白头翁汤预防禽大肠杆菌病作用机制的研究

为初步探究白头翁汤(BTWT)对肉鸡大肠杆菌感染的作用靶点,本研究通过HERB2.0数据库筛选BTWT作用靶点,再利用疾病数据库Gene cards得到大肠杆菌感染的相关靶点,筛选出药物与疾病的交集靶点。利用STRING在线分析平台构建BTWT抑制大肠杆菌感染的蛋白相互作用(PPI)网络图并筛选核心靶点,进行蛋白质的GO功能和KEGG信号通路分析,对得到的核心靶点进行分子对接验证。结果显示,筛选到BTWT的有效成分95个,疾病靶点462个,药物与疾病相互作用的交集靶点25个,核心靶点22个。GO分析得到49个功能条目,包括生物过程41个(如巨噬细胞活性、免疫应答和炎症反应)、细胞组分4个(如细胞外空间、胞浆)、分子功能4个(如干扰素-γ受体结合、细胞因子活性)。KEGG信号通路分析得到11条信号通路,涉及C型凝集素受体信号通路、Toll样受体信号通路、细胞凋亡、NOD样受体信号通路等。分子对接结果显示,γ-氨基丁酸与超氧化物歧化酶1(SOD1)、秦皮素与白介素-10(IL-10)、槲皮素与IFN-γ(干扰素-γ)对接的自由能均<0。选取60只健康肉鸡,随机分为3组,20只/组,分别为健康对照组(C组)、感染组(M组)和BTWT组(PD组),C组和M组饲喂基础日粮,PD组在肉鸡基础日粮中加入10%BTWT中药液,连续饲喂7 d,M组和PD组在第8 d口服大肠杆菌O78株(1.09×108cfu),2 d后计算BTWT对大肠杆菌感染肉鸡的免疫保护率和免疫器官指数,利用ELISA试剂盒测定各组鸡血清中细胞因子、抗氧化指标的含量,光学显微镜下观察各组鸡空肠组织病变。结果显示,与M组相比,BTWT对肉鸡抵抗大肠杆菌感染具有一定的免疫保护率,保护率为20%。PD组鸡法氏囊指数和胸腺指数有所升高,但与M组差异不显著(P>0.05),脾脏指数显著降低(P<0.05);PD组鸡血清中IgA含量显著升高(P<0.05),IL-10、TNF-α和IFN-γ的含量显著降低(P<0.05);PD组鸡血清中SOD和GSH-PX水平显著升高(P<0.05),MDA水平显著降低(P<0.05),空肠的损伤情况得到缓解。以上结果表明,BTWT对肉鸡大肠杆菌感染有较好的预防作用,通过调节感染肉鸡血清中SOD、IL-10及IFN-γ的分泌水平缓解大肠杆菌感染造成肉鸡肠道的损伤,为深入研究BTWT预防大肠杆菌感染的作用机制提供了新思路。