羊胎素对体外成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响

目的 观察羊胎素在体外对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。方法将提取之羊胎素稀释加入体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞体系中,终浓度分别为0.625％、1.25％、2.5％、5％和10％;加药后24、48和96 h用MTT法检测细胞的增殖并绘制生长曲线:培养5 d时用PNPP法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性;培养31 d时用茜素红染色2.5％羊胎素组形成之矿化骨结节,用图像分析仪计算骨结节的面积。结果 所有含羊胎素浓度组,其MTT法测得的A值都显著高于空白对照组(P<0.01),生长曲线表现为含羊胎素组的细胞增殖加快,以2.5％浓度组最为显著;ALP结果显示,羊胎素各浓度组的碱性磷酸酶活性都显著高于空白对照组(P<0.01);茜素红染色后显示,2.5％羊胎素组所形成的骨结节面积显著高于空白对照组(P<0.01)。结论羊胎素对体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞有显著的促进增殖、分化和矿化的作用。

马氏珠母贝糖胺聚糖对体外成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响

目的观察珠母贝糖胺聚糖在体外对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。方法应用MTT法、PNPP法、茜素红染色 (ARS)矿化骨结节及用图像分析仪计算骨结节的面积等方法观察细胞的增殖、碱性磷酸酶 (ALP)活性及矿化结节形成的影响。结果珠母贝糖胺聚糖 0 .0 0 8～ 0 .5 g·L- 1在不同时间MTT测得的A值均低于空白对照组 ,不促进细胞的增殖 ;各浓度组在培养 5d时 ,碱性磷酸酶的活性显著高于空白对照组 ;培养 31d后茜素红染色显示 ,0 .0 6 3g·L- 1组所形成的骨结节面积显著大于空白对照组。结论珠母贝糖胺聚糖对体外培养的SD新生大鼠颅骨成骨细胞有显著促进分化和矿化的作用 ,但不促进细胞的增殖。

蛇床子挥发油与其它促透剂合用促透效果研究

目的 :研究蛇床子挥发油与其它促透剂合用的促透效果。方法 :在离体透皮吸收实验装置上 ,采用离体兔皮用 1%蛇床子挥发油、5 %油酸、1%蛇床子挥发油 + 5 %油酸和 1%氮酮预处理后作透皮吸收试验。结果 :1%蛇床子挥发油、5 %油酸、1%蛇床子挥发油 + 5 %油酸和 1%氮酮 ,对 1%双氯芬酸钠都有良好的促透作用 (与对照组比较 P<0 .0 1) ,1%蛇床子挥发油比 1%氮酮促透作用强 1.6倍 ,但 1%蛇床子挥发油和 5 %油酸合用 ,与 1%蛇床子挥发油、5 %油酸的促透效果比较差异无显著性 (P>0 .0 5 )。结论 :蛇床子挥发油具有良好的促透效果 ,但其与油酸无协同作用。

羊胎素对体外骨髓基质细胞的增殖和向成骨细胞分化的影响

目的探讨羊胎素对体外培养的SD大鼠骨髓基质细胞(Marrow Stroma Cells,MSCs)的影响。方法用MTT法检测MSCs的增殖;PNPP偶氮法检测MSCs碱性磷酸酶(ALP)的活性;细胞ALP染色观察成骨细胞的形成。结果在含羊胎素原液的0.625%,1.25%,2.5%和5%时对体外培养的SD大鼠MSCs有明显的促进增殖的作用(P<0.01);在含羊胎素原液的2.5%及5%+成骨诱导剂时,ALP的活性明显高于诱导剂对照组(P<0.05),而在含羊胎素原液的2.5%和5%浓度组,ALP的活性明显高于空白对照组及诱导剂对照组(P<0.001);细胞ALP染色呈强阳性,加药组颜色明显深于对照组和诱导剂对照组。结论羊胎素对体外培养的SD大鼠MSCs的增殖和向成骨细胞分化具有明显的促进作用。

油相干燥法制备薏苡仁酯微胶囊最佳工艺研究

目的探讨油相干燥法制备薏苡仁酯微胶囊化的最佳工艺条件,得出包埋率高、感官质量好的薏苡仁酯微胶囊产品。方法丙酮为溶剂提取薏苡仁酯;以明胶为壁材,油相干燥法进行微胶囊化。结果用3.5倍的丙酮浸提3次,8 h/次,能萃取出薏苡仁中大部分的薏苡仁酯;壁材明胶水溶液的浓度为20%,芯材薏苡仁酯与壁材明胶的质量之比4∶10。结论得到的微胶囊于室温下喷雾干燥,其薏苡仁酯的包埋率达83.1%,包埋度达4.18%,包埋效果好。

蛇床子挥发油对双氯芬酸钠经皮渗透的影响

目的 对蛇床子挥发油的促透作用进行探讨。方法 采用离体兔皮用蛇床子挥发油预处理作透皮吸收试验。结果 用 0 .5 %、1%、2 %的蛇床子挥发油预处理兔皮后 ,双氯芬酸钠的渗透系数分别为 0 .0 75 7± 0 .0 12 5、0 .10 46± 0 .0 492、0 .0 997± 0 .0 332mg/ (h·cm2 ) ,都显著高于阴性对照组 0 .0 2 78± 0 .0 0 78mg/ (h·cm2 ) (P <0 .0 1)和 1%的月桂氮酮组 0 .0 488± 0 .0 11mg/ (h·cm2 )(P <0 .0 1) ,但 0 .5 %、1%、2 %的蛇床子挥发油三者之间的促透作用无显著性差异。结论 蛇床子挥发没具有较好的促皮渗透作用。

丹参水提物和丹参素促进成骨细胞活性和防治泼尼松所致大鼠骨质疏松

目的 研究丹参水提物 (DWE)对糖皮质激素造成大鼠骨质疏松的预防作用 ,同时研究DWE和有效成分丹参素对体外培养的大鼠成骨细胞的影响 ,以探讨其作用机制。方法 ① 4mon龄SD大鼠分为对照组、模型组 (以泼尼松 2 7mg·kg- 1·d- 1灌胃 ) ,丹参水提物组 (泼尼松 +DWE 5 0g·kg- 1·d- 1)和综合治疗组 (泼尼松 +司坦唑醇 0 5mg·kg- 1·d- 1+VitD3 2 50IU·kg- 1·d- 1+葡萄糖酸钙 0 5g·kg- 1·d- 1) ,共给药 12wk。采用骨组织形态计量学方法定量观察大鼠胫骨松质骨的骨结构 ,同时测定骨无机及有机质含量 ;②采用体外大鼠成骨细胞培养 ,测定DWE和丹参素对细胞碱性磷酸酶 (ALP)的活性及药物量效、时效关系。结果 泼尼松可导致骨小梁面积明显减少 ,骨结构异常 ,破骨细胞增多和骨形成率下降 ,伴随骨无机质钙盐 (Ca)和有机质羟脯胺酸 (HyP)下降 ,血钙上升 (以上指标P <0 0 1)。DWE完全对抗由泼尼松引起的上述异常并增加骨干重 ,对增加骨干重和骨有机质含量优于综合组。DWE和丹参素均可促进大鼠颅骨成骨细胞ALP活性 ,呈量效关系 (DWE最佳作用浓度为 1 0～ 2 0g·L- 1,丹参素为 0 1～ 1 0mg·L- 1)和时效关系 (随时间延长作用明显增强 ) ,DWE的效应按含丹参素量计算 ,与丹参素作用相当。结论 丹参水提?

珠母贝糖胺聚糖的结构初探及其生理活性

以马氏珠母贝全脏器为原料提取、纯化后所得的珠母贝糖胺聚糖PG2 - 3- 2 ,经醋酸纤维素薄膜电泳显示其迁移率相对接近于 6 -硫酸软骨素 (C - 6 -S) ,红外光谱类似于C - 6 -S。抗肿瘤试验结果显示 :PG2 - 3- 2对体内S180肉瘤和艾氏腹水癌可显著增敏临床抗癌药的抑瘤作用 ,抑瘤率分别达 6 1.96 %与 46 .3%。并有抗凝血作用。

珠母贝糖胺聚糖的纯化及其化学性质

珠母贝糖胺聚糖粗制品经吸附、等电点沉淀、醇沉、溴化十六烷基三甲铵（ＣＴＡＢ）络合等法进行分离纯化，得一糖胺聚糖级分。经醋酸纤维素薄膜电泳显示为单一区带。化学组成分析表明：该级分氨基已糖含量较高（７１．３％），其中以氨基半乳精为主（５９％），含有少量的已糖醛酸，含硫酸基、半乳糖、岩藻糖。元素分析表明其碳、氢、氮、硫的含量分别为３７．７％、５．８％、５．８％、３．０％。对级分的残余氨基酸分析表明，８４．２％氨基酸已被清除。

大黄素对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的影响

目的 观察大黄素(emodin)对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化作用特点及量效关系,并观察大黄素对骨保护蛋白(Osteoprotegerin,OPG)mRNA表达的影响。方法 在新生大鼠颅骨成骨细胞体系中加入不同浓度的大黄素,加药后 1、2、3d用MTT法检测细胞增殖, 3、5、7、9d用PNPP法检测细胞内碱性磷酸酶含量,加药后 7d检测细胞内OPGmRNA表达的量, 24d检测细胞上清中钙和细胞内羟脯氨酸含量。结果 大黄素能促进大鼠颅骨成骨细胞ALP活性,实验中最佳作用浓度为 1×10-6 mol·L-1,最佳作用时间是 7d。大黄素能增加细胞内羟脯氨酸含量,促进OPGmRNA的表达。结论 大黄素可促进成骨细胞分化,增加OPGmRNA的表达。

大黄素对体外大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化的影响

目的 :观察大黄素对骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化的影响 ,探讨大黄素对干细胞分化方向的调节作用。方法 :用密度梯度离心的方法和传代贴壁筛选的方法相结合 ,分离纯化骨髓基质细胞。对硝基苯磷酸盐法判断是否成功诱导骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化 ,碱性磷酸酶染色法、放射免疫测定法观察大黄素对骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化的影响。结果 :结合密度梯度离心的方法和传代贴壁筛选的方法 ,分离纯化后可得到成分较为均一的骨髓基质细胞 ,其间存在有间质干细胞 ,经诱导后向成骨细胞方向分化。大黄素可增加大鼠骨髓基质细胞成骨诱导后细胞碱性磷酸酶的含量 ,其中10 -6mol·L-1浓度组作用 7d时效果明显。大黄素在 2 .5× 10 -7～ 10 -5mol·L-1浓度范围内未能增加细胞上清液和细胞裂解液中骨钙素含量。结论 :大黄素能促进骨髓基质细胞向成骨细胞方向分化 ,这一作用主要体现在骨形成过程的早期 ,对矿化期没有促进作用。

大黄素对大鼠体外颅骨成骨细胞的影响

目的观察大黄素对体外大鼠颅骨成骨细胞细胞周期、骨钙素含量、骨结节数目和面积、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。方法在成骨细胞体系中加入不同浓度的大黄素,应用流式细胞术、放射免疫测定法、茜素红染色法及RTPCR的方法观察大黄素对大鼠颅骨成骨细胞的增殖、骨钙素含量、骨结节数目和面积、Ⅰ型胶原mRNA表达的影响。结果大黄素可刺激成骨细胞分泌骨钙素。低浓度的大黄素可上调Ⅰ型胶原基因的表达,高浓度时则降低Ⅰ型胶原的基因表达。结论大黄素可以刺激成骨细胞分泌骨钙素和增加Ⅰ型胶原mRNA的表达。

大黄素对体外大鼠骨髓基质细胞向脂肪细胞方向分化的影响

目的观察大黄素对骨髓基质细胞向脂肪细胞方向分化的影响,以探讨大黄素对骨质疏松发生时伴随的脂肪增多现象中所起的作用。方法16只3mon龄SD大鼠随机分成4组:对照组、激素组、复方碳酸钙治疗组、大黄素治疗组。给药90d后收集骨髓基质细胞。应用油红O染色法及RTPCR的方法判断是否成功诱导骨髓基质细胞向脂肪细胞方向分化,同时观察大黄素对骨髓基质细胞成脂分化后脂肪细胞的数目和脂蛋白脂酶mRNA表达的影响。结果体内灌胃给予泼尼松的激素组大鼠的骨髓基质细胞体外培养时分化为脂肪细胞的能力明显增强。复方碳酸钙组和大黄素组大鼠骨髓基质细胞分化为脂肪细胞的能力较激素组明显下降,其中大黄素下调脂蛋白脂酶mRNA表达的作用强于复方碳酸钙。结论体内给予糖皮质激素后,骨髓基质细胞体外培养时自发向脂肪细胞方向分化的能力和经体外诱导后向脂肪细胞方向分化的能力都明显增强,大黄素可能有对抗糖皮质激素成脂诱导的作用。

结石通片的利尿和排石作用

目的 :探讨结石通片的利尿和排石作用。方法 :采用大鼠代谢笼法进行利尿实验 ;给予大鼠乙二醇和氯化铵 ,连续3 0d ,以形成结石模型进行排石试验。结果 :高、低剂量的结石通片组均有显著的利尿作用 ,3h内总尿量与对照组比较增加了约 5 0 % ;给药组的大鼠结石形成率明显降低 ,且随着药物浓度的升高 ,排石作用更显著。结论 :结石通片具有利尿和排石作用。

马氏珠母贝全脏器提取物糖胺聚糖抗肿瘤作用的实验研究

目的 :观察马氏珠母贝 (pinctadamartensis )全肉提取物糖胺聚糖精提物 (glycosaminoglycan ,GAG)或粗提物 (coarseglycosaminoglycan ,CGAG)对几种肿瘤的作用。方法 :用昆明种小鼠 ,分别观察GAG和CGAG对体内几种肿瘤的抑瘤率、生命延长率、与 5 FU或替加氟的协同作用 ,及其对体外培养HL 6 0细胞的杀伤作用。结果 :糖胺聚糖粗、精提取物分别对体内S180肉瘤和艾氏腹水癌 (EAC)有显著增敏 5 FU或替加氟的抑瘤作用 ,抑瘤率分别达 6 1.96 %或4 6 .30 % ;糖胺聚糖精提物对S180肉瘤生命延长率影响明显 ,生命延长率为 14 .16 % ;糖胺聚糖粗提物(1.0g·L- 1或 0 .1g·L- 1)对体外培养HL 6 0细胞杀伤率达 38.6 7%或 2 5 .6 4%。结论 :糖胺聚糖粗、精提物分别对体内S180肉瘤和EAC有显著增敏 5 FU或替加氟的抑瘤作用 ,并有一定的提高生命延长率的作用 ,对体外培养HL 6

珠母贝全脏器中糖胺聚糖粗提物的制备及其生理活性初探

以马氏珠母贝 ( Pinctada martensis( Dunder) )全脏器为原料 ,经丙酮脱脂、酶解、脱色、醇沉、干燥后 ,得糖胺聚糖粗制品。用正交试验优选出酶解与醇沉条件。该糖胺聚糖粗提物对体外培养 HL - 60细胞有一定杀伤作用。

骨元肽结肠溶胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用

目的探讨骨元肽结肠溶胶囊对去卵巢大鼠引起骨质疏松症的防治作用。方法采用切除大鼠双侧卵巢的方法建立大鼠骨质疏松症模型,以雌二醇(E2)作阳性对照,用放射免疫法检测大鼠血清中E2、骨钙素(BGP)、转化生长因子(TGF-β1);用生物化学的方法检测大鼠血清中碱性磷酸酶(ALK)、钙(Ca)、磷(P)和24h尿Ca、P,同时采用骨矿密度检测仪测定骨密度(BMD)。结果骨元肽结肠溶胶囊组可明显提高血清中E2、TGF-β,增加BMD,降低血清中ALK、BGP和24h尿Ca、P含量。结论骨元肽结肠溶胶囊具有提高雌激素作用,可有效抑制骨吸收,降低骨转化率,加强成骨细胞活性,增加骨密度。对去卵巢引起的大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用。

硫酸壳聚糖体内抗肿瘤作用的实验研究

目的:研究硫酸壳聚糖的体内抗肿瘤作用。方法:用高、低(200、100mg/kg)两个剂量的硫酸壳聚糖分别腹腔注射治疗肉瘤180(S180)小鼠和艾氏腹水癌(EAC)小鼠10d,然后测定其抑瘤率、重要器官的内脏指数和生命延长率,同时设生理盐水组(空白对照组)和氟尿嘧啶组(阳性对照组)进行比较。结果:硫酸壳聚糖高、低剂量组和氟尿嘧啶组的抑瘤率分别为38.67%、30.19%和43.27%,3组的生命延长率分别为65.38%、69.23%和54.93%。和生理盐水组、氟尿嘧啶组相比,硫酸壳聚糖高、低剂量组的S180小鼠的胸腺指数均有明显增加(P<0.05)。结论:硫酸壳聚糖能有效抑制S180小鼠肿瘤的生长和延长EAC小鼠的生存时间,其作用机制可能与其提高机体的免疫力有关。

马氏珠母贝糖胺聚糖体外抑制HL-60肿瘤细胞作用的初步观察

目的探讨马氏珠母贝全脏器为原料提取的糖胺聚糖抗肿瘤的活性。方法用台盼蓝染色作活细胞计数,计算出药物对细胞的生长抑制率,观察马氏珠母贝糖胺聚糖对人白血病细胞株HL-60细胞的影响。结果马氏珠母贝糖胺聚糖在0.031~2.0g.L-1的不同浓度时,对HL-60细胞都有不同的抑制作用。且与5-氟脲嘧啶(5-Fu)合用,具有协同作用。结论马氏珠母贝全脏器提取物糖胺聚糖对HL-60细胞具有明显的抑制作用。

脑囊虫病患者血清NO水平及机体免疫状态的研究

为研究脑囊虫病患者血清中的一氧化氮（ＮＯ）水平与机体免疫状况的关系，用比色法检测脑囊虫病患者血清的ＮＯ水平，同时用直接ＥＬＩＳＡ检测脑囊虫病和恶性肿瘤患者血清弓形虫抗体，以健康人血清作对照。结果显示，脑囊虫病患者血清ＮＯ水平为（２７．７７±３．７７）μｍｏｌ／Ｌ，明显低于正常人组（５０．０４±６．２３）μｍｏｌ／Ｌ。脑囊虫病患者弓形虫抗体阳性率（２３．３％）明显高于正常人（１２％），与恶性肿瘤病人弓形虫抗体阳性率（２７．１％）无显著性差异。表明脑囊虫病患者有继发性免疫缺陷。