生长干部学员体能补差训练方法探究

强健的体魄是保证军队院校生长干部学员完成实战化训练任务的基础,训练中由于诺多原因造成学员体能储备不足,认真抓好体能补差训练已成为基层最迫切需要解决好工作之一,体能补差训练作为增强学员体能素质的重要手段,训练中可通过耐力补差训练、力量补差训练、爆发力补差训练、灵敏度训练、器械训练等方法途径提升补差训练的效果,同时积极做好放松活动,确保学员快速恢复,减少训练伤,同时提高学员部队第一任职需要,提高组训能力。

miR-216b对顺铂耐药胃癌细胞生物学行为的影响

目的探讨miR-216b对顺铂耐药的胃癌细胞增殖和凋亡的作用及可能机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测人胃黏膜细胞系GES-1、人胃癌细胞系SGC7901和胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DDP的miR-216b相对表达量,采用Western blot法检测3种细胞ATG5蛋白相对表达量。SGC7901/DDP细胞加入不同浓度顺铂,采用CCK-8实验检测顺铂对细胞的半数抑制浓度,确定顺铂在后续实验中浓度。对数生长期SGC7901/DDP细胞随机分为空白对照组(正常培养)、agomir-NC组(转染agomir-NC)、agomir-miR-216b组(转染agomic-miR-216b)、antagomir-NC组(转染antagomir-NC)和antagomir-miR-216b组(转染antagomir-miR-216b),采用实时荧光定量PCR法检测5组细胞miR-216b相对表达量,采用Western blot法检测5组细胞LC3Ⅱ、LC3Ⅰ、ATG5、P62蛋白相对表达量,采用CCK-8实验检测5组细胞活力,采用克隆形成实验检测5组细胞克隆细胞数,采用流式细胞术检测5组细胞凋亡率。采用荧光素酶报告实验检测miR-216b与ATG5的靶向结合。对数生长期SGC7901/DDP细胞随机分为agomir-NC+oe-NC组(转染agomir-NC和oe-NC)、agomir-MiR-216b+oe-NC组(转染agomir-miR-216b和oe-NC)和agomir-miR-216b+oe-ATG5组(转染agomir-miR-216b和oe-ATG5),采用实时荧光定量PCR法检测miR-216b相对表达量,采用Western blot法检测细胞ATG5蛋白相对表达量。结果SGC7901/DDP细胞miR-216b相对表达量(0.26±0.04)低于SGC7901细胞(0.49±0.06)和GES-1细胞(1.00±0.05)(P<0.05),SGC7901细胞低于GES-1细胞(P<0.05);SGC7901/DDP细胞ATG5相对表达量(0.76±0.03)高于SGC7901细胞(0.47±0.03)和GES-1细胞(0.18±0.02)(P<0.05),SGC7901细胞高于GES-1细胞(P<0.05);顺铂对SGC7901/DDP细胞的半数抑制浓度为7.998μmol/L,顺铂在后续实验中使用浓度为8μmol/L;agomir-miR-216b组细胞miR-216b相对表达量(2.43±0.14)、细胞凋亡率[(28.37±1.61)%]和P62蛋白相对表达量(0.43±0.02)高于agomir-NC组[1.02±0.05、(14.34±0.97)%、0.23±0.03](P<0.05),细胞活力[(25.20±2.75)%]、克隆细胞数[(49.33±5.51)个]、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(0.22±0.02)和ATG5蛋白相对表达量(0.17±0.01)低于agomir-NC组[(51.39±3.05)%、(119.33±4.51)个、0.38±0.02、0.33±0.02](P<0.05);antagomir-miR-216b组细胞miR-216b相对表达量(0.33±0.02)、细胞凋亡率[(8.77±1.12)%]和P62蛋白相对表达量(0.12±0.02)低于antagomir-NC组[0.99±0.05、(14.40±1.06)%、0.22±0.01](P<0.05),细胞活力[(77.34±3.97)%]、克隆细胞数[(166.67±6.51)个]、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(1.84±0.07)和ATG5蛋白相对表达量(0.83±0.04)高于antagomir-NC组[(49.25±4.00)%、(116.00±4.58)个、0.36±0.02、0.34±0.02](P<0.05);空白对照组、agomir-NC组、antagomir-NC组组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。miR-216b靶向调控ATG5。agomir-miR-216b+oe-NC组和agomir-miR-216b+oe-ATG5组细胞miR-216b相对表达量高于agomir-NC+oe-NC组(P<0.05),agomir-miR-216b+oe-NC组与agomir-miR-216b+oe-ATG5组比较差异无统计学意义(P>0.05);agomir-miR-216b+oe-NC组细胞ATG5蛋白相对表达量低于agomir-NC+oe-NC组和agomir-miR-216b+oe-ATG5组(P<0.05),agomir-miR-216b+oe-ATG5组低于agomir-NC+oe-NC组(P<0.05)。结论miR-216b可能通过靶向ATG5抑制自噬,促进细胞凋亡并抑制增殖,增加胃癌细胞对顺铂的敏感性。

miRNA-216b通过靶向调控Beclin1对顺铂诱导的胃癌细胞自噬及凋亡的影响

目的:探究miRNA-216b(miR-216b)对顺铂处理的胃癌细胞的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人胃黏膜细胞系GES-1、人胃癌细胞系SGC7901和胃癌顺铂耐药细胞系SGC7901/DDP,将SGC7901/DDP细胞随机分为空白对照组、agomir-NC+oe-NC组、agomir-miR-216b+oe-NC组、agomir-miR-216b+oe-Beclin1组,按照分组进行细胞转染,荧光素酶报告实验检测miR-216b与Beclin1的靶向结合;qPCR检测细胞miR-216b的表达;Western blot检测细胞Beclin1、LC3、p62、Bax和Bcl-2蛋白表达;CCK-8检测细胞活力;克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果:与GES-1组比较,SGC7901组细胞中miR-216b的表达显著降低(P<0.05),Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05);与SGC7901组比较,SGC7901/DDP组细胞中miR-216b的表达显著降低(P<0.05),Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.05)。miR-216b靶向调控Beclin-1,与空白对照组比较,agomir-NC+oe-NC组SGC7901/DDP细胞中各指标差异无统计学意义;与agomir-NC+oe-NC组比较,agomir-miR-216b+oe-NC组SGC7901/DDP细胞中miR-216b的表达显著升高(P<0.05),Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),细胞活力和克隆数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和p62蛋白表达显著升高(P<0.05);与agomir-miR-216b+oe-NC组比较,agomir-miR-216b+oe-Beclin1组SGC7901/DDP细胞中Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.05),细胞活力和克隆数显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、Bax和p62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:miR-216b通过靶向调控Beclin1抑制自噬并促进凋亡,增加SGC7901/DDP细胞顺铂敏感性。