AR-V7对前列腺癌细胞增长及Akt/mTOR信号通路的影响

目的探讨雄激素受体剪接变异体7(androgen receptor splice variant-7,AR-V7)对前列腺癌(PCA)细胞的生长作用及与PI3K/AKT信号通路的相关性。方法构建pIRES2-EGFP-AR-V7重组质粒并转染人PCA细胞(prostate cancer-3,PC-3)为AR-V7重组载体组,用pIRES2-EGFP空载质粒转染PC-3为空载对照组,正常培养的PC-3为空白对照组,应用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(western blot,WB)验证AR-V7基因及蛋白表达水平。用CCK-8细胞计数法及流式细胞仪比较各组细胞的增殖及凋亡差异,用qRT-PCR比较组间Akt、mTOR基因表达水平,用WB比较组间Akt、p-Akt、mTOR及p-mTOR的蛋白表达水平。结果AR-V7重组载体组AR-V7基因及蛋白表达水平明显高于空载对照组和空白对照组(P<0.05)。AR-V7重组载体组细胞增殖活性明显高于空载对照组和空白对照组(P<0.01)。各组细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),各组Akt、mTOR基因及蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。ARV7重组载体组p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显低于空载对照组和空白对照组(P<0.05)。结论AR-V7对前列腺癌细胞增殖有促进作用,对Akt、mTOR基因及蛋白表达无影响,但可以抑制p-Akt及p-mTOR蛋白表达。