机制可能与增加抗凋亡基因bcl-2表达有关。

前列腺癌组织中SOD_2的cDNA克隆及其序列分析

目的构建前列腺癌组织中SOD2的cDNA克隆,并进行序列分析。方法从人前列腺癌组织细胞中提取总RNA并逆转录成cD-NA,PCR扩增cDNA片段,将cDNA克隆入载体pGEM-T中构建T-A克隆,对阳性克隆进行序列测定分析。结果在1例前列腺癌组织标本中发现了SOD2基因的两个相连的点突变位点:372nt T→G颠换和373ntG→T颠换。蛋白序列比较分析显示:对应SOD2编码蛋白的第89位氨基酸由亮氨酸变为精氨酸。结论SOD2基因突变在前列腺癌的发生中可能起重要作用。

阿魏酸钠对一氧化碳供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用

目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果不同剂量SF(10～160μmol/mL)预处理海马神经元6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡,提高神经元的存活率;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯子状"改变。结论SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用。

碱性螺旋-环-螺旋转录因子和肌肉增强因子调节心脏发育基因心钠素

目的探讨碱性螺旋-环-螺旋转录因子(dHAND)和肌肉增强因子(MEF2C)调控心脏特异基因心钠素(ANP)表达及其分子机制。方法用脂质体转染HeLa细胞和H9c2细胞,48h后测荧光素酶活性。结果复合转染pcDNA3+dHAND、+MEF2C+ANP的HeLa细胞提取物荧光素酶活性大约是复合转染pcDNA3+ANP的HeLa细胞提取物荧光素酶活性的13倍,差异有显著性(P<0.05),在H9c2细胞中复合转染dHAND与MEF2C可使ANP基因启动子的转录活性提高7倍。结论在HeLa和H9c2细胞中dHAND与MEF2C能协同激活ANP基因的转录。

乙醇对小鼠胚胎脑发育毒性的体外实验研究

目的 探讨乙醇的脑发育毒性及其可能的作用机制。 方法 采用植入后全胚胎培养(whole embryo culture,WEC)和微团培养技术。 结果 全胚胎培养结果显示 ,随着乙醇浓度的增加(1.0 0 ,2 .0 0 ,4.0 0 g/ L) ,胚胎脑畸形率明显上升 ,呈剂量反应关系 ,最常见的脑畸形为脑神经管未闭。中脑细胞微团培养结果表明 ,随着染毒剂量的增加 ,不同浓度乙醇 (1.0 0～ 16.0 0 g/ L )对中脑细胞的增殖和分化有明显的抑制作用 ,呈剂量反应关系 ,ID5 0 (50 %细胞分化抑制浓度 )、IP5 0 (50 %细胞增殖抑制浓度 )分别为 8.89g/ L和 12 .2 1g/ L。

“雨课堂”在医学留学生生物化学实验教学中的应用

目的探索"雨课堂"在医学留学生生物化学实验教学中的应用。方法随机将2017级117名医学留学生分为对照组和雨课堂组。对照组采用传统教学法进行生物化学实验课教学;雨课堂组采用"雨课堂"教学模式进行授课。问卷调查两组学生对教学模式的满意度,统计分析两组学生实验报告单、实验课及理论课成绩的差异。结果雨课堂组学生实验报告成绩、实验课成绩及理论课成绩组均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);雨课堂组学生对教学模式的认可度高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论"雨课堂"教学模式在医学留学生生物化学实验教学中取得了显著的教学效果。

发酵助剂提高枯草杆菌α-淀粉酶活性的研究

以枯草杆菌（ＢａｃｉｌｕｓＳｕｂｔｉｌｉｓＢＦ—７６５８）为实验菌株，采用液体摇瓶发酵，在培养基中添加不同发酵助剂：Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋、Ｆｅ２＋、Ｔｗｅｅｎ—８０及十二烷基磺酸钠（ＳＤＳ）等，研究其对枯草杆菌α－淀粉酶活性的影响。结果表明：Ｎａ＋和Ｔｗｅｅｎ—８０对酶活提高作用明显，其酶活提高率分别为３８％和２４％。