猪细小病毒HN-2011株VP2基因的克隆及序列分析

根据GenBank中登录的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列设计引物,扩增HN-2011河南分离株的VP2基因片段,并将其克隆到pMD 18T载体中。序列分析结果表明,HN-2011分离株VP2基因长度为1 740bp,编码580个氨基酸。利用MAGE 5.0软件绘制PPV系统发育进化树,结果显示,PPV毒株可以划分为4组,我国的PPV毒株主要集中在A和B两组,仅JY毒株位于C组;PPV VP2蛋白3维结构显示,氨基酸变异的多态性位点主要集中在病毒衣壳蛋白的表面。以上遗传进化关系表明,PPV HN-2011株是我国PPV的流行毒株。

表达CSFV E2蛋白重组AcNPV载体的构建

利用基因重组技术成功构建两株含猪瘟兔化弱毒株E2基因的重组苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcNPV),重组病毒能够在昆虫细胞中分泌表达CSFV E2蛋白。将重组病毒注射入家蚕蛹内,于注射后第7天收获蚕蛹血淋巴并进行Western-blot鉴定目的蛋白的表达。结果显示,重组病毒在家蚕蛹中成功表达了CSFV E2蛋白。本研究为进一步开发猪瘟亚单位疫苗和诊断试剂盒用抗原提供了新的途径。