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长鳍金枪鱼多肽制备及其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用
被引量:
2
1
作者
艾杨洋
丁国芳
+4 位作者
杨最素
余方苗
唐云平
陈艳
黄芳芳
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期81-89,共9页
目的:以长鳍金枪鱼废弃物为原料提取多肽,探究其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用。方法:以H2O2诱导张氏肝细胞损伤建立细胞模型组,以相对增殖率为指标筛选长鳍金枪鱼废弃物最适酶种,通过正交试验确定最佳酶解条件。酶解产物经超滤、...
目的:以长鳍金枪鱼废弃物为原料提取多肽,探究其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用。方法:以H2O2诱导张氏肝细胞损伤建立细胞模型组,以相对增殖率为指标筛选长鳍金枪鱼废弃物最适酶种,通过正交试验确定最佳酶解条件。酶解产物经超滤、阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱方法纯化分离得到多肽,用噻唑蓝(MTT)比色法对其每步分离效果进行评价。多肽活性的评价是利用试剂盒方法测定张氏肝细胞上清液中AST、ALT、MDA、ADH和SOD的含量,倒置显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测多肽对H2O2诱导后的张氏肝细胞凋亡的影响。结果:最适酶种为胰蛋白酶,最佳酶解条件为料液比1∶3(g/mL),pH 9,加酶量900 U/g,温度45℃,时间5 h。经一系列纯化后制成多肽,命名为长鳍金枪鱼多肽。其氨基酸序列为Gly-Ala-Pro-Gly-Glu-Arg-Gly-Ser-Lys-Cys-Phe-Lys。经长鳍金枪鱼多肽作用于H2O2诱导的张氏肝细胞后,ALT、AST、ADH和MDA含量下降,SOD含量上升。通过流式细胞仪检测发现晚期凋亡细胞相比于模型组减少明显。结论:利用酶解方法提取的长鳍金枪鱼多肽对H2O2损伤的张氏肝细胞具有一定的保护作用。
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关键词
长鳍金枪鱼废弃物
多肽
H2O2损伤
张氏肝细胞
护肝
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职称材料
长鳍金枪鱼多肽的酶解制备工艺研究
被引量:
4
2
作者
艾杨洋
丁国芳
+3 位作者
杨最素
余方苗
唐云平
陈锐
《食品工业》
CAS
北大核心
2018年第10期11-14,共4页
通过酶解法制备具有对H_2O_2诱导的张氏肝细胞保护作用的长鳍金枪鱼多肽。以长鳍金枪鱼下脚料为原料,采用胰蛋白酶进行酶解,以张氏肝细胞的相对增殖率为指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定该酶的最佳酶解条件, HE染色观察张氏肝...
通过酶解法制备具有对H_2O_2诱导的张氏肝细胞保护作用的长鳍金枪鱼多肽。以长鳍金枪鱼下脚料为原料,采用胰蛋白酶进行酶解,以张氏肝细胞的相对增殖率为指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定该酶的最佳酶解条件, HE染色观察张氏肝细胞形态变化。结果表明,最佳酶解条件为:料酶解pH 7.28,酶解温度45.29℃,时间5.05 h,所得酶解产物对张氏肝细胞的相对增殖率为53.1%。HE染色显示长鳍金枪鱼多肽对H_2O_2诱导的张氏肝细胞起一定保护作用。该工艺研究为长鳍金枪鱼多肽的分离纯化及开发护肝功能食品提供试验依据。
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关键词
长鳍金枪鱼
酶解多肽
增殖率
护肝
原文传递
题名
长鳍金枪鱼多肽制备及其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用
被引量:
2
1
作者
艾杨洋
丁国芳
杨最素
余方苗
唐云平
陈艳
黄芳芳
机构
浙江海洋大学食品与医药学院/浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心
浙江省海洋水产研究所
出处
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020年第3期81-89,共9页
基金
国家自然科学基金项目(81001393)
国家海洋创新示范城市舟山项目(2016496)
+2 种基金
国家海洋计划项目(2015862)
浙江省科技厅重大专项(2013C03036)
浙江省自然科学基金项目(LS15H30001)。
文摘
目的:以长鳍金枪鱼废弃物为原料提取多肽,探究其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用。方法:以H2O2诱导张氏肝细胞损伤建立细胞模型组,以相对增殖率为指标筛选长鳍金枪鱼废弃物最适酶种,通过正交试验确定最佳酶解条件。酶解产物经超滤、阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱和反相高效液相色谱方法纯化分离得到多肽,用噻唑蓝(MTT)比色法对其每步分离效果进行评价。多肽活性的评价是利用试剂盒方法测定张氏肝细胞上清液中AST、ALT、MDA、ADH和SOD的含量,倒置显微镜观察细胞形态及流式细胞仪检测多肽对H2O2诱导后的张氏肝细胞凋亡的影响。结果:最适酶种为胰蛋白酶,最佳酶解条件为料液比1∶3(g/mL),pH 9,加酶量900 U/g,温度45℃,时间5 h。经一系列纯化后制成多肽,命名为长鳍金枪鱼多肽。其氨基酸序列为Gly-Ala-Pro-Gly-Glu-Arg-Gly-Ser-Lys-Cys-Phe-Lys。经长鳍金枪鱼多肽作用于H2O2诱导的张氏肝细胞后,ALT、AST、ADH和MDA含量下降,SOD含量上升。通过流式细胞仪检测发现晚期凋亡细胞相比于模型组减少明显。结论:利用酶解方法提取的长鳍金枪鱼多肽对H2O2损伤的张氏肝细胞具有一定的保护作用。
关键词
长鳍金枪鱼废弃物
多肽
H2O2损伤
张氏肝细胞
护肝
Keywords
T.alalunga castoff
polypeptide
H2O2 injury
Chang liver
protective effect of liver
分类号
TS254.9 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
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职称材料
题名
长鳍金枪鱼多肽的酶解制备工艺研究
被引量:
4
2
作者
艾杨洋
丁国芳
杨最素
余方苗
唐云平
陈锐
机构
浙江海洋大学食品与医药学院/浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心
浙江省海洋水产研究所
出处
《食品工业》
CAS
北大核心
2018年第10期11-14,共4页
基金
国家自然科学基金项目(81773629)
国家计划(2015GA700044)
+3 种基金
国家海洋计划项目(2015862)
浙江省科技厅重大专项(2013C03036)
浙江省自然科学基金立项(LS15H30001
LQ16H300001)
文摘
通过酶解法制备具有对H_2O_2诱导的张氏肝细胞保护作用的长鳍金枪鱼多肽。以长鳍金枪鱼下脚料为原料,采用胰蛋白酶进行酶解,以张氏肝细胞的相对增殖率为指标,通过单因素试验和响应面优化试验确定该酶的最佳酶解条件, HE染色观察张氏肝细胞形态变化。结果表明,最佳酶解条件为:料酶解pH 7.28,酶解温度45.29℃,时间5.05 h,所得酶解产物对张氏肝细胞的相对增殖率为53.1%。HE染色显示长鳍金枪鱼多肽对H_2O_2诱导的张氏肝细胞起一定保护作用。该工艺研究为长鳍金枪鱼多肽的分离纯化及开发护肝功能食品提供试验依据。
关键词
长鳍金枪鱼
酶解多肽
增殖率
护肝
Keywords
Thunnus alalunga
enzymolysis polypeptide
growth rate
liver protection
分类号
TS254.9 [轻工技术与工程—水产品加工及贮藏工程]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
长鳍金枪鱼多肽制备及其对H2O2诱导的张氏肝细胞的保护作用
艾杨洋
丁国芳
杨最素
余方苗
唐云平
陈艳
黄芳芳
《中国食品学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2020
2
下载PDF
职称材料
2
长鳍金枪鱼多肽的酶解制备工艺研究
艾杨洋
丁国芳
杨最素
余方苗
唐云平
陈锐
《食品工业》
CAS
北大核心
2018
4
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