氧化应激对体外神经元一氧化氮释放量的影响

目的 :探讨氧化应激对神经元产生一氧化氮 (NO)的影响及其NO对神经元的作用机理。方法 :对分离培养的新生SD大鼠大脑皮质神经细胞分别进行缺氧、低浓度H2 O2 、缺氧 +超氧化物歧化酶 (SOD)和H2 O2 +SOD处理 ,用比色法检测培养上清液中NO、丙二醛 (MDA)含量和乳酸脱氢酶 (LDH)、SOD活性。结果 :与对照组比较 ,缺氧组和H2 O2 组的NO、LDH、MDA含量均显著高于对照组 ,SOD活性显著低于对照组 ,NO含量与SOD活性变化呈负相关。预先给予终浓度为 2 0 0× 10 3 U/L的SOD ,然后再对分离培养的神经细胞进行缺氧、低浓度H2 O2 处理 ,可使神经细胞的NO、LDH和MDA释放量明显减少 ,各组间NO含量与LDH、MDA含量呈正相关。结论 :氧化应激使神经元NO产生增多 ,NO与氧自由基对神经细胞的损伤有联同作用。

脑创伤后脑微血管扫描电镜观察及临床意义

目的探讨急性颅脑损伤后扫描电镜下脑微血管形态学改变 ,为脑损伤后继发性损害提供微循环基础。方法制作大鼠液压冲击脑损伤模型 ,复合甲基丙烯酸甲酯脑微血管铸型 ,50 %盐酸腐蚀脑组织 ,制作脑微血管标本 ,扫描电镜观察正常大鼠脑微血管和急性脑损伤后3、12、48、72h脑微血管形态学的改变。结果对照组脑内有较稠密的微血管 ,分布均匀 ,外形规则、平滑 ,粗细均匀 ,行走弯曲自然。脑损伤后3h观察到小动脉行走僵硬 ,毛细血管充盈差 ,吻合减少 ,行走过度弯曲或形成盲端。24h和48h的血管有较多的渗出 ,铸型剂聚集或囊性扩张。结论急性颅脑损伤后脑微血管功能失调是导致加重继发性脑缺血缺氧的重要原因。

急性颅脑损伤脑微血管形态学改变的实验研究

目的探讨急性颅脑损伤后脑微血管形态学改变。方法制作大鼠液压冲击脑损伤模型 ,脑微血管墨汁灌注 ,制作切片透明标本 ,利用Mias -2000图像分析系统测定微血管直径和面积密度。制备扫描电镜脑组织标本 ,观察微血管形态学的改变。结果扫描电镜观察有小血管破裂红细胞漏出 ,部分血管扭曲 ,有些区域出现无血管区。受伤48h和72h ,微血管内有微血栓形成 ,周围组织间隙增宽。图像分析示脑外伤后3h微血管的直径和血管面积密度均较对照组降低 (P<0.01)。受伤12h后 ,微血管直径均较对照组增加 (P<0.01) ,但血管面积密度仍较正常低 (P<0 .05)。

低氧和氧化应激中NO介导培养神经元损伤机理的实验研究

目的 探讨低氧、氧化应激中一氧化氮（ NO）和氧自由基之间关系及其对培养神经元的损伤机理。方法 对培养的新生大鼠神经细胞分别进行低氧、 H_2O_2氧化应激处理和超氧化物歧化酶（ SOD）抗氧化应激处理，用比色法等检测培养上清液中 NO、丙二醛（ MDA）、乳酸脱氢酶（ LDH）和 SOD含量变化指标。结果 与对照组比较，低氧组和 H_2O_2组的 NO、 LDH、 MDA含量均显著增高， SOD含量显著降低， NO与 SOD含量变化呈负相关关系。预先给予终浓度为 200U/ml的 SOD处理，可使神经细胞的 NO、 LDH和 MDA释放量明显减少。各组间 NO含量与 LDH、 MDA含量呈正相关关系。结论 低氧、氧化应激促使神经元 NO产生增多， NO有增加氧自由基对神经细胞的损伤作用。 SOD具有清除氧自由基和减轻 NO对神经元的损伤作用。

热休克对氧化应激神经元产生NO的影响

目的 揭示脑在氧化应激状态下一氧化氮 (NO)产生增多对神经细胞的毒性作用和热休克减少NO的产生对神经细胞的保护作用机制。方法 对培养大鼠脑皮质神经元分别进行缺氧、H2 O2 、热休克 +缺氧和热休克+H2 O2 处理 ;检测丙二醛 (MDA)、超氧化物歧化酶 (SOD)、NO和乳酸脱氢酶 (LDH) ,并分析它们的变化和相互关系。结果 缺氧组和H2 O2 处理组MDA和NO产生明显增加 ,SOD活性降低 ,反映神经细胞受损指标LDH也明显增加 (P 均 <0 .0 1) ,对神经细胞在进行缺氧和H2 O2 作用前先进行热休克处理能明显降低NO含量 ,分别与缺氧组和H2 O2 组比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1) ,神经细胞受损程度也减轻。结论 在氧化应激条件下神经细胞NO产生增加并引起毒性作用 ,热休克能减少氧化应激时神经细胞NO的产生。

颅脑创伤后缺氧诱导因子-1α表达及其对细胞凋亡的调控作用

目的 探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)在颅脑创伤后的表达及其对细胞凋亡的调控作用。方法 制作液压冲击大鼠脑创伤模型 3 0只 ,采用免疫组织化学方法 (SP法 )测定脑损伤后3、12、2 4、48、72h脑细胞HIF 1α蛋白表达、末端脱氧核苷酸介导的X dUTP缺口末端标记法(TUNEL)测定细胞凋亡、并用免疫组织化学和TUNEL双重标记法研究脑细胞HIF 1α表达与细胞凋亡的相互关系。结果 对照组 ,有少量细胞轻度HIF 1α和TUNEL阳性表达 ,在脑挫伤区和伤灶周围水肿区均出现较多的细胞HIF 1α阳性表达 ,48h达高峰 ,受伤 3h有少量散在TUNEL阳性细胞 ,48h达高峰 ;双重标记法得出 ,在挫伤区和周围水肿区 ,3h后有逐渐增多的HIF 1α阳性细胞 ,在HIF 1α阳性表达较多区域TUNEL阳性表达也增多 (两者相关系数r =0 .62 ) ,个别细胞还有HIF 1α和TUNEL同时表达。结论 颅脑创伤后继发性脑组织缺血缺氧可引起细胞凋亡 ,HIF 1α对细胞凋亡有促进作用。