有机磷农药胶体金免疫层析竞争法快速检测方法的建立

目的建立检测蔬果及饮用水等样本中的氧乐果、辛硫磷、敌百虫、对硫磷等有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法并研制检测试纸条。方法N-羟基琥珀酰亚法合成有机磷人工抗原;制备乙酰胆碱酯酶抗原及纯化及其抗血清制备、纯化与标记;优化试纸条工作参数,并进行性能测试。结果抗血清效价在1∶32~1∶64之间,蛋白含量约为2 mg/mL。纯化后的多克隆抗体在相对分子质量(M r)25000和55000处出现目的条带,纯度较好;试纸条反应时间在5~10 min,样本检测限为200 ng/mL,特异性及准确性良好,试纸条有效期为6个月。结论建立了简便快速检测多种有机磷成分的胶体金免疫层析检测方法,适合大量样本的现场初筛。

多菌灵人工抗原的合成及其鼠源性多克隆抗体的制备

目的合成多菌灵人工抗原,制备多菌灵多克隆抗体并鉴定其特性。方法利用混合酸酐法引入羧基制备多菌灵半抗原。将小分子半抗原与大分子载体牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成多菌灵人工抗原和包被抗原,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对人工抗原进行鉴定。用制备的人工抗原免疫小鼠获得抗多菌灵多克隆抗体,利用间接ELISA对抗体效价以及特异性进行测定。结果成功制备多菌灵人工抗原。免疫小鼠后获得的抗体效价可达1:12800。抗体对多菌灵的半数抑制剂量(IC_(50))为0.107μg/mL,且与苯菌灵、噻菌灵的交叉反应率均<1%。结论成功获得高敏感性、高特异性的多克隆抗体,为多菌灵残留快速检测方法的建立奠定了基础。

SBHL对HeLa细胞生长抑制作用的影响

目的 :观察SBHL对HeLa细胞生长的抑制作用 ,并探讨其作用机制 .方法 :用MTT比色法观察不同浓度SBHL对HeLa细胞增殖的影响 ;用流式细胞术对细胞周期进行分析 ;用免疫组化方法观察SBHL对HeLa细胞人端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase,hTRT)基因表达的影响 .用瑞氏 姬姆萨染色法观察SBHL对HeLa细胞形态的影响 .结果 :0 .1～ 2 0 .0mg/LSBHL对HeLa细胞增殖有明显的抑制作用 ,这种抑制作用随SBHL浓度的增加而增加 ;流式细胞术对细胞周期进行分析的结果显示 ,随着SBHL浓度的增加 ,S期细胞含量逐渐降低 ,G1期细胞含量逐渐增加 ,SBHL将细胞阻滞于G1期 ,抑制DNA合成 .SBHL处理的HeLa细胞与对照组相比 ,hTRT基因的表达明显降低 ;瑞氏 姬姆萨染色结果表明SBHL可使HeLa细胞向良性分化 .结论 :SBHL明显抑制HeLa细胞生长呈浓度依赖性 .SBHL下调HeLa细胞hTRT基因的表达 ,抑制端粒酶活性 .

SBHL对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的:探讨SBHL对肿瘤的作用效果及其抗肿瘤免疫效应机制。方法:选用S180荷瘤小鼠,采用腹腔注射SBHL[10、30、50mg/(kg·d)],连续注射14天,观察肿瘤生长及SBHL对小鼠免疫功能的影响。结果:SBHL能显著抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生长。SBHL对荷瘤小鼠受抑的细胞免疫功能具有明显正向调节作用,能提高脾淋巴细胞增殖及IL-2产生能力,增强NK和LAK细胞活性。结论:SBHL能明显抑制肿瘤的生长,SBHL的免疫增强效应可能是其发挥抗肿瘤作用的重要途径。

SBHL对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:探讨澳洲茄胺盐酸盐(SBHL)对环磷酰胺处理小鼠免疫功能的影响。方法:BALB/c小鼠用环磷酰胺造成免疫抑制模型,同时尾静脉注射SBHL 7天,观察小鼠免疫器官重量,脾细胞特异性抗体的产生、血清凝集素滴度、溶血素CH50值、ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清中肿瘤坏死因子α含量的变化。结果:SBHL(40 mg/kg)尾静脉注射7天,小鼠胸腺、脾脏重量增加,ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖明显,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能显著增强,给药组小鼠血凝素滴度、溶血素CH50值、TNF-α也高于对照组。结论:SBHL能明显的改善环磷酰胺抑制的小鼠免疫功能,这可能是澳洲茄胺盐酸盐抗肿瘤的另一作用机理。

SBHL对S180荷瘤小鼠肿瘤生长及免疫功能的影响

目的探讨SBHL对肿瘤的作用效果及其抗肿瘤免疫效应机制。方法选用S180荷瘤小鼠,采用腹腔注射SBHL[103、0、50 mg/(kg.d)],连续注射10 d,观察肿瘤生长及SBHL对小鼠免疫功能的影响。结果 SBHL能显著抑制荷瘤小鼠S180肉瘤的生长。SBHL对荷瘤小鼠受抑的细胞免疫功能具有明显正向调节作用,能提高T淋巴细胞增殖及IL-2产生能力,增强NK和LAK细胞活性。结论 SBHL能明显抑制肿瘤的生长,SBHL的免疫增强效应可能是其发挥抗肿瘤作用的重要途径。

SBHL对人宫颈癌细胞凋亡作用的实验研究

目的研究澳洲茄胺盐酸盐（SBHL）对人宫颈癌细胞的增殖抑制作用和机制。方法用MTT法检测SBHL对ME180细胞增殖影响，用流式细胞技术和琼脂凝胶电泳法分析细胞凋亡、细胞周期变化，用电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果SBHL作用ME180细胞24h后，细胞存活率明显下降，而且随着澳洲茄胺盐酸盐浓度的增加，抑制作用增强（P〈0.01）；SBHL可将ME180细胞周期阻滞于G1期，诱导细胞凋亡，细胞凋亡率明显增加（P〈0.01）；细胞超微结构呈现典型的凋亡特征。结论SBHL可通过阻滞细胞周期发展发挥抑制ME180细胞增殖的作用，SBHL还可诱导细胞发生凋亡。

青蒿琥酯对HeLa细胞生长的抑制作用

目的研究青蒿琥酯对HeLa细胞生长抑制作用。方法MTT法测定青蒿琥酯对HeLa细胞增殖抑制;用透射电镜观察青蒿琥酯对肿瘤细胞形态学影响;用流式细胞仪检测肿瘤细胞周期变化和细胞凋亡率;用免疫组化法观察肿瘤细胞端粒酶活性。结果MTT实验表明青蒿琥酯作用HeLa细胞72 h后,细胞存活率明显下降,而且随着药物浓度的增加,抑制作用增强;流式细胞仪检测青蒿琥酯可引起HeLa细胞阻滞于G1期,细胞凋亡率在一定范围内与药物浓度呈正比;透射电镜观察细胞超微结构呈现典型的凋亡特征;免疫组化检测细胞端粒酶活性降低。结论青蒿琥酯可抑制HeLa细胞生长,诱导细胞发生凋亡,可降低细胞端粒酶活性。

癌迪针剂对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:研究癌迪针剂对肿瘤的作用效果及其抗肿瘤免疫效应机制。方法:选用H22肝癌荷瘤小鼠注射癌迪针剂7天后,观察荷瘤小鼠肿瘤抑制率、胸腺、脾脏指数、淋巴细胞转化功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能、TNF活性、IL-2及血清IFNα-水平。结果:癌迪针剂可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长;能提高荷瘤小鼠的淋巴细胞转化功能;可增强巨噬细胞吞噬活性和TNF活性;能提高IL-2和IFNα-水平。结论:癌迪针剂能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,增强机体的免疫功能。

SBHL对HeLa细胞c-myc,H-ras和hTRT基因表达的研究

目的观察澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc，H—ras和hTRT基因表达的影响．方法用鼠抗人c-mycMcAb，H-ras McAb和hTRTPcAb作为一抗，生物素化羊抗鼠IgG作为二抗，用免疫组化方法测定澳洲茄胺盐酸盐对HeLa细胞c-myc，H—ms和hTRT基因的表达．结果澳洲茄胺盐酸盐处理的HeLa细胞与对照组相比，c-myc，H-ras和hTRT基因的表达均明显降低（P〈0．05）．结论澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞c-myc和H-ras基因的表达，抑制细胞增殖，诱导分化；澳洲茄胺盐酸盐下调HeLa细胞hTRT基因的表达，抑制端粒酶活性，抑制细胞生长．

赤壁市结核病防治门诊查痰点存在的问题和对策

结核病是严重危害人类健康的慢性传染病。199B年，WHO（世界卫生组织）宣布“全球结核病处于紧急状态”，把结核病列为重点控制的传染病之一。1998年，WHO再次指出“遏制结核病行动刻不容缓”。痰涂片AFB（抗酸杆菌）镜检对于发现传染源、确定诊断和制定化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义，在现代结核病控制工作中起着重要作用。笔者近来一直从事痰涂片AFB镜检工作，深感实际操作中的复杂和艰辛。现将痰涂片AFB镜检方法与现存问题进行分析和探讨。

人类腺体激肽释放酶2的研究进展

以往人们一直用前列腺特异性抗原(PSA)作为前列腺癌(Pca)的标志物,但是PSA缺乏特异性,在良性前列腺增生(BPH)时PSA也会增高.尤其是PSA在4～10 ng/L范围内,就很难区分BPH和Pca.最近研究证明,人类腺体激肽释放酶2(hK2)及其相关指标对Pca的诊断更为准确,成为一种有前景的标志物.本文就hK2的生物学活性,hK2与Pca的关系,hK2的检测方法和hK2及其相关指标在Pca诊断中的应用作一综述.

SBHL对甲状腺鳞癌细胞株SW579增殖的影响及机制

目的为澳洲茄胺盐酸盐(SBHL)治疗甲状腺鳞癌提供理论依据。方法将1×10-5、5×10-5、1×10-4、5×10-4、1×10-3mol/L的SBHL作用于甲状腺鳞癌SW579细胞,分别于作用24、48、72、96 h后用MTT比色法观察增殖情况;用流式细胞仪分析细胞周期;TRAP-银染法检测端粒酶活性。结果 5×10-5～1×10-3mol/LSBHL作用后SW579细胞增殖明显受抑,呈浓度依赖性;细胞周期阻滞于G1期,随着SBHL浓度的增加,S期细胞逐渐降低,G1期细胞逐渐增加;端粒酶活性明显降低。结论 SBHL对甲状腺鳞癌SW579细胞生长具有明显抑制作用,其机制可能与下调端粒酶活性有关。

影响咽部A组溶血性链球菌检出率的因素

本文于９２年９月￣９４年４月连续对２１４例健康人群咽部Ａ组溶血性链球菌的检测。为提高链球菌的检出率，我们对不同采样方式细菌检出率做了实验，结果证明，直接接种法明显优越于其它方法，且不受采样时环境温度和运送时间的影响，适用于现场采样标本之用。

基于双重PCR技术的鹿茸及其伪品DNA指纹特征和鉴定

目的:分析鹿茸线粒体细胞色素b(Cytb)和细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因特异性,建立双重PCR技术鉴别鹿茸真伪的分子指纹特征。方法:利用碱变性法提取梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸和新西兰鹿茸的基因组DNA,应用引物设计软件Premier 5.0针对Cytb和COⅠ分别设计特异性引物(分别为Cytb 1、2和COⅠ1、2、3),采用单一及双重引物分别进行PCR扩增,筛选特异性强的引物,确定最佳PCR反应条件。结果:采用碱变性法提取的鹿茸基因组DNA片段长度为23 000bp,DNA纯度即A(260)/A(280)为1.80±0.02;应用单一引物进行PCR扩增无法鉴定鹿茸的真伪,而引物Cytb 1和COⅠ1组合后,解链温度为58℃时,梅花鹿茸(吉林、安徽)、马鹿茸均能扩增出395和525bp大小的2个片段,而驯鹿茸和新西兰鹿茸均未能扩增出相应片段;采用该提取方法及最优化的PCR反应条件,对市售样品进行检测,检测结果与实际情况完全一致。结论:双重PCR技术可从分子水平鉴别鹿茸的真伪,该方法特异性高、实用性强,且简便快捷,在鹿茸真伪鉴别方面具有较高的应用价值。

7种肉类线粒体DNA的提取及鸭源性成分检测

探讨肉类线粒体DNA(mitochondrial DNA,mt DNA)提取方法,对7种生肉中的鸭肉成分进行鉴别。应用改良盐析法和柱层析法提取肉类mt DNA,紫外分光光度计检测mt DNA的浓度和纯度,设计鸭肉cyt b特异性引物,采用PCR对7种生肉中的鸭肉成分进行鉴别。结果:两种提取肉类mt DNA的方法均能保证DNA的浓度及纯度达到PCR的要求,柱层析法成本略高于改良盐析法;鸭引物可以从7种生肉中鉴别出鸭源性成分,经过多次重复试验证明了鸭肉引物的特异性,为肉制品质量监控的应用提供了实验基础。

龙葵浓缩汁对小鼠细胞免疫功能的影响

目的了解龙葵浓缩汁对小鼠细胞免疫功能的影响.方法用3种浓度的龙葵口服液,即高剂量(3 000 mg/kg体质量),中剂量(1 500 mg/kg体质量),低剂量(750 mg/kg体质量)连续灌胃不同组别小鼠,28 d后分别采用Jerne改良玻片法进行小鼠的抗体生成细胞检测试验;MTT法进行小鼠的淋巴细胞转化实验;乳酸脱氢酶测定进行小鼠NK细胞活性测定试验.结果小鼠抗体生成细胞数、NK细胞活性在高剂量组与对照组间比较有显著性差异(P<0.05),中、低剂量组与对照组间比较无显著性差异(P>0.05);吞噬率、吞噬指数及淋巴细胞的增殖能力在低、中、高剂量组与对照组间比较均无显著性差异(P>0.05).结论高剂量的龙葵浓缩汁能明显增加小鼠的抗体生成细胞数,增强小鼠NK细胞的活性;而龙葵浓缩汁对小鼠巨噬细胞吞噬功能及对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化的能力无影响.

野战车载充电式便携B超机不间断电源的研制

目的:研制介绍一种野战流动情况下的车载充电式B超机不间断电源。方法:通过交直流转换开关,实现野外条件下B超机或其他相应医疗设备长时间供电的需求。结果:经野外测定调试,应用情况良好。结论:轻巧方便、交直流(电)两用,值得推广。

SBHL对人宫颈癌细胞ME180增殖和凋亡作用的实验研究

目的:研究SBHL对人宫颈癌细胞的增殖抑制作用和作用机理。方法:用MTT法检测SBHL对ME180细胞增殖,用流式细胞技术和琼脂凝胶电泳法分析细胞凋亡、细胞周期变化,用电子显微镜观察细胞超微结构的变化。结果:SBHL作用ME180细胞24小时后,细胞存活率明显下降,而且随着澳洲茄胺盐酸盐浓度的增加,抑制作用增强(P<0.01);SBHL可将ME180细胞周期阻滞于G1期,诱导细胞凋亡,细胞凋亡率明显增加(P<0.01);细胞超微结构呈现典型的凋亡特征。结论:SBHL可通过组织细胞周期发展发挥抑制ME180细胞增殖的作用,SBHL还可诱导细胞发生凋亡。