KLK8通过调节EGF对结直肠癌细胞凋亡的影响及其机制

背景与目的:结直肠癌是中国常见的消化道恶性肿瘤之一。组织激肽释放酶相关肽酶8(kallikrein-related peptidase 8,KLK8)是一种丝氨酸蛋白酶,其异常表达对多种肿瘤的发生、发展具有重要作用,但其对结直肠癌细胞凋亡的影响鲜有报道。表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)可通过多种机制抑制细胞凋亡,在肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。探讨KLK8通过调节EGF对结直肠癌细胞凋亡的影响及其机制。方法:采用GEO芯片数据集GSE21815、GSE37182和GSE71187分析结直肠癌组织中KLK8的表达水平。采用KLK8质粒和KLK8 siRNA构建结直肠癌细胞系RKO和SW480细胞的KLK8过表达稳定转染细胞株和KLK8敲低细胞株,采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测过表达前后结直肠癌细胞的凋亡。以癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库为基础,采用基因集富集分析法(gene set enrichment analysis,GSEA)下的“GO”基因集对KLK8高表达和低表达的结直肠癌组织进行基因表达分析。采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测过表达KLK8对EGF蛋白水平的影响。利用表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)siRNA检测EGFR敲低前后对RKO和SW480细胞凋亡的影响。结果:采用GEO芯片数据集GSE21815、GSE37182和GSE71187分析发现,KLK8在结直肠癌组织中表达升高。采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术发现,过表达KLK8的RKO和SW480细胞凋亡减少,敲低KLK8结直肠癌细胞凋亡增多。采用GSEA分析发现,KLK8高表达与细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的分解、表皮发育密切相关。采用ELISA法检测显示,在过表达KLK8的RKO和SW480细胞上清液中,EGF的表达明显升高。随后在过表达KLK8的RKO和SW480细胞中敲低EGFR,发现细胞凋亡明显增多。结论:KLK8可抑制结直肠癌细胞的凋亡,其可能通过促进EGF蛋白的表达调节结直肠癌细胞的凋亡,从而促进结直肠癌的进展。

我国环境监测技术存在的问题及对策探讨

近些年来,我国环境监测技术体系不断完善,与发达国家之间的差距也在逐渐减少,但是环境监测技术仍然存在许多问题,制约着其进一步的发展和完善。文章主要分析了环境监测技术的现状和问题,并就未来的发展对策和发展趋势进行了展望。

土壤底质样品全量分解法改进

深入探讨了改进的土壤底质样品全量分析法，用酸量仅为国标法的1/5，分解时间170～190min，是国标法的1/2，分解效果符合国标全量分解的要求。

β-葡聚糖引起的训练免疫和LPS引起的免疫耐受在表观遗传和代谢水平的异同

脓毒症是机体对感染反应失调引起的危及生命的器官功能障碍。β-葡聚糖(BG)引起的训练免疫表现为病原体二次入侵时,固有免疫细胞可产生更快更强的固有免疫反应来清除病原体。而脂多糖(LPS)引起的免疫耐受则表现为在病原体二次入侵时,免疫细胞反应低下或无反应,无法清除病原体。二者在表观遗传修饰和代谢等各个方面息息相关。作为固有免疫反应的重要组成部分,单核/巨噬细胞在训练免疫和免疫耐受的形成过程中发挥重要作用。本综述通过比较训练免疫和免疫耐受发生时,单核/巨噬细胞在表观遗传修饰和代谢方面的异同,进而从表观遗传和代谢水平阐述BG对机体脓毒症后免疫耐受的作用,以期寻求利用BG逆转免疫耐受的表观遗传学基础,为临床治疗脓毒症免疫耐受提供新靶点。

上皮-间质转化诱导转录因子在肺癌诊断和预后预测中的作用

背景与目的:上皮-间质转化诱导转录因子(epithelial-mesenchymal transition-inducing transcription factor,EMTTF)可调节肿瘤增殖、转移和肿瘤干细胞活化,在肺癌远处转移和复发中起重要作用,拟通过公共数据库来分析EMT-TF用于肺癌早期诊断及治疗方面的前景。方法:应用Oncomine和GEPIA数据库分析EMT-TF在肺癌组织及正常组织间的表达差异,及其与肺癌肿瘤分期的相关性;随后,使用Kaplan-Meier Plotter分析EMT-TF表达量与肺癌预后的关系;最后,通过STRING和Mentha数据库分析EMT-TF间的蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络及与之相互作用的分子。结果:肺癌组织Twist家族BHLH转录因子1(Twist family BHLH transcription factor 1,Twist1)表达明显增加,且其表达量越高,肺癌病理分期越重、预后越差;锌指E盒同源结合蛋白1(zinc finger E-box binding homeobox 1,ZEB1)和ZEB2在肺腺癌和肺鳞癌中表达降低,并与预后不良密切相关;Snail超家族锌指转录因子2(Snailfamilyzincfinger2)在肺癌中的表达水平增加,和肺癌临床分期具有明显相关性,但和肺癌的预后没有相关性。结论:Twist1、SNAI2、ZEB1和ZEB2在肺癌中的表达量和正常组织不同,Twist1和SNAI2的表达量与肿瘤的分期及预后相关,ZEB1和ZEB2在肺癌中表达量降低与肺癌患者的预后不良相关。因此,Twist1和SNAI2可能是肺癌诊断和研究潜在的生物标志物,ZEB1和ZEB2可作为肺癌预后的预测分子。

右美托咪定和米非司酮对创伤后应激障碍大鼠恐惧记忆的影响及机制

目的探讨右美托咪定、米非司酮及两者联合使用对PTSD模型大鼠恐惧记忆的影响及其机制。方法选取雄性SD大鼠40只，分为5组，分别为对照组（C组）、PTSD组（P组）、右美托咪定组（D组）、米非司酮组（M组）和右美托咪定、米非司酮联合使用组（U组），每组8只。通过条件性恐惧记忆实验（fear conditioning test，FC）测定大鼠的恐惧记忆，高架十字迷宫实验测定大鼠的焦虑状态，通过酶联免疫吸附法测定大鼠血清皮质酮（corticosterone，CORT）含量，免疫印迹法测定大鼠海马脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor，BDNF）及其特异性受体TrkB的水平。结果与P组比较，D组[（32．29±8．09）％]、M组[（33．33±8．21）％]、U组[（9．38±3．31）％]的恐惧记忆明显降低（P〈0．05）；焦虑样行为明显改善（P〈0．05）；D组（0．65±0．04）、M组（0．71±0．04）、U组（0．79±0．07）海马BDNF的表达上调（P〈0．05），D组（0．66±0．04）、M组（0．67±0．05）、U组（0．86±0．03）海马TrkB的表达也上调（P〈0．05）；D组[（37．65±12．37）μg/L]、U组[（59．10±5．23）μg/L]的血清CORT含量降低（P〈0．05），M组无明显变化。结论右美托咪定和米非司酮以及两者合用均可以促进PTSD大鼠恐惧记忆的消退，其机制可能与上调海马BDNF及其特异性受体TrkB的表达有关。

夏天结束了

夏天真是个神奇的季节。似乎一切相遇都在热气腾腾的夏天,一切的分别也都在炙热无比的夏天,我们在夏天和一些人说“再见”,也和另一些人说“你好”。遇见阿堃的那年夏天,我只有17岁。