PLOD1在口腔鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其意义

目的:探讨前胶原赖氨酸,2-酮戊二酸5-双加氧酶1(PLOD1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织和细胞中的表达及其对OSCC细胞生物学行为的影响,阐明PLOD1作为OSCC预后标志物的潜力。方法:采用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库、基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库和Kaplan-Meier Plotter数据库分析头颈部鳞状细胞癌(HNSC)组织中PLOD1 mRMA表达水平及其与HNSC患者生存期的关联。免疫组织化学法检测110例OSCC组织和64例癌旁组织中PLOD1蛋白表达情况,分析其与OSCC患者临床病理特征和预后的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)评估PLOD1在OSCC诊断中的价值。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法检测人正常口腔上皮HOK细胞和OSCC SCC15和CAL27细胞中PLOD1 mRNA和蛋白表达水平。利用脂质体法将小干扰RNA(siRNA)片段转染至SCC15细胞,分为si-NC组(转染阴性对照si-NC)和si-PLOD1组(转染si-PLOD1),采用CCK-8法、细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测2组细胞增殖活性、划痕愈合率和侵袭细胞数。结果:公共数据库分析,HNSC组织中PLOD1 mRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.05);与PLOD1低表达组比较,PLOD1高表达组HNSC患者生存期较短(HR=1.41,P=0.018)。PLOD1蛋白主要表达于OSCC细胞的细胞质中,OSCC组织中PLOD1表达强度高于癌旁组织(P<0.01),并与OSCC患者T分期和TNM分期有关(P=0.021,P=0.004)。PLOD1诊断OSCC的AUC为0.811,特异度和灵敏度分别63.64%和90.63%。Kaplan-Meier生存分析,与PLOD1低表达组比较,PLOD1高表达组OSCC患者生存率降低(P<0.01);COX回归分析,PLOD1高表达是影响OSCC预后的独立危险因素(P=0.012)。OSCC细胞中PLOD1 mRNA和蛋白表达水平高于HOK细胞(P<0.05)。与si-NC组比较,si-PLOD1组细胞增殖活性和划痕愈合率降低(P<0.05),侵袭细胞数减少(P<0.01)。结论:PLOD1在OSCC组织和细胞中高表达,沉默PLOD1表达可抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。PLOD1可能是OSCC新的治疗靶点和预后标志物。

CD155在口腔鳞癌组织中的表达及对细胞迁移、增殖和侵袭的影响

目的探索口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中脊髓灰质炎病毒受体(CD155)的表达及临床意义,探讨CD155对OSCC细胞迁移、增殖和侵袭的影响。方法使用免疫组织化学法(IHC)验证OSCC组织中CD155的表达,χ^(2)检验,COX回归分析CD155的表达与OSCC患者临床病理特征和预后的关系。通过蛋白免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)验证CD155在OSCC细胞系中的转录水平。转染CD155干扰RNA后,通过体外细胞实验验证CD155对人舌鳞癌SCC15细胞的生物行为功能的影响。结果CD155在OSCC组织中主要表达于细胞膜,与癌旁正常组织相比表达显著升高(χ^(2)=50.750,P<0.0001);在Ⅲ+Ⅳ期(χ^(2)=25.488,P=0.001)、中低分化(χ^(2)=6.299,P=0.012)及T3+T4浸润深度(χ^(2)=23.820,P=0.001)、有淋巴结转移(χ^(2)=7.830,P=0.005)的患者中CD155的高表达率较高;高表达CD155与患者生存期较短有关(P<0.05);单因素和多因素COX回归分析显示:淋巴结转移是影响OSCC患者生存期较短的独立影响因素(P<0.05)。OSCC细胞中CD155蛋白表达及mRNA转录水平显著上调(P<0.05)。在转染siRNA-CD155的SCC15细胞中,实验组的增殖、迁移和侵袭能力显著低于对照组(P<0.05)。结论CD155在OSCC患者癌组织中表达较高,与患者预后不良相关;干扰CD155表达可对OSCC细胞生物学功能产生影响,抑制细胞增殖、迁移和侵袭的能力。