重组猪干扰素α的纯化工艺研究

[目的]研究重组猪干扰素α的纯化工艺,为进一步研究该蛋白的分子结构及rPoIFN-α标准品的制备奠定基础。[方法]将含重组菌E.coliBL21诱导表达后得到的粗制rPoIFN-α,分别用2种方案进行纯化。方案1,依次用GST亲和层析法、DEAE阴离子交换法及分子筛法层析三步法进行纯化;方案2,依次用GST亲和层析和分子筛法层析两步法进行纯化。纯化结果用SDS-PAGE及Western-blot进行纯度检测及鉴定。[结果]诱导表达后的表达产物经SDS-PAGE检测,发现在45Kd分子量处有目的条带,Western-blot检测有特异性条带。通过两步法纯化后的rPoIFN-α纯度达96%,蛋白得率为42.8%,三步纯化纯度为98.8%。[结论]两步法得到的蛋白纯度非常接近三步法,但与三步法相比工艺更为简单方便。

新城疫病毒在鸡胚中增殖影响因素探讨

目的探讨新城疫病毒(NDV)Ⅱ系弱毒株在鸡胚内增殖产生血凝素的最佳条件。方法将NDV按一定浓度稀释接种到鸡胚内孵育48～72h,收获鸡胚尿囊液,测定血凝效价。结果选择9～11日龄鸡胚,种子病毒稀释10-2～10-3、接种剂量为0.2～0.3ml;在36℃培养48～72h时,其鸡胚尿囊液量多且血凝效价高。弱毒系产生的NDV血凝效价高于强毒系和C30克隆系病毒。鸡胚培养较鸡成纤维细胞培养产生的NDV血凝效价高。结论鸡胚的病毒接种量和孵育温度对NDV的血凝效价的影响很大,在研究NDV的血凝能力时应注意到这些问题。

重组猪干扰素α1冻干粉针剂在猪体内的药代动力学研究

为研究重组猪干扰素α1(rPoIFN-α1)冻干粉针剂在猪体内的药代动力学特征,本研究将实验猪随机分为3组:分别静脉、肌肉和皮下注射rPoIFN-α1 1.0×107IU,每组设立对照组,于注射后间隔不同时间采血,采用细胞病变抑制法测定其血清样品中rPoIFN-α1的效价。结果表明,肌肉注射组和皮下注射组药动学特征符合一室开放模型,呈一级动力学消除,血药峰时间(Tmax)分别为2.872±0.314 h和4.000±0.539 h,消除半衰期(T1/2)分别为6.236±0.551 h和6.644±0.751 h,血药峰浓度(Cmax)分别为3.980±2.875×104IU/L和1.080±0.986×104IU/L。静脉注射组符合二室开放模型,呈一级动力学消除,分布半衰期(T1/2α)为0.136±0.021 h,消除半衰期(T1/2β)为5.195±0.351 h,Cmax值为6.380±0.546×104IU/L。rPoIFN-α1静脉、肌肉和皮下注射组清除率分别为0.930±0.132 L/h、0.677±0.228 L/h和0.879±0.210 L/h。与静脉注射组相比,肌肉注射组的生物利用度为47.82%,皮下注射组的生物利用度为35.09%。本实验结果提示这3种rPoIFN-α1的注射方法在猪体内吸收、消除较快,具有线性动力学特征。rPoIFN-α1肌肉注射给药的生物利用度高于皮下注射组,消除半衰期比静脉注射组延长,可以作为替代静脉注射的一种方便和安全给药途径。

盐酸格拉司琼氯化钠注射液细菌内毒素检测的研究

目的确立细菌内毒素检查盐酸格拉司琼氯化钠注射液的热原。方法应用鲎试剂检查盐酸格拉司琼氯化钠注射液中的热原,考察盐酸格拉司琼氯化钠注射液对细菌内毒素检查法的干扰作用。结果盐酸格拉司琼氯化钠注射液稀释2倍,对细菌内毒素检查法无干扰作用。结论选用鲎试剂,用细菌内毒素检查法行替盐酸格拉司琼氯化钠注射液热原检查是可行的。

神经外科护士对患者身体约束的知信行现状调查

目的了解神经外科护士对患者身体约束的知信行现状。方法采用身体约束知信行问卷对180名神经外科护士进行调查,分析护士对患者身体约束的知识、态度、行为得分情况。结果180名护士的患者身体约束知识问卷得分为(12.40±1.90)分,身体约束态度问卷得分为(34.53±3.22)分,身体约束行为问卷得分为(52.98±5.77)分,均处于中等水平。不同年龄、不同临床工作年限护士的患者身体约束态度问卷得分及不同学历护士的患者身体约束知识问卷得分比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论神经外科护士对患者身体约束的知信行水平亟待提高,应加强对护士的患者身体约束的知识、行为培训,重视人文关怀理念的培养,以降低身体约束对患者造成身心伤害。

神经外科护士职业倦怠与睡眠质量的相关性研究

目的了解北京市某三级甲等医院神经外科护士的职业倦怠与睡眠质量现状,并分析其相关性,为制订相关的干预措施提供依据。方法采用便利抽样法,于2020年3—4月选取首都医科大学宣武医院神经外科的150名护士作为研究对象。采用一般资料调查表、中文版M氏职业倦怠量表和匹兹堡睡眠质量指数(PQSI)量表进行调查,采用Pearson相关分析方法分析神经外科护士职业倦怠感对睡眠质量的影响。本研究共发放问卷150份,回收有效问卷149份,有效回收率为99.3%。结果神经外科护士职业倦怠量表情感衰竭维度得分为(22.79±7.08)分,处于中度倦怠;去人格化维度得分为(8.17±3.63)分,处于中度倦怠;低个人成就感维度得分为(19.09±6.04)分,处于高度倦怠。神经外科护士PSQI总分为8.0(4.5,12.0)分,睡眠质量差的护士83名(55.7%,83/149)。神经外科护士职业倦怠中的情感衰竭与PSQI总分呈正相关(r=0.356,P<0.01)和去人格化维度与PSQI总分呈正相关(r=0.180,P<0.05),低个人成就感维度与PSQI总分呈负相关(r=-0.120,P<0.05)。多重线性回归分析结果显示,PSQI总分、工作年限是情感衰竭维度的影响因素(P<0.05),PSQI总分、每周加班时间是去人格化维度的影响因素(P<0.05)。结论神经外科护士职业倦怠程度处于中高水平,普遍存在不同程度的睡眠问题,职业倦怠程度越高,睡眠质量越差。

神经外科护士健康促进生活方式与睡眠质量相关性研究

目的了解神经外科护士的健康促进生活方式现状,探讨睡眠质量对其健康促进生活方式的影响。方法采用便利抽样法,于2020年3—4月选取首都医科大学宣武医院神经外科的150名护士作为研究对象,采用一般资料调查表、匹兹堡睡眠质量指数(PQSI)和健康促进生活方式量表(HPLP-Ⅱ)进行调查。本研究共发放问卷150份,回收有效问卷149份,问卷有效率为99.3%。结果神经外科护士的HPLP-Ⅱ总分为(128.07±20.63)分,健康促进生活方式处于一般水平。PSQI总分为8.0(4.5,12.0)分,睡眠质量差的护士占55.7%(83/149)。神经外科护士的HPLP-Ⅱ总分与PSQI总分呈负相关(r=-0.393,P<0.01)。多重线性回归分析结果显示,PSQI总分、工作年限是健康促进生活方式的影响因素(P<0.05)。结论神经外科护士健康促进生活方式处于一般水平,普遍存在睡眠质量问题,健康促进生活方式越好,睡眠质量越好。建议采取相应的干预措施改善神经外科护士的睡眠质量,从而促进其保持健康的生活方式。