腺苷脱氨酶抑制剂快速筛选模型的建立

目的建立腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)抑制剂的快速筛选模型。方法采用ADA酶,以腺苷为底物,2'-脱氧助间型霉素作为抑制剂验证反应体系,通过紫外分光光度法检测,优化反应条件,并对248种中药提取物及其内生菌发酵产物进行筛选。结果建立了最佳模型方案为:p H 7.5的PBS缓冲液体系,底物浓度为腺苷200μg·m L?1,ADA酶浓度55 IU·m L?1,连续检测腺苷在265 nm下OD值动态变化情况。此模型可以用于ADA酶抑制剂的快速筛选,且基于此模型共筛选获得23个有一定活性的粗提物。结论本实验建立的体系可以为ADA酶抑制剂的筛选提供简单易行、稳定、可靠的研究平台。