浙江省香椿溃疡病病原菌的分离和鉴定

[目的]分离和鉴定引起浙江省香椿溃疡病的病原菌,揭示香椿溃疡病的病因,为该病害的科学防控提供理论依据。[方法]观察香椿溃疡病的田间症状,使用常规组织分离法分离病原菌,利用形态学结合分子生物学方法对病原菌进行物种鉴定,采用柯赫氏法则验证分离菌株的致病性。[结果]1)从感病香椿样品中分离到2株病原菌;病原菌的培养性状、有性世代和无性世代的形态特征与假毛丛赤壳菌一致。2) LSU rDNA、ITS rDNA和tef1-α基因序列分析以及多基因系统发育分析表明,XCKY2菌株的LSU rDNA、ITS rDNA和tef1-α基因片段与假毛丛赤壳菌的同源性均为100.00%;XCKY1和XCKY2菌株与11株假毛丛赤壳菌聚为一支,贝叶斯后验概率为0.94。3)致病性测定结果表明,假毛丛赤壳菌的菌饼和分生孢子悬浮液均能引起健康香椿苗发病,从发病香椿苗组织中也能再分离到假毛丛赤壳菌,由此确定假毛丛赤壳菌为香椿溃疡病的病原菌。[结论]从浙江省感病香椿样品上分离到2株假毛丛赤壳菌,经鉴定为引起香椿溃疡病的病原菌。本研究首次报道假毛丛赤壳菌是香椿溃疡病病原菌。

笋用林3种竹笋夜蛾多重PCR鉴定技术的建立与应用

【目的】建立鉴定竹笋夜蛾物种的多重PCR技术,用于浙江省笋用竹的3种竹笋夜蛾幼虫的物种鉴定。【方法】针对COI基因的变异区设计物种特异性多重PCR引物;优化影响多重PCR反应的参数,建立鉴定竹笋夜蛾的多重PCR技术;采用标准DNA模板评价多重PCR技术的敏感性和特异性;利用多重PCR技术对林间采集的竹笋夜蛾幼虫进行物种鉴定。【结果】针对3种竹笋夜蛾COI基因的变异区设计了3条物种特异性多重PCR引物,与通用引物LCO1490配合使用,扩增竹笋基夜蛾、竹笋禾夜蛾和笋秀夜蛾COI基因片段,大小分别为290、390和590 bp。优化后的多重PCR鉴定技术的反应体系为:2×HotStart Taq PCR预混试剂10μL,10μmol·L^(-1)的引物LCO1490、JYE290、HYE390和QTYE590各0.5μL,DNA模板1μL,加ddH2O补足20μL。优化后的多重PCR鉴定技术的反应条件为:94℃预变性5 min;94℃变性30 s,59℃退火30 s,72℃延伸30 s;72℃下延伸10 min,循环数为35。多重PCR鉴定技术对笋秀夜蛾的最低检出限为0.01 ng·μL^(-1),对竹笋禾夜蛾和竹笋基夜蛾的最低检出限低于0.001 ng·μL^(-1)。林间样品鉴定结果表明,所有38份DNA都能扩增出明显的特异性条带,鉴定成功率100%;经测序验证,本研究的技术鉴定的物种与经COI基因序列鉴定的物种一致。【结论】研究建立了浙江省笋用竹的夜蛾的多重PCR鉴定技术,能够快速高效鉴定浙江省笋用林内竹笋夜蛾幼虫的物种,该技术具有鉴定周期短、灵敏度高、特异性强、准确度高等优点。

暗影饰皮夜蛾线粒体基因组全序列测定与分析

【目的】对薄壳山核桃Carya illinoensis害虫暗影饰皮夜蛾Garella ruficirra线粒体基因组进行测序和分析,并在基因组水平上探讨其在夜蛾科Noctuidae中的分类地位,为探索夜蛾科昆虫的系统发育关系以及演化进程提供参考。【方法】利用二代测序技术从头组装获取暗影饰皮夜蛾的线粒体基因组,并对线粒体基因组结构特点和碱基组成进行分析;同时,采用最大似然法和贝叶斯法联合构建了夜蛾科5个属、12个种的线粒体基因组系统发育树,分析暗影饰皮夜蛾在夜蛾科中的系统发育地位。【结果】暗影饰皮夜蛾线粒体基因组全长共为15294 bp,其中包括13个蛋白质编码基因、22个转运RNA基因、2个核糖体RNA基因以及鳞翅目Lepidoptera昆虫典型的腺嘌呤(A)+胸腺嘧啶(T),即A+T富含区,该区域的A+T含量为80.53%,具有明显的AT偏向性。暗影饰皮夜蛾的基因排列顺序为trnM-trnI-trnQ,与包括夜蛾科昆虫在内的大多数鳞翅目昆虫基因排列次序相符。13个蛋白质编码基因的起始密码子全部为ATN。22个tRNA基因中除trnS1的DHU臂缺失,其余均为典型的三叶草结构。对线粒体基因组研究发现:夜蛾科5个属之间,Garella与皮夜蛾属Nycteola亲缘关系最近,与饰夜蛾属Pseudoips亲缘关系最远。【结论】暗影饰皮夜蛾的线粒体基因组中出现了基因重排的现象,系统发育关系支持暗影饰皮夜蛾和Garella musculana聚为1个分支。

九龙山自然保护区四种生境土壤的虫生真菌多样性

为明确浙江省九龙山国家级自然保护区不同生境下的土壤虫生真菌多样性及分布特点,给该区域虫生真菌的开发利用及物种多样性提供科学依据,本研究以九龙山自然保护区四种不同生境(茶园、红薯地、人工林、原始林)的土壤为研究材料,通过illumina NovaSeq测序平台测序得到有效数据,分析四种生境下20个土壤样品中的真菌多样性与虫生真菌的群落结构组成,探讨虫生真菌与土壤环境因子的相关性。结果发现:四种生境下林地(原始林、人工林)土壤的虫生真菌相对丰度高于农业用地(茶园、红薯地);四种生境土壤的虫生真菌群落具有显著差异,原始林与人工林中的最优势属是弯颈霉属,茶园与红薯地中的最优势属分别为镰刀菌属和绿僵菌属;该地区土壤碳氮比和全氮水平是影响虫生真菌菌群的极显著环境因子,林地土壤的虫生真菌菌群与土壤碳氮比、全氮水平正相关,农业用地土壤中的虫生真菌群落与土壤全磷、速效磷含量正相关;四种生境土壤虫生真菌相对丰度排行前十的属中,绿僵菌属、棒束孢属、虫草属与土壤碳氮比、全氮水平极显著正相关,镰刀菌属与其极显著负相关。该研究结果表明,九龙山自然保护区虫生真菌种类丰富,生境类型影响虫生真菌的丰富度,林地土壤的虫生真菌相对丰度较高。该地区的优势虫生真菌主要集中于3个属:绿僵菌属、弯颈霉属、镰刀菌属。

竹林金针虫成虫的求偶及交配行为研究

【目的】竹林金针虫是我国南方地区1种重要的竹林地下害虫,研究其成虫求偶及交配行为对于该虫性信息素引诱剂的研发及应用有着重要意义。【方法】利用昆虫夜间行为观测的方法对筛胸梳爪叩甲(Melanotus cribricollis)雌、雄成虫的求偶、交配行为特征及节律进行了研究。【结果】筛胸梳爪叩甲成虫的求偶及交配行为表现出明显的阶段性特征,进入暗期90 min后开始发生求偶和交配行为,求偶和交配行为高峰期集中在21∶30—0∶30之间。出土日龄对成虫求偶节律影响不显著,但交配的比例与虫龄密切相关。成虫出土的当天便可交尾,第3日达到交配高峰,7日后交配结束。【结论】筛胸梳爪叩甲成虫求偶及交配高峰期明显,适合性信息素诱杀或干扰防治。

基于脂质组学的油茶籽油脂质轮廓与功能特性分析

采用液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)脂质组学方法,对油茶籽油的脂质轮廓进行分析,并结合脂质类别功能分析揭示油茶籽油功能特性。油茶籽油中共鉴定出6大类、22亚类、278种脂质单体分子。其中,脂质单体分子的碳链长度主要分布在35~54之间,碳链不饱和度主要分布在2~4之间。脂质含量-功能联合分析结果表明,油茶籽油的甘油酯(GL)种类、甘油三酯(TG)与甘油二酯(DG)的比值、异戊烯醇酯(PR)和固醇酯(ST)等功能脂质成分上比其他常见植物油具有优势,明确油茶籽油具有良好的促进能量消耗、抑制体内脂肪积累以及预防高血压相关疾病等重要功能。

闽鸠蝙蛾(鳞翅目:蝙蝠蛾科)线粒体基因组全序列测定和分析

本研究旨在从线粒体基因组水平探讨闽鸠蝙蛾(Endoclita minanus Yang)在蝙蝠蛾科(Hepialidae)内的分类地位。通过Illumina MiSeq平台测序技术测定闽鸠蝙蛾线粒体基因组全序列,分析其结构特点和碱基组成;使用最大似然法构建蝙蝠蛾科9种昆虫线粒体基因组的系统发育树,分析其在蝙蝠蛾科内的系统发育关系。结果显示:闽鸠蝙蛾线粒体基因组全长15248 bp,包含13个蛋白质编码基因、22个转运RNA基因、2个核糖体RNA基因和一段典型的鳞翅目昆虫线粒体基因组基因排列的A+T富含区,且A+T含量为81.18%。闽鸠蝙蛾的线粒体基因组排列顺序为trnI-trnQ-trnM,与其他蝙蝠蛾科昆虫顺序相同,而与鳞翅目其他昆虫的线粒体基因组排列顺序(trnM-trnI-trnQ)不同。基于线粒体基因组分析,得到蝙蝠蛾科9种昆虫的系统发育关系为无钩蝠蛾属(Ahamus)+{棒蝠蛾属(Napialus)+[蝙蝠蛾属(Endoclita)+钩蝠蛾属(Thitarodes)]}。闽鸠蝙蛾线粒体基因组存在基因重排现象,系统发育分析支持闽鸠蝙蛾和桉蝙蛾聚为一支。本研究为掌握蝙蝠蛾科昆虫的进化规律提供了信息参考,为探究鳞翅目昆虫的系统发育和进化提供了一定的理论依据。

5种竹子对黄脊竹蝗生长发育和取食选择的影响

为明确寄主植物对黄脊竹蝗Ceracris kiangsu生长发育及取食选择的影响,采用毛竹Phyllostachys edulis、苦竹Pleioblastus amarus、大叶箬竹Indocalamus tessellatus、铺地竹Pleioblastus argenteostriatus和靓竹Sasaella glabra f.albostriata单寄主饲养黄脊竹蝗初孵若虫至成虫,分别测定取食5种竹子的黄脊竹蝗1~5龄若虫和成虫的死亡率,若虫的发育历期,成虫的体重和寿命,并测定了黄脊竹蝗不同发育阶段对5种竹子的取食选择。结果表明,黄脊竹蝗1、2龄若虫取食大叶箬竹的死亡率最高;3~5龄若虫取食铺地竹的死亡率最高,尤其是4、5龄若虫死亡率显著高于取食其余4种寄主;成虫期取食5种竹子的死亡率则无显著差异;黄脊竹蝗若虫取食不同竹子的总发育历期存在显著差异,其中取食毛竹的发育历期最短。发育至成虫后,毛竹处理组的黄脊竹蝗雌、雄成虫体重均为最高,靓竹处理组雌虫体重最低,铺地竹处理组雄虫体重最低,两处理组成虫体重均显著小于毛竹处理组;取食5种竹子的黄脊竹蝗雌、雄成虫寿命均无显著差异。取食选择试验结果显示,黄脊竹蝗若虫阶段对不同寄主的取食选择存在显著差异,对毛竹的选择率明显高于其余寄主,但进入成虫期后,对各个寄主取食选择率差异不显著。本研究表明,5种竹子对黄脊竹蝗的死亡率、发育历期、体重及若虫取食选择有显著影响,黄脊竹蝗在5种供试竹子上均能完成生长发育,但在毛竹上的适应性较好,对其个体发育有利。

筛胸梳爪叩甲的防治技术研究

筛胸梳爪叩甲是我国南方地区重要的笋期害虫。研究了林间挖笋除虫、黑光灯诱杀及药剂防治3种方法对筛胸梳爪叩甲的控制效果。结果表明:3种技术措施均能显著降低该虫的危害率和虫口密度,其中药剂防治效果最明显。3 a持续挖笋除虫的防治效果达(22.76±3.90)%;每年单盏黑光灯年平均诱捕量可达(1 143.8±318.7)头,连续6 a的灯光诱杀可将竹笋危害率由防治前的(56.05±2.83)%降至防治后的(39.21±2.83)%;连续施用5%辛硫磷+3%毒死蜱颗粒剂3 a年可将竹笋危害率由防治前的(69.62±5.36)%降至(21.17±7.65)%,防治效果达(70.11±10.99)%。

基于5个数据库的黄脊竹蝗研究进展可视化分析

为深入了解黄脊竹蝗的研究动态和热点,本文利用中国知网、万方数据和维普中文期刊服务平台、CAB abstracts和Web of science^(TM)5个数据库,采用Vosviewer软件对黄脊竹蝗的研究进行了可视化分析。结果表明,关于黄脊竹蝗的文献最早发表于1935年,近10年是相关研究发文量的高峰期。黄脊竹蝗相关文献最主要的媒介是学术期刊,占所有文献的79.38%;《湖南林业科技》是发文量最多的期刊。练佑明、舒金平、王浩杰和蒋国芳等作者发表文章数量名列前茅,练佑明以第一作者发表了11篇中文论文,蒋国芳发表的外文文献最多,这些学者的工作都促进了国际和国内的学术交流。黄脊竹蝗的研究热点与可持续治理高度相关,尤其侧重生物防治和生物学特性。

金针虫调查方法及评价

金针虫是一类重要的地下害虫,其种群数量调查是植物保护工作中的难点之一。文章概述金针虫种群数量调查的3种主要方法:土方抽样、诱饵诱捕及成虫性信息素诱捕。就其调查原理、特点及研究现状进行了介绍,并对各方法的不足及应用前景做了简要分析。

浙江东明山森林公园毛竹林节肢动物的组成和多样性

节肢动物群落结构及其多样性是反映森林生态系统稳定性的重要指标。2005—2007年对浙江东明山森林公园毛竹林节肢动物群落进行了系统调查,共采集到42 439号标本,隶属于17目,126科,511种。结果表明:无论是从种类还是个体数上,均以鳞翅目最为丰富,其次为鞘翅目。毛竹林节肢动物群落多样性呈现明显的季节性变化,在冬季和夏季,相对丰度、Shannon-Wiener多样性指数及Simpson优势集中性指数等指标均有所下降,总体随着季节变化呈现双峰型的变化趋势,高峰期分别出现在每年的6月和9月;从功能集团角度分析,植食性集团无论在物种的种类及个体数上均占有明显优势,其次是天敌集团,中性集团最少。植食性集团中昆虫种类多,但优势物种不突出;中性集团中华按蚊及伊蚊等优势种地位明显;天敌集团中捕食性天敌(蜘蛛和捕食性昆虫)占主导地位。

浙江栉蝠蛾的生物学特性

浙江栉蝠蛾Bipectilus zhejiangensis Wang是我国南方地区重要的竹林地下害虫，其生物学特性尚未见报道。通过林间调查和室内试验对浙江栉蝠蛾危害竹子种类及生物学特性进行较为系统的观察。结果表明，浙江栉蝠蛾危害竹子种类多，主要以刚竹属竹种为主。浙江栉蝠蛾在浙江省1年发生1代，以2～3龄幼虫在土壤中越冬，翌年4月上旬幼虫开始化蛹，5月初成虫开始羽化，羽化主要集中在13：30～18：30之间，羽化当天便可交尾产卵，单雌平均产卵量可达290粒，成虫寿命雌虫平均4．2d，雄虫平均6．2d。卵经70d左右孵化，随即钻入土壤取食，准备越冬。

华山松主要种实害虫种类及发生危害调查

2002-2003年对不同发育期华山松球果的长度、直径及含水率进行了跟踪,并同期对危害华山松球果的种实害虫种类及危害情况进行了调查,共发现害虫7种,隶属于5科5属,主要的有5种。虫害贯穿于华山松球果发育的整个阶段。在种鳞发育期,球果花蝇(Strobilomyiasp.)、球果瘿蚊(Resselillesp.)主要危害1年生华山松球果;微红梢斑螟(Dioryctria rubella)和云南松梢斑螟(D.yuennanella)幼虫在球果快生长期及球果木质化期危害2年生华山松球果。华山松球蚜(Pineus piniarmandii)全年大部分时间均能对华山松球果造成危害,但造成落果较少。华山松球果含水率与华山松主要种实害虫的危害关系密切,种实害虫危害与华山松球果发育基本同步。

华山松球果螟危害对华山松球果及种子品质影响分析

华山松球果螟(D ioryctria rubellaHampson)是华山松球果的重要害虫。通过对健康球果和不同等级受害球果及种子的品质指标测定分析,结果表明:受华山松球果螟危害的球果在出籽率、种子千粒重、饱满率及种子发芽率等品质指标上明显低于健康球果相应的各项指标,华山松球果螟的危害对球果及种子产量和质量的影响十分明显。

华山松球果生命表研究

华山松是我国西南地区重要的造林树种之一,其球果从雌球花到球果木质化完成的整个发育过程中受到多种生物和非生物因素的影响。在云南省楚雄市紫溪山林场采种基地内球果死亡率达到47.6%,先后有败育、虫害、机械损失、冻害和鼠害5种致死因子导致华山松球果的脱落死亡。在5个致死因子中,虫害的致死力最强,致使球果死亡率达27.2%。由于虫害而损失的球果是其它致死因子造成落果总数的1.33倍。在种子园内造成落果的害虫主要有5种,1年生球果发育阶段,以球果花蝇和球果瘿蚊占主导地位;2年生球果发育阶段,微红梢斑螟的危害是造成落果的主要原因。

华山松球果螟幼虫空间分布型研究

应用多个聚集度指标和Iwao ,Talor等的回归分析法对华山松球果螟越冬代幼虫的空间分布型进行了研究 .结果表明 :越冬代幼虫的空间分布型为聚集分布 (云南地区 ) ,聚集的原因是由害虫本身的生物学特性和环境因子共同作用所造成 .在回归分析检验中 ,4种回归模型的拟合效果良好 ,但以La -m模型最优 .

华山松球果螟生物学特性研究

对华山松球果螟的生活史和各虫态的生物学习性进行了描述;在云南楚雄市紫溪山该虫1年发生2代,以老熟幼虫在球果中越冬;成虫多在12∶00～18∶00羽化,求偶及交尾在夜间进行;成虫羽化量受气温和降水的影响;产卵场所具有选择性,卵主要产于2年生球果表面.

华山松球果螟越冬幼虫调查抽样技术研究

华山松球果螟是危害华山松种实的主要害虫.利用华山松不同方位虫口密度与样地虫口密度回归分析确定华山松球果螟越冬幼虫的最适抽样方位为西面,应用Iwao,Talor,m*-v及La-m回归模型确定序贯抽样方程和最适抽样数,并以La-m模型为例制作华山松球果螟越冬幼虫序贯抽样表.

一株绿僵菌的鉴定及其生物学特性

筛胸梳爪叩甲（Melanotus cribricollis）是浙江笋用林内昆虫的优势种群,其幼虫（即金针虫）是笋期主要害虫之一,在湖州市的德清和安吉、杭州市的余杭和临安等重要竹区的早园竹（Phyllostachys praecox）林中,鲜笋带虫率可达62%,种笋受害率更是高达80%以上,严重制约了当地竹产业的健康发展（徐天森,2004）。由于金针虫营地下生活,防治一直是竹笋生产管理的难点。