建立小鼠学习记忆损伤模型的方法学研究

目的通过避暗和Morris水迷宫实验研究建立小鼠学习记忆损伤模型的有效方法。方法分别在小鼠避暗电击训练之前20 min腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg体质量,电击训练结束之后立即皮下注射亚硝酸钠90 mg/kg和下次电击测试之前15 min给小鼠灌服35%乙醇0.1 mL/10 g,建立记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍模型,测定各组小鼠在电击训练后6 h、24 h、30 h、48 h后的避暗潜伏期、错误次数和探头次数等多项指标,评价三种记忆障碍模型方法各指标的敏感性和最适测试时间。小鼠分别腹腔注射东莨菪碱1 mg/kg和灌服35%乙醇0.1 mL/10 g造成学习记忆损伤,通过Morris水迷宫定位航行试验和空间探索试验用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力,建立空间学习记忆障碍小鼠模型的评价方法。结果避暗实验显示:和空白组比较,东莨菪碱造成记忆获得障碍模型小鼠在电击训练之后6 h、24 h避暗潜伏期明显缩短,错误次数也明显增多(P<0.01、P<0.05);亚硝酸钠造成记忆巩固障碍模型小鼠在电击训练之后30 h、48 h避暗潜伏期明显缩短,错误次数明显增多(P<0.01、P<0.05);乙醇造成的记忆再现障碍模型小鼠在电击训练24 h后即在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇,可见小鼠避暗潜伏期明显缩短,错误次数明显增多(P<0.05、P<0.01)。和空白组比较,三种药物造成的记忆损伤模型小鼠探头次数均在30 h、48 h增加(P<0.01)。Morris水迷宫实验显示:与空白组相比,东莨菪碱小鼠模型组定位航行逃避潜伏期明显延长而主动探索穿越平台的次数明显减少(P<0.01或P<0.05);乙醇模型组无明显差异(P>0.05)。结论避暗实验中使用东莨菪碱、亚硝酸钠构建小鼠记忆获得障碍和记忆巩固模型时应在造模后24 h和30 h检测相应指标;乙醇造成的记忆再现障碍模型,应在电击训练24 h后,在下次测试之前15 min给小鼠灌服乙醇后检测,指标以避暗潜伏期、错误次数和探头次数为宜。Morris水迷宫实验提示东莨菪碱能够损害小鼠空间学习记忆,可以作为构建小鼠空间学习记忆障碍模型的药物,乙醇并不能建立小鼠的空间记忆障碍模型。