兰州市生鲜乳质量安全监管及建议

近年来,甘肃省兰州市深入落实《乳品质量安全监督管理条例》和《奶业整顿和振兴规划纲要》,按照“抓重点、强基础、保安全、促发展”的总体思路,将奶业振兴作为促进农业增效、农民增收的支柱产业来抓。生鲜乳监管人员定期深入各县区生鲜乳收购站及广大奶牛养殖户家中。

刚地弓形虫代谢分泌抗原对山羊IFN-γ、TNF-α、IL-2和IL-4表达水平的影响

为了探索刚地弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)对山羊的免疫保护机制,将山羊随机分为6组,即E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊血清,用ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的表达水平。结果显示,各免疫组免疫后IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量分别为175.40～215.60、89.95～253.80、230.40～301.50、39.20～54.20pg/mL,而免疫前分别为14.00～18.75、30.91～42.20、10.75～18.30、20.40～24.60pg/mL,对照组分别为16.50～36.56、37.75～58.20、11.50～21.75、21.61～27.60pg/mL,免疫组在免疫后体内IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的含量明显升高,均显著高于对照组(P<0.05)。表明,E/SA可引起IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4水平的升高,说明E/SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。

刚地弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达

采用PCR技术从刚地弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因,并克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。将重组质粒转染BHK-21细胞。间接免疫荧光染色证明,质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达。Western-blot分析证实,细胞裂解液及上清样品中有1条约39.2 ku的条带,可被山羊抗刚地弓形虫超免疫血清所识别,大小与预测值相符。表明,真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。

弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接ELISA检测,小鼠免疫后产生了较高的抗体;动物保护性实验表明,虽然与对照组相比免疫组小鼠存活时间有一定的延长,但差异无显著性。结论成功构建了弓形虫SAG1重组表达质粒,SAG1蛋白疫苗诱导小鼠的免疫保护力不强。

弓形虫代谢分泌抗原对仔猪IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α表达水平的影响

通过免疫后攻毒的方法研究了弓形虫代谢分泌抗原(E/SA)免疫后对不同免疫组仔猪机体白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响.结果表明:免疫后各免疫组仔猪的IL-2、IL-4、IFN-γ含量均不同程度的升高;其中E/SA组IL-2、IL-4和IFN-γ的水平显著升高,与对照组差异显著(P<0.05),其含量分别由免疫前的105.05、105.33、67.50pg.mL-1升高到免疫后的194.03、342.50、296.50pg.mL-1;TNF-α水平变化不显著.试验证实弓形虫代谢分泌抗原疫苗能够促进仔猪IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌,并引起宿主抗弓形虫感染的免疫应答.

弓形虫代谢分泌抗原对猪T细胞亚群的影响

为了研究弓形虫代谢分泌抗原对仔猪T细胞亚群及抗体的影响,将仔猪随机分为6组,每组5只,分别为E/SA组、E/SA+CPG(未乳化)组、E/SA+CPG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CPG组及对照组。分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集仔猪外周血,用流式细胞仪对各试验组外周血中CD4+及CD8+T淋巴细胞亚群的动态变化规律进行检测,用IHA对抗弓形虫抗体水平做检测。结果显示,弓形虫代谢分泌抗原免疫仔猪后第4周,免疫组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体效价与对照组相比均有大幅度升高;感染后第1周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值较感染前有不同程度降低,感染后第2周,免疫组CD4+T细胞水平及CD4+/CD8+比值上升至免疫后水平,CD8+水平下降,感染后特异性抗体效价进一步升高。表明,弓形虫代谢分泌抗原能够提高仔猪外周血CD4+及CD8+T淋巴细胞水平和特异性抗体水平。

弓形虫GJS株表面抗原1基因的克隆及真核表达质粒的构建

根据GenBank数据库中的RH株弓形虫表面抗原1(SAG1)基因序列设计1对引物,应用PCR技术从弓形虫GJS株速殖子基因组DNA中扩增编码SAG1的基因片段.PCR产物经纯化、酶切后定向插入pcDNA3.1(+)真核表达载体,转化至大肠杆菌DH5α,经酶切及PCR鉴定后测序,并进行序列分析.结果表明:从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增出1 008 bp的特异SAG1片段,大小与预测值相符,与已知的SAG1基因核苷酸序列(GenBank登录号:S76248)的ORF和氨基酸序列的同源性均为99%.

兰州市饲料执法工作中存在的问题及建议

饲料作为畜牧业的主要投入品之一,对畜牧业的健康发展具有重要作用。饲料是动物性产品的生产原料,作为食物链的上游,饲料安全情况直接影响畜禽产品的质量安全。饲料质量安全直接影响畜产品的质量安全和人畜健康,近年来,随着《饲料及饲料添加剂管理条例》《饲料质量安全管理规范》等相关法律法规的严格落实,甘肃省兰州市的饲料质量安全监管工作不断加强,饲料质量安全水平不断提高,饲料行业健康发展。笔者对兰州市饲料质量安全监管工作中存在的突出问题进行深入分析,并提出建议,以期为进一步加强该地区饲料质量安全管理,提高该地区饲料产品质量安全水平提供理论依据。

某车载雷达在非固定阵地的防雷分析

该文件对某雷达车处在非固定阵地的防雷进行分析,确定了采用单只避雷针防护直击雷的保护措施及防感应类的措施。

水景在商业景观中的应用

环境设计中的一个重要组成部分就是商业景观设计,商业景观设计中需要考虑的内容包括一切同人们生活息息相关的建筑物或是植物等。其中越来越受设计师注重的就是水的应用,水景设计是景观设计的一个重要元素,好的水景设计能够打造更高品质的商业环境。对水景设计进行了简单介绍,分析了商业景观的设计特点,最终探讨了水景在商业景观中的应用。

日粮中添加蛋氨酸锌对奶牛生产性能和相关生化指标的影响

选择16头泌乳期的中国荷斯坦奶牛随机分成4组,其中一组作为对照组,在各试验组奶牛日粮中分别添加250、500、750 mg/kg蛋氨酸锌,研究其对奶牛生产性能和相关生化指标的影响。结果表明:试验组(250、500、750 mg/kg)比对照组产奶量分别提高17.90%、16.40%和14.81%,均差异显著(P<0.05),但各试验组间无显著差异(P>0.05);各组间乳脂、乳蛋白含量呈增加趋势,但差异不显著(P>0.05),250、500、750 mg/kg组的乳中体细胞数分别比对照组降低了66.31%、72.81%和89.38%(P<0.01);试验组的平均乳锌含量分别比对照组提高了18.03%、35.41%和66.56%,各试验组乳锌含量极显著提高(P<0.01)。

居住区儿童活动场地设计探析

随着人们生活水平的提高,对居住环境也提出了更高的要求,进一步完善儿童活动场地设计成为城市居住区规划设计的重要内容。儿童活动场地设计要注重对场地的选择、布置以及内容设置和器具选择。本文将从4个方面探讨了居住区儿童活动场地的设计。

风载荷计算中的参数取值分析

本文通过对风载荷计算公式的简述,分别对风载荷计算公式中的各个参数进行解释,并对各个参数的取值进行分析,为工程设计时风载荷计算提供一定的参考价值。

城市商业步行街人性化设计探究

城市商业步行街是城市公共空间构成的主要元素之一,还是城市快速发展的重要体现形式,目前已经成为政府与市民的重点关注对象。城市商业步行街发展的根本目的是为展现市民良好的道德意识与精神面貌,并在一定程度上提升市民的素质和品味,从而实现人与空间及环境之间的有效融合,最终体现以人为本的设计核心。

弓形虫疫苗的研究进展

结合国内外对弓形虫疫苗的最新研究结果,对各种弓形虫疫苗(包括全虫疫苗、排泄分泌抗原疫苗、基因工程疫苗、核酸疫苗、重组活载体疫苗)及其优缺点进行了综述,旨在为有效控制弓形虫病提供参考。

山羊免疫弓形虫代谢分泌抗原后的免疫应答

将山羊随机分为6组,即E/SA组、E/SA+CpG组(未乳化)、E/SA+CpG组、E/SA+IL-2组、E/SA+IL-2+CpG组、对照组,每组3只,分别于免疫前、免疫后第2周、免疫后第4周、感染后第1周及感染后第2周采集山羊外周全血及涂血片,IHA法检测抗体滴度的动态变化;ELISA法检测IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4的表达水平;ANAE染色法检测T淋巴细胞的动态变化。结果显示,免疫后各免疫组的IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4及T淋巴细胞水平显著高于对照组(P<0.05),各免疫组的抗体水平均高于对照组。结果表明,E/SA可引起IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、T淋巴细胞及抗体水平的升高,说明E/SA免疫后可引起山羊较强的细胞免疫和体液免疫应答。

弓形虫GJS株pcDNA3-MIC3核酸疫苗的研究

根据GenBank中MIC3基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因片段,克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定。重组质粒pcDNA3-MIC3肌肉注射免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测血清特异抗体;经腹腔攻击感染弓形虫GJS株速殖子,观察小鼠的生存时间。结果成功构建了pcD-NA3-MIC3质粒;免疫组小鼠血清检测到特异性抗体;攻击感染后免疫组小鼠平均存活时间较对照组明显延长。表明该核酸疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。

弓形虫GJS株致密颗粒6基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达

根据GenBank数据库中弓形虫RH株GRA6基因序列设计1对引物,采用PCR技术从弓形虫GJS株基因组DNA中扩增GRA6基因,导入真核表达载体pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO,转化大肠杆菌DH5α,经酶切、PCR及测序鉴定,将重组质粒转染BHK-21细胞。GFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,通过Western-blot分析,细胞裂解液中有一条约52 ku的条带,可被山羊抗弓形虫超免疫血清识别,大小与预测值相符。表明真核表达质粒pcDNA3.1/CT-GFP-TOPO-GRA6中的GRA6基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性。