微小扇头蜱microRNA文库建立及miR-275靶蛋白Vg-2的生物信息学分析

【目的】建立饱血状态雌性微小扇头蜱的microRNA文库,鉴定所含microRNA的种类,分析miR-275靶蛋白Vg-2的二、三级结构,检测其信号肽、跨膜结构域、磷酸化及糖基化位点,预测其优势抗原表位。【方法】以雌性、饱血状态的微小扇头蜱为研究对象,通过高通量测序技术建立其microRNA文库,利用软件miRDP及检索miRBase数据库,鉴定饱血状态雌性微小扇头蜱所含的microRNA种类;运用在线软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL等分析Vg-2蛋白质理化性质,推断其二、三级结构;运用在线软件SignalP 5.0、TMHMM、NetPhos 3.1及NETCGlyc 1.0检测该蛋白的信号肽、跨膜结构域、磷酸化与糖基化位点;利用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL预测Vg-2蛋白的B、T细胞优势抗原表位。【结果】获得成熟的microRNA 383个,其中67个为已被鉴定和注释的microRNA,316个为新发现的microRNA;微小扇头蜱的Vg-2基因序列全长5040 bp,共编码1679个氨基酸;Vg-2蛋白为亲水性酸蛋白,分子大小为189.89 kDa,理论等电点(pI)为6.08,其二级结构以无规则卷曲为主要结构成分,而其三级结构却以β-折叠为主要结构成分;Vg-2蛋白存在268个磷酸位点,20个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域,拥有58个B细胞优势抗原表位和8个T细胞优势抗原表位。【结论】在饱血状态雌性微小扇头蜱体内含有383个microRNA,受miR-275调控的Vg-2蛋白为结构不稳定的亲水性酸蛋白,具有良好的抗原性与免疫源性。

湘西黄牛毛色控制基因MC1R多态性研究

为了将毛色遗传标记作为湘西黄牛杂交组合选择、纯种鉴别、保种选育的科学理论依据,应用PCR-RFLP技术,研究了湘西黄牛黑素皮质素受体1(Melanocortin 1 Receptor,MC1R)基因对其黑毛色和红毛色表型的影响机制。结果表明:湘西黄牛中MC1R基因有三个等位基因(ED、E+、e);隐性的e基因在310处缺失一个碱基G造成移码突变,在468处提前终止翻译,翻译出一个缩短了的失去功能的MC1R蛋白,表现或强或弱的红毛色;E+所对应的是野生型毛色,如黄色、灰色等;湘西黄牛中黄色个体优势等位基因为E,而红色个体优势等位基因为e,e相对E是隐性基因,只有在e等位基因纯合状态下,才表现为红色毛色;E+/e也表现为红色,可能湘西黄牛红色和黄色表型除了有MC1R基因控制外,还有其它基因参与作用。

不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系分析

为了探究不同地区褐黄血蜱的单倍型多态性、遗传分化和种系发育关系,本试验以采自于湖南、河南两省的褐黄血蜱(各10只,共20只)为研究对象,通过PCR扩增其细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(cox1)和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶亚基Ⅳ(nad4)基因序列,对其单倍型多态性(Hd)、遗传分化和种系发育关系进行分析。结果显示,cox 1基因序列(849 bp)包含4个变异位点,5个单倍型(h=5,A1~A5,Hd=0.653),其基因分化系数(Gst)=0.061,遗传分化系数(Fst)=-0.047,基因流(Nm)=-5.625;nad 4基因序列(626 bp)包含3个变异位点,3个单倍型(h=3,B1~B3,Hd=0.363),其Gst=0.004,Fst=0.074,Nm=3.125;cox 1+nad 4基因序列包含7个变异位点,7个单倍型(h=7,C1~C7,Hd=0.768),其Gst=-0.010,Fst=-0.015,Nm=-16.560;在所构建的种系发育树中,20只褐黄血蜱均处于种系发育树的一个分支。结果表明,湖南、河南两省的褐黄血蜱个体之间虽表现出单倍型多态性,但它们之间具有较近的亲缘关系,尚未出现遗传分化。

牛毛色遗传的研究进展

牛的毛色是最引人注目的品种特征之一,牛的毛色主要通过肉眼来区分。通过了解和掌握牛的毛色及其遗传规律可以作为牛品种的标记特征并且初步判定其品种纯度。

猪只打斗的原因及对策

规模化猪场内猪群常发生打斗现象,究其原因有多种多样,应对处理的方法也不尽相同,若处理不当,则会给猪造成伤害,给猪场带来损失。笔者结合自身的临诊经历,总结分析了猪只打斗的原因和防治措施,供养殖户参考。

妊娠母猪不食症的原因及对策

不食症是母猪在怀孕阶段一种常见病症,特别是一些小规模、散养户猪场发病尤为严重。笔者结合自己多年的临诊经历,讲述了该病主要的发病原因和防治方法,供广大养殖户参考。

文徵明、祝允明辑《汉隶韵要》考论

文徵明、祝允明所辑《汉隶韵要》是被吴门潘振付梓刊刻,全书105个韵部,与平水韵基本相符;所辑隶字并非"汉隶",而是文徵明对于"汉隶"的一种阐释版本。

化“圆”为“方”——《广雅丛书》牌记字体设计特征及其地域文化成因探析

由“晚清名臣”张之洞主持刊刻的《广雅丛书》不光是岭南地区最有影响力的古籍文献之一,其牌记字体设计也极有特色。《广雅丛书》牌记字体主要由印学大家黄牧甫设计,风格高古质朴,将晚清篆体的“圆净”转变为“方整”,而孕育这一转变的深层原因是当时的岭南“朴学”。

不同饱血状态草原革蜱与森林革蜱中肠菌群结构的对比与分析

为探明草原革蜱和森林革蜱不同饱血状态下中肠菌群结构的特点,本研究在无菌条件下分别采集饱血、半饱血草原革蜱和森林革蜱中肠内容物,提取细菌总DNA,PCR扩增细菌16S rRNA V3区,变性梯度凝胶电泳(DGGE)后,切取优势条带纯化、克隆和测序,测序结果与GenBank数据库中已知细菌序列进行比对分析。结果显示,在饱血、半饱血草原革蜱和森林革蜱中肠4个肠内容物样品中共检测到巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌、大肠杆菌、嗜吞噬细胞无形体和斑疹伤寒立克次氏体5种细菌,其中半饱血草原革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌和大肠杆菌;饱血草原革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌和嗜吞噬细胞无形体;半饱血森林革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、大肠杆菌和嗜吞噬细胞无形体;饱血森林革蜱中肠内存在的菌种为:巴氏立克次体暂定种、柯克斯体科菌、嗜吞噬细胞无形体和斑疹伤寒立克次氏体;4个样品中的共有菌为巴氏立克次体暂定种。研究结果表明,不同蜱种中肠内菌群的结构随吸血时间的延长而发生变化。本研究将为防治草原革蜱、森林革蜱及相关蜱传病提供科学依据。

一例疑似猪伪狂犬病的诊断与分析

猪伪狂犬病(PR)是由猪伪狂犬病毒(PRV)感染引起的一种重要的传染病,可导致怀孕母猪流产、死胎,仔猪腹泻、呕吐和神经症状等,给我国养猪业造成巨大的经济损失。2019年4月初,怀化市某散养场从外地购入的仔猪爆发疑似PR的疫情,通过临床症状和病理变化观察,结合实验室诊断,发病仔猪确诊为PRV感染。PCR及测序结果表明,引起该次疫情的PRV毒株,其gE基因序列与Genbank收录的PRV中国流行的河南株同源性最高,为99.7%,提示该毒株为变异株。通过对发病猪群紧急免疫PRV基因缺失弱毒疫苗有效地控制了该病的发生,研究对PR的诊断与防控提供借鉴。

一例猪疥螨病诊断与防制

猪疥螨病由疥螨寄生于猪皮肤表面所引发的慢性寄生虫病,导致猪群患部发痒、脱毛和体质消瘦等,该病也感染人,对人畜健康造成巨大的危害。由于该病是慢性寄生虫病,对猪群不易致死,导致养殖户容易忽视对猪疥螨病的防控,使该病在猪场广泛流行。2018年7月,笔者接诊怀化市某规模化猪场猪疥螨病案例,通过对发病猪群进行临床诊断和实验室诊断,最终确诊为猪疥螨病感染,将其诊治过程简要阐述,旨在为该病的防控提供参考。

奶牛结核病的诊断与防制

奶牛结核病为重要的人畜共患的慢性传染病,该病可导致患病奶牛出现肺结核、肠结核和淋巴结核等多种疾病,相关临床症状与发病部位有关,为二类动物疫病,对人畜健康威胁巨大。本文介绍了奶牛结核病流行特点、临床症状,病理变化和诊断防控措施,为养殖户对该病的防制提供参考。

一例猪弓形虫病的诊治与防控

弓形虫病由刚地弓形虫感猪弓形虫病为重要的人畜共患性寄生虫病,不但对我国生猪养殖业造成巨大经济损失,还对养殖户和消费者健康造成潜在威胁。该病可导致母猪流产、死胎,但容易被养殖户忽视,使疫病导致的经济损失加剧。为提高养殖户对该病的防控意识,笔者以近期诊断的一例猪弓形虫病为例,对其临床诊断过程和防控措施进行简要阐述,为养殖户对该病的防控提供参考依据。

一例魏氏梭菌感染仔猪的诊断与防控

魏氏梭菌可感染多种动物,其中包括人类、猪、牛和羊等哺乳动物,是一种常见的可引起仔猪腹泻的肠道菌病原体。该病原体有5个血清型,分别为A、B、C、D和E血清型,其中引发严重临床症状和病死率的血清型主要是A和C型[1]。猪群感染该病后可出现明显的临床症状,不同生长阶段猪群感染该病所出现的临床症状存在较大的差异,其中以仔猪发病最为明显,可出现血痢,且病猪在短时间内死亡,给养殖户造成难以挽回的损失[2]。近期,怀化市某养殖场仔猪群暴发腹泻病,临床以血痢为主,且出现较高的病死率,结合该病的发病特点和诊断结果,最终确诊为魏氏梭菌感染引起的,其诊断及防控过程如下。

怀化市某猪场仔猪破伤风的诊断与治疗

破伤风梭菌为重要的人畜共患性病原,感染仔猪可导致病畜出现破伤风,其临床主要表现为全身性肌肉痉挛和极度兴奋,甚至导致急性死亡。随着饲养管理水平的提高,该病在猪场中较为少见,导致养殖户对其防控意识差。2019年10月初,怀化市某散养场部分初生仔猪突然发病,且死亡率极高,通过对该病进行临床与实验室技术诊断,最终确诊为破伤风杆菌感染引起,经过紧急治疗,部分发病仔猪康复,减少了养殖户的经济损失。

湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及种系发育关系分析

为探究湘西地区吕氏泰勒虫的单倍型多样性及其种系发育关系,以采自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫为研究对象,PCR扩增其核糖体18S rRNA、线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(cox1)基因序列,并分析其单倍型多态性及种系发育关系。结果表明,湘西地区吕氏泰勒虫核糖体18S rRNA基因序列的长度为384 bp,含9个变异位点、7个单倍型(A1—A7),单倍型多样性Hd为0.775;cox1基因序列的长度为1 092 bp,存在2个变异位点、4个单倍型(B1—B4),单倍型多样性Hd为0.625;在18S rRNA+cox1重组的基因序列中,共含有11个变异位点、10个单倍型(C1—C10),单倍型多样性Hd为0.925;其中,A1、A4、B1、B3、B4、C1、C8与C9均为古老单倍型。系统发育分析结果显示,供试的16株羊源吕氏泰勒虫均处于系统发育树的同一分支上。这说明来自于湘西地区的16株羊源吕氏泰勒虫之间尽管存在一定程度的基因变异现象和单倍型多样性,但它们之间存在共同古老的单倍型,表明其个体之间和单倍型之间均具有较近的亲缘关系,未出现遗传分化。

一例泰迪犬巴贝斯虫病的诊治与思考

对一例泰迪犬巴贝斯虫病发病情况、临床症状、实验室诊断和治疗过程进行介绍,旨在提高广大宠物医师对该病的防控意识。

规模化猪场仔猪饲养管理

夏季气温回升正是产仔猪的好季节,而仔猪生长发育情况往往受到诸多因素的影响,特别是近些年来,口蹄疫、猪瘟、伪狂犬病等传染病时刻威胁着仔猪的生命健康。文中探讨如何对仔猪进行科学的饲养管理,以保障仔猪的成活率和生长性能。

丁酸钠替代药物对肉鸡生长性能、免疫反应及组织器官重量的影响

文章旨在评估日粮添加不同水平的丁酸钠替代药物对1~42 d肉鸡生长性能、免疫反应及组织器官相对重量的影响。试验将平均初始体重为(53.05±0.76)g的600只1日龄商品肉仔鸡随机分为4组,每组5个重复,每个重复30只。对照组饲喂基础日粮,药物组在基础日粮中添加25 mg/kg抗菌肽,其他两组分别在基础日粮中添加5和10 mg/kg丁酸钠。结果:与对照组相比,0.5%丁酸钠组42 d肉鸡体重和22~42 d平均日增重分别显著提高2.80%和4.07%(P<0.05)。但0.5%丁酸钠组22~42 d和1~42 d料重比较对照组和药物组分别显著降低5.78%、6.86%和3.85%、5.06%(P<0.05)。0.5%和1.0%丁酸钠组42 d肉鸡新城疫和绵羊红细胞抗体滴度显著高于对照组和药物组(P<0.05)。0.5%和1%丁酸钠组21 d肉鸡法氏囊和胸腺相对重量及42 d肉鸡脾脏和胸腺相对重量显著高于对照组(P<0.05)。结论:在本研究条件下,日粮添加丁酸钠可以提高42 d肉鸡新城疫和绵羊红细胞抗体滴度,改善免疫器官相对重量,其中丁酸钠添加水平为0.5%时可以显著改善1~42 d肉鸡的饲料效率。

高职院校农技特岗生入学教育与管理实践——以怀化职业技术学院2019级畜牧兽医农技特岗班为例

湖南省根据乡镇农技推广机构人员编制、年龄结构等状况,逐步推进基层农技特岗人员定向培养工作,决定自2019年起用4年时间培养2500人。怀化职业技术学院做为湖南省首批农技特岗生定向培养单位,承担了畜牧兽医、现代农业两个专业的特岗生培养工作。从班主任角度,介绍了该校2019级畜牧兽医农技特岗班的入学教育和日常管理工作,供广大读者参考。