新疆和静县巴音布鲁克羊新孢子虫感染状况横断面研究

为估计新疆和静县巴音布鲁克羊新孢子虫流行率,了解其在羊群中的感染情况,通过横断面研究方法,采用两阶段抽样策略,在和静县下辖的12个乡镇中抽取67个养殖场点,采集1340份血清样品,使用间接ELISA方法检测新孢子虫抗体;通过问卷调查,分析群间传播相关风险因素。抗体检测结果显示,和静县巴音布鲁克羊新孢子虫感染的群表观流行率为32.84%(95%CI:21.85%~45.40%),真实流行率为36.05%(95%CI:24.93%~49.93%);12个乡镇中,有8个检出阳性场群。对问卷调查结果,进行卡方检验和Logistic回归分析发现,“饲养方式为舍饲”“建厂时间在6年以上”和“圈舍没有消毒”等因素具有统计学意义(P<0.05),为养殖场感染新孢子虫的主要风险因素。结果表明:新孢子虫在和静县巴音布鲁克羊群中流行普遍,流行范围较广;长时间舍内饲养、建厂时间久、卫生消毒管理差是导致新孢子虫流行的主要风险因素。因此,提高养殖场户饲养管理水平,定期对圈舍进行消毒并保证一定的空圈时间,可降低新孢子虫的感染风险。

马驽巴贝斯虫新疆伊犁株Bc48基因克隆、表达及其多克隆抗体的制备

为表达马驽巴贝斯虫新疆伊犁株Bc48基因,制备多克隆抗体,试验根据GenBank中马驽巴贝斯虫Bc48基因序列,设计合成1对特异性引物,以提取的新疆株Bc48基因组DNA为模板进行PCR扩增,将扩增产物克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,阳性质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导后表达产物进行SDS-PAGE分析,切胶纯化蛋白后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,制备多克隆抗体;同时把该基因克隆至真核表达载体pCMV-N-flag中,将阳性质粒转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,提取pCMV-N-flag-Bc48质粒转染到293T细胞中进行真核表达。结果显示,获得了大小约为15ku的融合蛋白,与预期目的蛋白大小相一致;免疫BALB/c小鼠制备的多克隆抗体经ELISA和Western blotting检测、验证,能特异地识别相应抗原,其抗体效价可达1∶128 000,说明该多克隆抗体有较高的抗体效价和特异性;真核表达质粒在293T细胞中表达Bc48蛋白。本试验可为进一步研究马驽巴贝斯虫功能基因及建立快速的检测方法奠定基础,在虫株的分类学研究及候选疫苗的研制中有重要意义。

16S rDNA-RFLP法快速鉴定蒙古国传统乳制品中的乳酸菌

以17株标准菌株为参照,采用限制性片段长度多态性(RFLP)分析和16S rDNA序列分析相结合的技术,对分离自蒙古国5个地区传统乳制品中的55株乳酸菌进行了快速鉴定。结果表明,通过限制性内切酶AluⅠ、HaeⅢ、BsmaⅠ、TspRⅠ和HinfⅠ的指纹图谱分析,将49株乳杆菌和2株片球菌准确鉴定到种,其他4株肠球菌鉴定到属。采用16S rDNA-RFLP方法鉴定乳酸菌具有准确性,可靠性和高效性。

成年双峰驼首次免疫口蹄疫A-O-AsiaⅠ型三价灭活疫苗抗体效价消长规律的测定及二次免疫时间的确定

为了解成年骆驼首次免疫口蹄疫A-O-AsiaⅠ型三价灭活疫苗有效免疫保护期及消长规律,从而确定加强免疫的时间,以及加强免疫后群体有效免疫保护期。采用随机选定首次免疫的成年骆驼20峰,每15日采集血清样本,用液相阻断ELISA方法测定其抗体效价。结果表明,首次免疫的有效免疫保护期约为1.5个月,二次免疫时间应确定在首次免疫后的1~1.5个月内,且加强免疫后有效免疫保护期至少3个月以上。

16S rDNA-RFLP技术鉴定西藏地区乳制品中的乳杆菌

将16S rDNA PCR技术和RFLP技术相结合,对分离自乳制品中的乳杆菌进行分类和鉴定。从我国西藏地区传统发酵乳中分离出51株乳杆菌,采用通用引物扩增16S rDNA,利用限制性内切酶AluI,HaeⅢ和HinfⅠ将16S rDNA扩增产物进行酶切后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱将菌种鉴定到种的水平。根据16S rDNA-RFLP的结果从中选出8株有代表性的菌株进行生理生化实验和16S rDNA序列的测定,实验结果与RFLP鉴定结果相吻合,表明此方法是一种快速、准确的可用于大量乳杆菌分类和鉴定的方法。

Lactobacillus helveticus ND-01培养条件的优化及冻干发酵剂的制备

瑞士乳杆菌Lactobacillus helveticus ND-01是一株分离、筛选自新疆酸马奶中的乳酸菌,并且在发酵牛乳的过程中能产生较高的ACE-Ⅰ抑制活性和γ-氨基丁酸。实验通过对L.helveticus ND-01培养基的组分进行优化,从而得出L.helveticus ND-01优化培养基配方为:乳糖25 g/L,大豆蛋白胨14.1 g/L,酵母粉14.1 g/L,醋酸钠15.3 g/L,柠檬酸纳6.5 g/L,K2HPO42.2 g/L,MgSO4.7H2O 2 g/L,MnSO4.5H2O 25 mg/L,吐温-80 1 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐750 mg/L,维生素B9(VB9)20 mg/L。L.helveticus ND-01在此培养基中经42℃,18 h培养,其活菌数可达到4.2×108cfu/mL,比MRS中(8.2×107cfu/mL)提高近5倍。将此优化培养基作为基础培养基,在5 L发酵罐中,经优化发酵条件,其活菌数可达到3.1×109cfu/mL,发酵液离心收集菌体,加入保护剂,冷冻干燥后活菌数可达到2.5×1010cfu/g。冻干菌粉经90 d的低温贮藏,其存活率为81.20%。

蒙古国传统发酵乳中部分乳杆菌16S rRNA-RFLP的分类

采用16S rRNA-RFLP技术对分离自蒙古国乌兰巴图周边地区酸马奶中部分乳杆菌进行分类和鉴定。结合HaeIII,AluⅠ和HinfⅠ三种限制性内切酶RFLP的分析,将26株乳杆菌鉴定为Lactobacillus helveticus(18),actobacillus plantarum(7)和Lactobacillus casei(1)。在此基础上采用了16S rRNA基因序列分析的方法对本研究的26株乳杆菌进行验证,实验结果与16S rRNA-RFLP鉴定结果相吻合,表明此方法是一种快速、准确用于大量乳杆菌分类和鉴定的方法。

新疆和静县黑头羊犬新孢子虫的检测及分子鉴定

犬新孢子虫是一种细胞内原生动物寄生虫,可导致包括绵羊和山羊在内的多种哺乳动物流产和新生胎儿死亡。本研究为了预估巴音郭楞蒙古自治州和静县黑头羊中犬新孢子虫的流行情况,采集了8个乡镇的165份血样,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增犬新孢子虫Nc5基因片段,并对部分阳性产物进行基因测序。结果显示,在165只黑头羊中有13只(7.9%)检测到犬新孢子虫阳性;年龄、流产史、饲养犬只与感染率有统计学差异(P<0.05);2岁以上的母羊感染率最高,有流产史的母羊,新孢子虫感染率较高。饲养场地周边犬的存在对感染率也有所影响,有饲养犬的羊群感染率11.4%,高于未饲养犬的羊群。将Nc5基因的部分序列与GenBank上传的基因序列进行比对,结果显示同源性为92%~100%。本研究是首次对和静县黑头羊犬新孢子虫进行系统进化分析,为犬新孢子虫病防控方案的制订提供参考,对减少畜牧业的经济损失具有实际意义。

畜禽传染病的诊断和防控技术

畜禽传染病的防控是农业生产中的重要任务,对保障畜禽生产和保障人类健康具有重要意义。首先,介绍畜禽传染病的诊断技术,包括病原学诊断、病理学诊断、免疫学诊断和分子生物学诊断等。其次,介绍畜禽传染病的防控技术,包括疫苗接种、药物治疗、环境卫生、隔离和消毒等。最后,总结畜禽传染病的诊断和防控技术的重要性,并强调科学的预防和治疗措施的必要性。指出当前畜禽传染病防控中存在的问题和挑战,提出进一步加强畜禽传染病防控工作的建议。

复合乳酸菌微生态制剂对奶牛生产性能的影响

为研究微生态制剂对奶牛乳体细胞数、泌乳量和饲料利用率的影响,本研究以5,600头荷斯坦泌乳牛为研究对象,根据产奶量、胎次和泌乳天数等相近的原则分为试验组和对照组,每组2,800头,进行为期60d的饲喂试验。对照组保持基础日粮,试验组添加微生态制剂80g/头/d。结果表明,饲喂10d后试验组体细胞数从21.0万个/mL降低到13.8万个/mL,试验组奶牛泌乳量比对照组平均高出1.80kg/头/d,试验组的采食量及饲料利用率显著提高。综上所述,复合乳酸菌微生态制剂可以显著提高奶牛生产性能。

牛结节性皮肤病及其检测方法研究进展

2019年8月,我国首次在新疆地区确诊牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)。为加强对LSD的认知,继而及早制定监测与防控措施,本文概述了该病的病原学、临床症状、免疫应答等,分析了近些年该病的检测方法,提出尽早建立标准诊断技术,对防疫人员及养殖者开展培训和宣传,建立疫苗储备等建议,以期为我国防控LSD提供技术支持。

布鲁氏菌病流行特征综述

布鲁氏菌病是由布鲁氏菌感染而诱发的人畜共患慢性传染性疾病,当前确诊的易感菌属有十余个,其中,B.melitensis、B.abortus和B.suis三类菌属的危害最大,布鲁氏菌病是一种人畜共患病,在国外被认为是潜在的生化武器之一.考虑到此病的高传染性危害,当前全球都重视此病的防控,故对科学控制此病,降低此病潜在的威胁意义显著.以此而展开论述,对布鲁氏菌病进行概述,介绍布鲁氏菌病流行特征,从传染源控制、切断传染途径、加大防病投入等几个方面,就布鲁氏菌病流行防控做要点阐述以供参考和借鉴.

浅谈实验室信息管理系统(LIMS)的应用

实验室信息管理系统是实验室现代化管理的需要。通过信息管理系统的应用,实验室可达到运行自动化、管理信息化和办公无纸化的目的,对提高实验室工作效率、降低运行成本有着重要的作用。本文基于目前自治区级兽医实验室工作现状及存在问题,分析建立LIMS的必要性,明确LIMS设计原则,阐述LIMS能够给实验室带来的改变和建立过程中应注意的问题。

马驽巴贝斯虫Bc48蛋白的纯化及其应用

为了解新疆南北疆部分疫区马匹携带驽巴贝斯虫(Babesia caballi)抗体情况,运用实验室已构建保存的地方虫株重组Bc48为靶抗原,将重组原核表达质粒pGEX4T-1-Bc48转化至BL21表达系统中,诱导表达出36 KDa的重组蛋白。经KCl法切胶纯化重组蛋白后作为rELISA包被抗原,对阿克苏、伊犁、和硕等7个区域的随机采集样品(n=256)进行马驽巴贝斯虫抗体检测。结果显示,Bc48重组抗原能够精确识别马驽巴贝斯虫标准阳性和阴性血清;所检测的临床样品中,驽巴贝斯虫抗体阳性率为19.5%,其中,南疆2个地区(和硕、阿克苏)马驽巴贝斯虫病阳性率分别为30%、9%;北疆5个地区(昭苏种马场、伊犁卡拉苏、洪纳海乡、阿尕什敖包乡和富蕴县区域)马驽巴贝斯虫抗体阳性率分别为17%、12.5%、17%、5%和35%。本次调查结果为新疆驽巴贝斯虫防控措施及疫苗和驱虫药的使用提供必要的理论依据。

绵羊巴氏杆菌与链球菌混合感染的诊治

从绵羊巴氏杆菌和链球菌病的发病情况、临床症状、病理变化、治疗、防控措施等方面对绵羊巴氏杆菌、链球菌病进行介绍,以期为养殖户及基层兽医进行绵羊巴氏杆菌、链球菌病防治提供借鉴。

施马伦贝格病研究进展

施马伦贝格病是2011年11月首次在德国北莱茵-威斯特法伦州的反刍动物中发现的,由一种新的布尼病毒,布尼病毒科,布尼病毒属的新成员—施马伦贝格病毒引起的一种新发动物传染病,主要感染猪、牛、羊和野牛,主要通过蠓传播。会造成动物精神不振、体质下降、厌食和腹泻等临床症状。本文从病原学、流行病学、诊断和防控等方面对该病进行了综述。

新型微生物添加剂防治奶牛乳房炎的试验

本试验选取某奶牛场患有隐形乳房炎的泌乳奶牛100头,随机分成治疗组和阳性对照组各半。每头牛每天添加200g的微生物添加剂治疗,10d后再用CMT检测,评价该微生物添加剂对隐形乳房炎的治疗效果。结果显示,喂饲5d该微生物添加剂后,奶牛日均产奶量增加约2kg,喂饲10d后,平均乳体细胞数显著降低了65.6%,相对乳区总好转率为56.3%,表明本试验所用微生物添加剂可应用于奶牛隐性的防治。

体细胞对原料乳品质及加工性能的影响

本文综述了牛乳中体细胞数对原料乳产量、脂肪、蛋白质、乳糖等的影响,且对体细胞原料乳的加工性能进行了概述。通过体细胞数可反应出牛群的健康状况、原料奶的质量情况,可为奶牛的饲养和乳制品的生产加工提供及时准确的指导信息。

犬细小病毒的诊治

介绍了犬细小病毒的流行情况、临床症状、剖检变化及临床诊断方法,总结了其治疗措施及体会,以期为犬细小病毒的诊治提供参考。

浅谈兽医实验室生物安全的“软件”建设

随着我区兽医实验室考核工作的全面开展,实验室仪器设备的不断完善,基层兽医实验室整体水平得到了全面提升,特别是基层实验室的一些"硬件"建设上有了很大的改观,但也清楚意识到了我们在实验室"软件"建设及管理上相对滞后,本文主要从实验室生物安全规范操作和生物安全培训方面,阐述基层兽医实验室生物安全的"软件"建设。