桃核承气汤化瘀泻热“性-效”相关物质基础研究

目的研究经典名方桃核承气汤化瘀泻热的“性-效”相关物质基础。方法建立蓄血证大鼠模型,考察桃核承气汤全方(17.29 g/kg)及其药性拆分成分[苦寒组(大黄+芒硝)9.43 g/kg、辛温组(桂枝+桃仁)4.71 g/kg、甘平组(甘草)3.14 g/kg]对大鼠凝血指标(凝血酶原时间、凝血酶原活动度、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原、凝血酶时间、内皮素1)和炎症指标(C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、超氧化物歧化酶)的影响。在确定优势药性组的基础上,采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱法鉴定其成分,进行分子对接并筛选结合能≤-5.0 kcal/mol的成分作为“性-效”相关物质基础。结果桃核承气汤全方和辛温组药材均能显著改善模型大鼠的凝血指标(P<0.05或P<0.01),其全方和苦寒组药材均能显著改善模型大鼠的炎症指标(P<0.05或P<0.01)。辛温组为化瘀优势药性组,苦寒组为泻热优势药性组。分别从辛温组、苦寒组药材中鉴定出32、35个成分;结合能≤-5.0 kcal/mol的辛温组药材成分有10个(脱落酸、羟基酪醇、原花青素B1等),苦寒组药材成分有13个(黄芩素、芦荟大黄素、去甲蟛蜞菊内酯等)。结论桃核承气汤全方有化瘀、泻热的功效,其物质基础分别来自辛温组药材(桂枝、桃仁)和苦寒组药材(大黄、芒硝)。

基于熵权法结合Box-Behnken响应面法优化芍药甘草汤提取工艺

目的:优选芍药甘草汤提取工艺。方法:以没食子酸、芍药内酯苷、芍药苷、甘草酸、异甘草素的提取率与出膏率为评价指标,以熵权法确定各指标的权重系数进行综合评价,在单因素考察的结果上以乙醇浓度、溶剂倍数和提取时间为响应因素,结合Box-Behnken响应面法的结果优选出提取工艺的参数。结果:优化的提取工艺为6倍量的90%乙醇回流提取2次,每次2h。3批验证试验综合评分RSD值小于3%。结论:优选的提取工艺简便稳定,提取效率高,可适用于工业大生产。

《土家族药物志》收载兰科植物药名考证

目的:整理和总结土家族兰科药物的经验叫法,纠正其中不规范的用名,为今后研究和应用土家族药物过程中了解其原植物的科属提供一定指导,并为土家族药名混乱品种整理和植物资源调查指引方向。方法:以权威典籍为依据,对《土家族药物志》中兰科植物的药名和形态进行考证。结果:土家族药物普遍存在同名异物、同物异名和地方习用名交错混乱等现象。结论:研究和应用土家族药物时应通过历代本草进行药名考证和探究其原植物,以保证药用植物名实相符。

芍药甘草汤对急性肺损伤大鼠肠道菌群的影响

目的 研究芍药甘草汤(SGD)对急性肺损伤(ALI)大鼠的改善作用及对肠道菌群的影响。方法 将60只大鼠按随机数字表法分为正常组(CON组,生理盐水)、模型组(MOD组,生理盐水)、阳性对照组(DEX组,5 mg/kg地塞米松)和芍药甘草汤低、中、高剂量组(SGD-L、SGD-M、SGD-H组,给药剂量以生药量计分别为5.8、11.6、23.2 g/kg),每组10只。各组大鼠每天灌胃1次,灌胃体积均为10 mL/kg,连续7 d。末次灌胃30 min后,CON组大鼠气道滴注等体积生理盐水,其余各组大鼠气道滴注脂多糖(5 mg/kg)建立ALI模型。造模12 h后,计算大鼠肺组织湿/干重比,检测大鼠肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,以苏木素-伊红染色后观察肺组织病理形态学变化。采用16S rRNA测序技术分析大鼠粪便中菌群,并分析差异菌属与炎症因子的相关性。结果 与MOD组比较,SGD各剂量组大鼠肺组织炎症细胞浸润均减少,肺泡隔增厚和肺泡水肿情况均有所改善;肺组织湿/干重比及BALF中IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)。SGD(中剂量)可以改善ALI大鼠肠道菌群紊乱,恢复肠道菌群的多样性与丰富度,调节菌群结构,降低乳杆菌属、链球菌属和大肠埃氏菌属-志贺氏菌属的相对丰度,并增加厚壁菌属、毛螺菌属、瘤胃球菌属、梭状芽孢杆菌属、杜氏杆菌属和阿克曼菌属的相对丰度。相关性分析发现,乳杆菌属、链球菌属、大肠埃氏菌属-志贺氏菌属的相对丰度与炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平呈显著正相关(P<0.05或P<0.01);毛螺菌属、杜氏杆菌属、厚壁菌属的相对丰度与上述炎症因子的水平呈显著负相关(P<0.05或P<0.01)。结论 SGD可能通过减轻大鼠肺组织损伤和炎症反应、调节菌群结构来改善ALI。

基于PI3K/Akt信号通路探究当归补血汤干预大鼠实验性脑缺血再灌注损伤的作用机制

目的基于网络药理学结合体内实验探讨当归补血汤对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的干预作用及相关作用机制。方法通过数据库收集当归补血汤中的活性成分及其治疗CIRI的靶点,构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,并进行基因本体(gene ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;通过Auto Dock软件对关键作用靶点与主要活性成分进行分子对接验证。SD大鼠给予尼莫地平或当归补血汤2周后,采用改良Longa线栓法复制大脑中动脉栓塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO/R)模型,对神经行为学进行评分,并测定脑组织梗死面积;采用TUNEL染色法测定脑组织细胞凋亡情况;采用苏木素-伊红(HE)染色法考察脑组织病理变化;采用ELISA测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1β水平;采用qRT-PCR检测脑组织TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达;采用Western blotting检测脑组织蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,p-Akt)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达。结果筛选出当归补血汤30种活性成分,得到当归补血汤治疗CIRI的靶点467个,核心靶点55个。KEGG通路富集分析表明磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/Akt信号通路是当归补血汤抗CIRI的关键机制之一。分子对接显示,当归补血汤中主要活性成分与核心作用靶点中的Akt1、信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)、转录因子AP-1(transcription factor AP-1,JUN)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、细胞肿瘤抗原p53(cellular tumor antigen p53,TP53)、TNF和IL-6等具有较为稳定的结合活性。动物实验结果表明,当归补血汤能够改善CIRI大鼠神经功能损伤(P<0.05);减少脑组织梗死面积(P<0.05、0.01);减轻脑组织病理损伤;降低脑组织细胞凋亡指数(P<0.05、0.01、0.001);降低血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平(P<0.05、0.01);降低脑组织中TNF-α、IL-6和IL-1βmRNA表达(P<0.01、0.001);增加脑组织中Akt的磷酸化水平(P<0.01、0.001)而激活PI3K/Akt信号通路,进一步上调Bcl-2蛋白表达(P<0.05、0.01、0.001),下调Bax蛋白表达(P<0.05、0.001)。结论当归补血汤可能通过作用多靶点及多通路治疗CIRI,其机制与影响Akt1、TNF、IL-6、IL-1β等蛋白的表达进而调控PI3K/Akt信号通路抑制炎症和细胞凋亡有关。