清宣醒鼻法对儿童变应性鼻炎转录组学的影响

目的 探讨清宣醒鼻法对儿童变应性鼻炎(AR)转录组学的影响。方法 纳入福建中医药大学附属人民医院儿科AR患儿20例,采用醒鼻宣窍汤内服配合醒鼻凝胶滴鼻剂滴鼻治疗4周,每隔1周进行AR症状评分以评估疗效,治疗前后收集血液标本进行转录组测序(RNA-seq),筛选有差异的mRNA、lncRNA、cirRNA,再进一步扩大样本进行qPCR定量验证。结果 筛选出3 776个差异mRNA,上调基因1 918个,下调基因1 858个;筛选出541个差异lncRNA,上调基因244个,下调基因297个;筛选出683个差异cirRNA,上调基因337个,下调基因346个。qPCR验证结果显示,治疗后Akt1、BCL2L1、CD36、EP300、PSMA3、PSMD6、SNW1及TLE4等基因表达水平较治疗前明显下降(P<0.05),HDAC11、MAPK1、MYC及TLR1等基因表达水平较治疗前明显升高(P<0.05)。结论 Akt1、BCL2L1、CD36、EP300、HDAC11、MAPK1、MYC、PSMA3、PSMD6、SNW1、TLE4及TLR1等基因可能参与AR的慢性炎症反应,并且可能成为清宣醒鼻法治疗AR患儿的药物作用关键靶点。

疏风醒鼻法对风邪犯肺型变应性鼻炎儿童Th1/Th2免疫平衡的影响

目的研究疏风醒鼻法对风邪犯肺型变应性鼻炎(AR)儿童Th1/Th2免疫平衡的影响。方法采用随机数字表法将54例AR患儿分为中药组和西药组各27例,同时招募30例健康体检儿童为健康组。健康组不做任何干预,西药组予内服盐酸西替利嗪片联合外用糠酸莫米松鼻喷雾剂治疗,中药组予内服疏风醒鼻方联合外用醒鼻凝胶滴鼻剂治疗,疗程均为4周。检测3组治疗前后血清白细胞介素-33(IL-33)、白细胞介素-25(IL-25)、卵清蛋白特异性IgE(OVA IgE)含量;观察中药组和西药组治疗前后症状体征评分,并比较其疗效。结果与健康组比较,西药组和中药组治疗前血清IL-33、IL-25、OVA IgE含量均明显提高(P<0.05);与治疗前比较,西药组和中药组治疗后血清IL-33、IL-25、OVA IgE含量和症状体征评分均明显降低(P<0.05)。中药组和西药组疗效比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏风醒鼻法可明显改善风邪犯肺型AR儿童临床症状,其机制可能与调节Th1/Th2免疫平衡有关。

郑健从“风饮伏肺”论治儿童变应性鼻炎经验

郑健教授认为,风饮伏肺是儿童变应性鼻炎的关键病机,疏风化饮法是重要的治疗方法。治疗上采取分期论治的方法,发作期以疏风醒鼻为主,辅以醒脾化饮,临证选用疏风醒鼻方加减治疗;缓解期以益气固表为主,辅以疏风化饮,常选用玉屏风散或黄芪桂枝五物汤为基础方加减治疗。并附验案1则加以佐证。

肾康灵对慢性肾脏病小鼠肾损伤和自噬水平的影响

目的观察肾康灵对慢性肾脏病(CKD)小鼠肾功能和肾脏自噬水平的影响,探讨其对CKD肾损伤的保护机制。方法24只C56BL/6小鼠随机分为正常组、模型组和肾康灵组,每组8只。腺嘌呤诱导法复制CKD小鼠模型,肾康灵组予肾康灵药液(1.5 g/kg)灌胃,连续28 d。生化分析仪检测小鼠血尿素氮和血肌酐含量,HE染色、Masson染色和糖原PAS染色观察小鼠肾组织病理形态,透射电镜观察小鼠肾组织超微结构和自噬体变化,Western blot检测小鼠肾组织自噬相关蛋白p62、Beclin 1、Atg5和LC3B表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肾脏萎缩,肾质量明显降低(P<0.01),血尿素氮和血肌酐含量显著增加(P<0.01),肾组织纤维化病变明显,Beclin 1、Atg5蛋白表达和LC3BⅡ/LC3BⅠ比值显著升高,p62蛋白表达显著下降(P<0.01);与模型组比较,肾康灵组小鼠肾质量增加(P<0.05),血尿素氮和血肌酐含量明显减少(P<0.05,P<0.01),肾组织病理变化减轻,Beclin 1、Atg5蛋白表达和LC3BⅡ/LC3BⅠ明显降低,p62蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论肾康灵可能通过调控自噬改善CKD肾损伤,从而延缓CKD进展。

肾康灵调控系膜细胞炎性反应因子的机制研究

目的:观察氧化低密度脂蛋白(Oxidized Low-Density Lipoprotein,ox-LDL)对系膜细胞(Mesangial Cells,MCs)分泌炎性反应递质功能的影响,并从细胞分子生物学水平阐明肾康灵的作用机制。方法:采用肾康灵干预增殖的系膜细胞,并利用分子生物学技术检测CXCL16、CD36、IFN-γ、IL6、TNF-α含量或基因水平。结果:利用ox-LDL诱导大鼠系膜细胞增殖并加入CXCR6受体后,CXCL16、CD36、IFN-γ、IL6、TNF-α的含量或基因水平显著升高,肾康灵呈浓度依赖性降低其表达水平。结论:ox-LDL诱导系膜细胞增殖时通过CXCR6介导,可促进CXCL16、CD36、IFN-γ、IL6、TNF-α等炎性反应递质的释放,中药肾康灵可通过抑制炎性反应递质的释放,保护系膜细胞的功能。

肾康灵对系膜细胞炎症因子的影响

目的观察氧化低密度脂蛋白(Oxidized Low-Density Lipoprotein,ox-LDL)对系膜细胞(Mesangial Cells,MCs)分泌炎症介质功能的影响,并从细胞分子生物学水平阐明肾康灵的作用机理。方法采用肾康灵含药血清干预增殖系膜细胞的方法,按照随机数字表法分为7组,即正常对照组:DMEM-F12培养液;ox-LDL组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1);ox-LDL+趋化因子受体(CXCR6)组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1)+CXCR6;肾康灵低浓度组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1)+肾康灵低浓度含药血清;虞肾康灵高浓度组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1)+肾康灵高浓度含药血清;阿托伐他汀低浓度组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1)+阿托伐他汀(50滋mol·L-1);阿托伐他汀高浓度组:DMEM-F12培养液+ox-LDL(100滋g·mL-1))+阿托伐他汀(100滋mol·L-1)。以上各组标本培养24 h后收集各组细胞及上清液。每组实验细胞重复培养6次。分别利用ELISA法、RT-RCR法和Western blot法检测趋化因子配体16(CXCL16)、清道夫受体-B(CD36)、干扰素-酌(IFN-酌)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-琢(TNF-琢)基因水平和蛋白含量。结果利用ox-LDL(100滋g·mL-1))诱导大鼠系膜细胞增殖并加入CXCR6受体后,CXCL16、CD36、IFN-酌、IL6、TNF-琢的基因表达均显著升高(P<0.01),肾康灵含药血清呈浓度依赖性降低其表达水平,肾康灵高浓度组降低最显著(P<0.01)。结论 ox-LDL诱导系膜细胞增殖时通过CXCR6介导,可促进CXCL16、CD36、IFN-酌、IL6、TNF-琢等炎症介质的释放,肾康灵可通过抑制炎症介质的释放,保护系膜细胞的功能。

阿霉素肾病大鼠尿蛋白质组质谱的检测及中药肾康灵的干预作用

目的:应用尿蛋白质组学筛选阿霉素肾病(AN)大鼠尿液中差异表达的蛋白质,并检测中药肾康灵的干预作用,旨在蛋白质分子水平探索频复发性肾病(FRNS)的诊断标记物及药物治疗的作用靶点。方法:用阿霉素(ADR)5.5mg/kg诱导大鼠复制的阿霉素肾病(AN)模型,即类似于人类微小病变型(MCD)肾病模型。实验共分为5组,分别为正常组(A组)、AN病模组(B组)、泼尼松治疗组(C组)、泼尼松+肾康灵(低浓度)治疗组(D组)、泼尼松+肾康灵(高浓度)治疗组(E组)。利用表面增强激光解析-电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术联合CM10蛋白质芯片技术检测各组大鼠尿蛋白质组质谱的表达,采用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机自动收集数据,使用Ciphergen Proteinchip Software3.2.1和Biomarker Wizard分析软件筛选出各组大鼠尿液差异表达的蛋白质。并观察各组治疗前后尿蛋白、血清白蛋白(Alb)、胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)及肾脏病理形态学等变化。结果:在质荷比值(M/Z)2000～50000范围内(P<0.05),芯片共捕获到近40种差异蛋白质,质谱仪筛选出B组与A组比较的38种差异蛋白,其中3种差异蛋白从B组→C组→D、E组→A组呈递减趋势。这3种差异蛋白峰的M/Z值分别为9321.0、9393.1、9477.5。结论:SELDI-TOF-MS能有效分析阿霉素肾病大鼠尿液蛋白质质谱,中药肾康灵干预治疗后蛋白质质谱表达差异有统计学意义,且中药肾康灵联合泼尼松治疗AN大鼠的疗效优于单用泼尼松治疗。

肾病综合征氧化低密度脂蛋白脂质肾损伤的实验研究

目的 通过观察氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL）对系膜细胞（Mesangial Cells,MCs）分泌炎症介质功能的影响及MAPK信号通路和核因子-κB（nuclear factor kappa B,NF-κB）活性的改变,进一步阐明脂质在肾损伤中的作用机制.方法 利用ox-LDL诱导大鼠系膜细胞增殖,分别采用ELISA、real-time PCR、western blot技术检测MCs炎症介质、MAPK通路相关蛋白（p38、JNK、ERK）及NF-κB的表达水平.结果 利用ox-LDL诱导大鼠系膜细胞增殖并加入CXCR6受体后,其表面炎症因子[CXCL16、CD36、ADAM10、ADAM17、干扰素（IFN）、白细胞介素（IL6）、肿瘤坏死因子（TNF-α）]的表达水平以及MAPK信号通路（p38、JNK、ERK）、NF-κB的磷酸化水平显著升高（P〈0.01）.结论 ox-LDL可促使系膜细胞释放CXCL16、CD36、ADAM10、ADAM17、IFN、IL6、TNF-α等炎症介质,CXCR6可介导这一途径.ox-LDL激活MAPK信号转导通路,使p38、ERK1/2、SAPK/JNK的磷酸化水平升高,激活了NF-κB p65的活性,CXCR6-CXCL16介导MAPK信号途径.

基于医教研一体化改革模式探讨中医儿科研究生的培养策略

医教研一体化教育模式是中医学教育发展至今的必经之路,福建中医药大学附属人民医院儿科是全国中医院校中首批授予硕士点单位之一,历经40余年的耕耘发展,逐步形成了学术领先的中医临床、科研、教学发展的龙头单位。笔者现从创新理念、课程设置特点、教学模式、科研能力、临床实践能力以及人文素质教育等方面对中医儿科研究生的培养策略进行探讨,以达到全方位提高中医儿科研究生综合素质的目的。

CXCL16在肾病综合征患儿中的变化及肾康灵的干预作用

目的通过观察肾康灵对原发性肾病综合征(PNS)患儿血清中CXCL16、ADAM10、ADAM17分泌水平的影响,进一步阐明炎症介质在PNS发病机制中的作用及肾康灵的作用机理。方法采用肾康灵干预PNS患儿,采用ELISA法检测PNS患儿治疗前后血清CXCL16、ADAM10、ADAM17的分泌变化,同时检测血白蛋白(ALB)、总胆固醇(CH)、24 h尿蛋白定量等。结果 PNS患儿的尿蛋白定量升高,血清ALB降低,CH升高,CXCL16、ADAM10、ADAM17的含量升高(P<0.01),中西医结合组在降低尿蛋白定量、CH及血清CXCL16、ADAM10、ADAM17的含量方面明显优于西药组(P<0.01或P<0.05)。结论中药肾康灵通过降低CXCL16、ADAM10、ADAM17等炎症介质的释放,降低尿蛋白、血胆固醇,升高血白蛋白,有效地改善原发性肾病综合征患儿的临床症状。

滋阴降火化痰法治疗女童单纯性乳房早发育63例

目的探讨滋阴降火化痰法治疗女童单纯性乳房早发育(PT)的疗效。方法收集2020年6月—2022年1月就诊于福建中医药大学附属人民医院儿科门诊女童PT 126例,证属阴虚火旺兼痰湿壅滞证,采用随机数字表法分为对照组和治疗组各63例。对照组仅予以饮食、运动、睡眠等方面的健康教育,治疗组在健康教育的基础上口服自拟方化坚消核散,2组疗程均为3个月。比较2组疗效及治疗前后鸢尾素、促黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E_(2))、体质量指数(BMI)和中医证候总积分的变化情况。结果治疗组有效率为90.48%,显著高于对照组的65.08%(P<0.01);与治疗前比较,治疗后治疗组鸢尾素、LH、FSH、BMI和中医证候总积分均显著下降(P均<0.05),治疗后对照组鸢尾素、LH、FSH均显著下降(P均<0.05),但2组E_(2)水平治疗前后无显著变化(P>0.05);治疗后2组比较,治疗组鸢尾素、LH、BMI和中医证候总积分下降均更显著(P均<0.05)。结论自拟方化坚消核散可能通过降低鸢尾素水平,减少LH和FSH的分泌,从而抑制女童的乳房早发育,疗效显著。

活血益肾法治疗儿童胡桃夹综合征的临床观察

目的观察活血益肾法治疗儿童胡桃夹综合征(NCS)的临床疗效,旨在积累临床经验,提高NCS的临床疗效。方法收集NCS患儿30例,采用随机数字表法分为中药组和对照组各15例。利用彩色多普勒超声诊断仪检测NCS患儿左肾静脉(LRV)内径值以及尿沉渣镜检法测定尿红细胞计数。应用活血益肾方治疗NCS儿童,观察治疗前后LRV内径值及尿红细胞计数值的变化情况。结果 NCS患儿存在受压处仰卧位和脊柱后伸位的LRV内径比值明显升高,治疗后6个月,中药组仰卧位和脊柱后伸位时的LRV内径比值明显小于对照组(P<0.05或P<0.01),中药组与对照组比较尿红细胞计数显著降低(P<0.01)。活血益肾法治疗儿童NCS的有效率高达86.6%。结论血瘀肾虚是NCS患儿的基本病理改变,活血益肾方通过改善左肾瘀血,降低LRV内径比值,改善LRV血液循环,减少尿红细胞的排泄而发挥显著疗效,可有效用于儿童NCS的临床治疗。

肾康灵干预儿童原发性肾病综合征频复发因素探析

目的观察儿童原发性肾病综合征（PNS）频复发相关因素，并采用中药肾康灵进行干预，为降低小儿频复发性肾病综合征（FRNS）的复发率和肾康灵的临床应用奠定基础。方法：PNS患儿采用随机数表法分为中西医结合组和西药组，同时在体检中心抽取健康体检儿童为正常组。对两组治疗后的各项指标进行对比分析。结果：治疗后，中西医结合组在降低尿蛋白定量、cH及血清CXCL16、ADAMIO、ADAM17、D-二聚体的含量方面明显优于西药组（P〈0．01或P〈0．05）。结论：中药肾康灵对降低FRNS的复发率，有重要作用，值得临床推广应用。

郑健教授治疗小儿水肿的临证经验

郑健教授结合儿童的生理病理特点,积累了中医在小儿水肿治疗方面的丰富经验,并确立了中医临床辨证思维。他提出了治疗水肿十法,遵从病证结合以及分期论治的原则,以辨证为依据,结合患儿的水肿程度、尿蛋白以及激素用量等指标做出评估,实施分期论治,得到较为满意的临床疗效。

人外周血中NF-κB p65定量检测方法的建立及临床应用

目的建立一种能定量测定人外周血中核转录因子-κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)p65活化量的检测方法。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,从细胞核成分中提取核蛋白,应用Bradford法进行核蛋白定量,以识别NF-κB p65不同抗原表位的2种抗NF-κB单克隆抗体为基础,建立可定量检测人外周血NF-κBp65活化量水平的双抗体夹心酶联免疫吸附实验法。应用已建立的NF-κB p65定量检测方法测定了68例微小病变型肾病综合征患者和20名健康人外周血中NF-κB p65活化量。结果本方法批内、批间变异系数分别为(9.78±3.99)%、(12.51±4.53)%,灵敏度为0.030mg/L,平均回收率为95.8%。与NF-κB突变型寡核苷酸不发生交叉反应。微小病变型肾病综合征患者治疗前外周血中NF-κB p65活化量较健康人显著增高(P<0.01),治疗后与治疗前NF-κB p65活化量差异有统计学意义(P<0.01),但与健康人NF-κB p65活化量差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究建立的人外周血中NF-κB p65活化量定量检测方法快速、特异且可靠,为临床监测NF-κB p65活化情况提供了条件。

醒鼻温敏凝胶剂对变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-4、转化生长因子-β1和鼻黏膜嗜酸性粒细胞的影响

目的观察醒鼻温敏凝胶剂对变应性鼻炎(AR)大鼠血清白细胞介素-4(IL-4)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及鼻黏膜嗜酸性粒细胞(EOS)计数的影响,探讨其作用机制。方法以卵清白蛋白加氢氧化铝腹腔注射基础致敏,局部以2%卵清白蛋白激发成功复制AR模型。实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和醒鼻低、中、高剂量组,各给药组给予相应药物干预。比较各组大鼠症状评分,检测血清IL-4、TGF-β1含量和鼻黏膜EOS计数。结果与正常组比较,模型组大鼠血清IL-4、TGF-β1含量明显升高(P<0.01),鼻黏膜组织EOS计数明显增加(P<0.05);与模型组比较,醒鼻中剂量组和阳性对照组血清IL-4、TGF-β1含量明显降低(P<0.01),鼻黏膜组织EOS计数明显减少(P<0.05)。结论醒鼻温敏凝胶剂可能通过下调IL-4、TGF-β1等炎症因子水平及减少鼻黏膜EOS浸润而发挥治疗作用。

肾康灵汤剂联合强的松治疗阿霉素肾病大鼠的作用机制

目的:研究肾康灵联合强的松治疗阿霉素肾病(adriamycin-induced nephropathy)大鼠的作用机制。方法:除正常对照组18只外,雄性SD大鼠48只经尾静脉一次性注射阿霉素5.5mg/kg建立大鼠阿霉素肾病模型。造模2周后将造模成功的大鼠随机分成模型组、强的松组、肾康灵组及肾康灵加强的松组,每组12只,分别予相应的药物灌胃治疗。于造模2周及治疗后1、2、3周收集尿液检测24h尿蛋白含量;从眼眶后静脉丛采血,酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;于造模2周和治疗3周后,取大鼠脾脏及肾脏,采用ActiveMotif的专利技术检测脾脏单个核细胞中核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65含量变化,并分析以上指标间的相关性;透射电子显微镜观察肾小球足突改变。结果:单独应用强的松或肾康灵治疗后,大鼠NF-κB p65、TNF-α、NO及24h尿蛋白含量较模型组降低(P<0.01),融合的足突仅有部分恢复正常。肾康灵加强的松联合治疗可显著降低模型大鼠单个核细胞的NF-κB p65含量(P<0.01)、血清NO水平(P<0.01)和24h尿蛋白的排出量(P<0.05),并使融合的足突大部分恢复正常。肾康灵和强的松对血清TNF-α含量的降低无交互作用。结论:肾康灵加强的松联合治疗能延缓和改善阿霉素引起的肾损害,其作用机制可能与抑制NF-κB的异常活化,减少血清TNF-α及NO等炎症性因子的产生有关。