三维培养牙髓间充质细胞外泌体微小RNA表达谱分析

目的分析并比较二维(2D)与三维(3D)培养条件下人牙髓间充质细胞(DPSCs)外泌体(Exo)微小RNA (miRNA)的表达谱。方法2D与3D条件下分别培养DPSCs,提取细胞Exo,采用透射电子显微镜、蛋白质免疫印迹及纳米颗粒追踪分析等方法观察并鉴定;通过高通量测序筛选差异表达miRNA,采用Dr.Tom系统及TargetScan网站进行生物信息学分析及组织再生修复相关靶基因预测。结果 3D培养下收集的DPSC-Exo均呈现"茶托样"双层膜结构,CD63和CD9表达阳性,粒径分布符合外泌体特征,与2D培养的DPSC-Exo一致。高通量测序共计检测外泌体来源miRNA 253个,其中3D组表达222个,特有表达99个;与2D组相比,表达显著差异60个[︱log_(2)(3D/2D)︱≥1,Qvalue≤0.001]。差异miRNA主要参与的生物学过程与分子功能分别为细胞过程和结合;京都基因与基因组数据库(KEGG)通路富集分析显示在代谢通路有显著富集。miR-302的候选靶基因有成纤维细胞生长因子(FGF) 19和表皮生长因子受体等;miR-24-3p可能靶向神经元分化因子2、神经上皮细胞转化因子1、神经元分化因子1、神经元再生相关蛋白、FGF11、FGF结合蛋白3、FGF受体3、血小板衍生生长因子受体(PDGFR)β多肽、PDGFRα多肽、血管生成素、胰岛素样生长因子结合蛋白5等,以发挥组织再生修复功能。结论相比2D培养,3D培养能调节DPSC-Exo部分miRNA表达量,上调一些与再生修复相关的miRNA,3D培养可考虑作为调节外泌体应用潜能的一种手段。

丙烯腈对作业工人生殖危害的调查

丙烯腈（Ａｃｒｙｌｏｎｉｔｒｉｌｅ，简称ＡＮ）是有机合成工业中重要的单体，属高毒类。据报道丙烯腈对啮齿动物具有胚胎毒性和致畸作用〔１、２〕，但对人类生殖损伤的报道甚少。笔者在以往的基础上〔３〕，对接触ＡＮ作业工人进行扩大生殖流行病学调查，为防护和控制...

外泌体优化策略的研究进展

外泌体是一种内含多种生物活性成分的纳米级小囊泡,在组织再生、免疫调节等多方面有一定的作用,它的存在为实现无细胞疗法提供了可能,具有较高的临床转化应用前景。本文将从外泌体的分离方法、培养条件、工程化改造三个方面对当前外泌体相关优化策略进行综述,为今后外泌体深入研究及临床运用转化提供方向。