2022年湖北Ⅰ群禽腺病毒流行病学调查及分离鉴定

禽腺病毒是全球家禽常见的传染病病原之一,目前对禽腺病毒进行流行病学调查,已给全球家禽业造成了巨大的经济损失。为了调查禽腺病毒在湖北地区的流行情况,在2021~2022年从湖北市场收集了224份鸡肝样本,为FAdV疫苗研制提供参考。基因测序结果显示:其中14株携带FAdV,Hexon L1环基因序列系统发育,12株为C型,2株为D型。在鸡肝癌细胞株(LMH)中培养并分离得到FAdV-11 HB200株,对分离物的Hexon基因进行了扩增和测序。遗传进化分析表明:FAdV-11 HB200与多个FAdV-11毒株处于同一分支。FAdV-C的流行率仍然占主导地位,相关部门应采取预防FAdV感染的措施。

抗禽腺病毒4型纤突蛋白-2的卵黄抗体的治疗效果评估

目的为研究防治禽腺病毒4型(fowl adenovirus type 4,FADV-4)的卵黄抗体的治疗效力。方法利用FADV-4纤突蛋白-2(fiber-2)亚单位疫苗对蛋鸡进行免疫,制备和纯化抗FADV-4 fiber-2的卵黄抗体后,评估该卵黄抗体不同治疗剂量、不同治疗时机对FADV-4的治疗效果。结果Fiber-2亚单位疫苗中fiber-2蛋白的空间结构预测为同源三聚体;利用该疫苗制备的卵黄抗体可用水稀释法和PEG-4000沉淀法得到初步纯化,其抗体效价可达10^(5.597)。卵黄抗体的治疗试验表明,在FADV-4感染后1 d内进行卵黄抗体治疗,鸡的存活率为100%,治愈率超过90%,且高剂量抗体治疗效果要优于低剂量;而在FADV-4感染后两天进行抗体治疗,鸡的存活率为70%,治愈率为50%,能够显著改善攻毒后的临床症状,延长鸡的存活时间,降低死亡率。结论制备的抗fiber-2卵黄抗体可以有效治疗FADV-4的感染。

一株禽腺病毒4型Fiber2蛋白单克隆抗体的制备

制备禽腺病毒4型(FAdV-4)Fiber2蛋白的特异性单克隆抗体,将重组蛋白FAdV-4 Fiber2纯化后作为免疫原免疫BALB/c小鼠,分离脾脏中的淋巴细胞,与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,筛选得到10株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株1B5F1、1B5G11、1B5C1、1B5D2、1B5E3、1B5F3、1B5E4、1B5G4、1B5A8、1B5G8,取分泌抗体水平最高的1B5F1细胞株制备腹水,利用斑点杂交(Dot blot)和间接免疫荧光试验(IFA)进行特异性检测。结果表明,成功制备10株杂交瘤细胞株;制备的腹水能与FAdV-4 Fiber2蛋白及FAdV-4攻毒后的鸡肝组织产生特异性反应,证明成功制备了FAdV-4 Fiber2蛋白特异性单克隆抗体。

氟苯尼考与磺胺间甲氧嘧啶配伍后的体外抗菌作用研究

为了考察氟苯尼考与磺胺间甲氧嘧啶配伍后对药效的影响,本试验参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)制定的肉汤稀释法,研究了氟苯尼考与磺胺间甲氧嘧啶单独使用对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌三种常见病原菌的体外抑制效果,并用棋盘稀释法验证两药联合使用后的相互影响。结果表明,氟苯尼考和磺胺间甲氧嘧啶单独使用时对三株菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为5μg/mL和160μg/mL,二者联用后的部分抑菌指数(FIC)大于0.5且小于等于1,表现为相加作用,证明二者在临床上配伍具有一定的合理性。