APP/PS1转基因AD小鼠磁共振波谱及行为学的对照观察

目的探讨氢质子磁共振波谱(1H-MRS)成像对APP/PS1转基因AD小鼠代谢变化的显示及其早期诊断价值。方法35只APP/PS1AD小鼠(实验组)和20只同源野生型小鼠(对照组)在6、9月龄时接受Morris水迷宫测试及1H-MRS成像。1H-MRS测量小鼠大脑海马区N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、肌醇(mI)和肌酸(Cr)的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值并进行两样本均数t检验。结果与对照组比较,实验组小鼠6月龄时mI/Cr比值明显升高(t=2.904,P<0.05),NAA/Cr比值明显降低(t=-7.535,P<0.05)。免疫组化检查显示海马区出现Aβ沉积斑块,周围包绕活化的胶质细胞;而行为学差异在9月龄时才有统计学意义(P<0.05),表现为小鼠学习和记忆方面的损害。结论1H-MRS是早期评价AD的高敏感性、高特异性的方法,mI、NAA的变化早于行为学改变。

神经干细胞移植治疗APP／PS1小鼠磁共振波谱及行为学对照研究

目的应用氢质子磁共振波谱（Protonmagneticresonancespectroscopy，1H—MRS）技术及Mor-ris水迷宫（Morriswatermaze，MWM）检测，探讨神经干细胞（NSCs）移植治疗APP／PS1转基因阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）小鼠的效果。方法C57BL／6小鼠NSCs培养、扩增。12月龄APP／PS1转基因AD小鼠（实验组）30只与野生型小鼠（对照组，C组）15只作为实验对象。实验组小鼠随机数字表法分为A、B两组，分别移植NSCs（A组）及PBS（B组）至AD双侧海马CA1区，对照组不作处理。移植前及移植后4周行1H．MRS成像及MWM测试，并与组织病理学结果进行对照研究。结果1H—MRS显示移植前A、B及c组小鼠的NAA／Cr值分别为1．01±0．08、1．03±0．05及1．21±0．05，mI／Cr值分别为0．69＋0．05、0．71±0．06及0．58±0．06，A、B组间差异均无统计学意义（P〉O．05），但均较c组差异有统计学意义（P〈0．05）。移植4周后A组NAA／Cr值升高（1．18±0．09），mI／Cr值降低（0．53±0．04），均较B组相同时点差异有统计学意义（P〈0．05），与c组相比差异无统计学意义（Jp〉0．05）。行为学检测显示移植后A组逃避潜伏期明显缩短，较B组差异有统计学意义（P〈0．05）；移植后A组小鼠平台停留时间[（35．21±5．44）S]、穿越平台次数[（5．75±3．23）次]也较B组明显增加（P〈0．05）。Nissl＇s染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多（P〈0．05）。结论NSCs移植可明显改善AD小鼠的学习、记忆能力，1H—MRS可从功能代谢水平有效的评价NSCs移植治疗AD的效果。

神经干细胞移植治疗APP—PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的1H—MR波谱研究

目的 探讨1 H-MRS评价神经干细胞（NSCs）移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠疗效的应用价值.方法 C57BL/6小鼠NSCs培养、扩增.12月龄的APP-PS1转基因AD小鼠30只随机数字表法等分为A、B2组,分别移植NSCs及磷酸盐缓冲液（PBS）至双侧海马CA1区；正常小鼠15只（野生型）作为对照组（C组）不作处理.应用7.0T高场强MR仪分别在移植前及移植后6周行1 H-MRS,测量海马区N-乙酰天冬氨酸（NAA）、谷氨酸（Glu）、肌醇（mI）、胆碱（Cho）及肌酸（Cr）的峰下面积,分析NAA/Cr、Glu/Cr、mI/Cr及Cho/Cr的变化并与Nissl染色与电镜检查结果进行对照研究.组间各指标的比较采用单因素方差分析.结果 C57BL/6小鼠NSCs培养成功.1HMRS显示移植前A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为0.89 ±0.05、0.88 -±0.04、1.15±0.05,0.40±0.03、0.39±0.03、0.45±0.05,0.67±0.05、0.67±0.05、0.52±0.04,差异有统计学意义（F值分别为148.918、7.529、59.468,P值均＜0.01）.其中A、B2组AD小鼠的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.147、0.006、0.207,P值均＞0.05）,但均较C组差异有统计学意义（t值分别为0.255、0.467、0.171及0.269、0.527、0.151,P值均＜0.05）.移植6周后A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为1.13±0.07、0.86±0.05、1.14±0.05,0.45±0.04、0.38±0.02、0.44±0.03,0.58±0.04、0.67±0.04、0.53±0.04,差异有统计学意义（F值分别为112.092、23.076、44.367,P值均＜0.01）.其中A组NAA/Cr及Glu/Cr值升高,mI/Cr值降低,较B组差异均有统计学意义（t值分别为0.271、0.071、0.089,P值均＜0.05）,与C组相比NAA/Cr及Glu/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.013、0.012,P值均＞0.05）,但mI/Cr值差异有统计学意义（t=0.046,P＜0.05）.各组小鼠Cho/Cr值在移植前后差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.Nissl染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多.电镜显示A组小鼠海马CA1区大部分神经元细胞形态正常,细胞器丰富,而B组AD小鼠神经元细胞明显肿胀,突触联系疏松.结论 1 H-MRS可定量显示APP-PS1转基因AD小鼠NSCs移植前后的脑内代谢变化,对无创性评价NSCs治疗AD的效果具有较大的应用价值.

磁标记神经干细胞在APP／PS1转基因阿尔茨海默病小鼠脑内迁移的MRI研究

目的利用MRI示踪研究超顺磁性氧化铁（SPIO）标记的神经干细胞（NSCs）在APP／PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠脑内的迁移特点。方法培养、扩增C57BL／6小鼠NSCs，制备菲立磁（Feridex）和左旋多聚赖氨酸复合物对NSCs进行标记，透射电镜进行鉴定。取12月龄APP!PSI转基因AD小鼠24只，随机数字表法等分为A、B两组，分别移植磁标记NSCs（A组）和未标记NSCs（B组）至小鼠右侧海马区，相同月龄同窝出生的野生型小鼠12只作为对照组（C组），移植磁标记NSCs。移植后1、2、4及6周分别运用7．0T高场强MR扫描仪对移植的NSCs进行活体示踪，并对照组织病理学检测结果进行对照研究。结果C57BL／6小鼠NSCs培养及扩增成功，透射电镜可见标记细胞胞质内大量含铁颗粒。MRI显示移植后1周，在T，wI及T2＊WI上可见A组小鼠海马区注射点处出现类圆形低信号影，以EWI最明显；移植后2周，观察到低信号沿移植点向周围弥漫扩散，范围逐渐变大；移植后4周，低信号范围更大，几乎遍及整个海马区，但低信号强度减低；移植后6周，MRI显示低信号影基本消失。B组小鼠各时点移植区均无明显的低信号改变。C组小鼠尽管在移植磁标记NSCs后在海马区显示低信号影，但其大小和位置未出现明显的改变。普鲁士蓝染色观察到磁标记NSCs在AD小鼠海马区的迁移在各时点基本上与MR影像相对应。结论NSCs移植到APP／PS1转基因AD小鼠海马区后向周围发生弥散性、不定向迁移，利用MRI技术可以对移植后的磁标记NSCs进行活体示踪。

APP／PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的MR波谱定量分析

目的 利用MRS探讨APP/PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠脑内代谢物的变化及对早期AD的诊断价值.方法 35只APP/PS1双转基因AD小鼠（实验组）和20只野生型小鼠（对照组）分别在3、6、9月龄时采用7.0 T高场强MR仪行1H-MRS,测量小鼠大脑皮质及海马区N-乙酰天冬氨酸（NAA）、肌醇（mI）和肌酸（Cr）的峰下面积,计算NAA/Cr和mI/Cr比值,并与病理结果进行对照.分别以各月龄AD小鼠的NAA/Cr比值的95%可信区间的上限及mI/Cr比值的95%可信区间的下限作为阈值,比较其对AD小鼠的敏感度、特异度和准确度.两组间NAA/Cr和mI/Cr比值的比较采用独立样本t检验.结果 3、6、9月龄AD小鼠的mI/Cr比值分别为0.68±0.03、0.72±0.04、0.77±0.04,对照组分别为0.63±0.04、0.64±0.03、0.64±0.04,两组间差异均有统计学意义（t值分别为2.814、5.146、14.437,P值均〈0.01）,3月龄时ml/Cr比值即明显升高,病理检查显示大脑皮质及海马区出现星形胶质细胞的增生、活化;3、6、9月龄AD小鼠的NAA/Cr比值分别为1.17±0.08、1.04±0.05、0.90±0.05,对照组分别为1.18 ±0.07、1.16 ±0.07、1.18±0.08,3月龄时,两组间差异无统计学意义（t=0.752,P〉0.05）,6、9月龄时两组间差异有统计学意义（t值分别为-8.514、-5.646,P值均〈0.05）,6月龄时NAA/Cr比值明显降低,病理检查显示AB沉积斑块出现.mI诊断3、6及9月龄AD小鼠的敏感度分别为80%（28/35）、84%（26/31）、85%（23/27）;特异度为85%（17/20）、94%（17/18）、100%（16/16）;准确度为82%（45/55）、88%（43/49）、91%（39/43）;NAA诊断6、9月龄AD小鼠的敏感度分别为84%（26/31）、89%（24/27）;特异度为89%（16/18）、100%（16/16）;准确性为86%（42/49）、93%（40/43）.结论 mI、NAA是评价早期AD的高敏感度、高特异度的指标,且mI的变化早于NAA,1H-MRS定量分析为早期AD的诊断提供了重要依据.