维氏气单胞菌拮抗菌株J2-2的筛选、鉴定与效果评价

为筛选对维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)有潜在抑菌作用的菌株,本研究从湖北公安县泥鳅养殖池塘底泥中分离一株细菌J2-2,对其特性进行了研究,并对抑菌活性物质进行了初步分析。结果显示:菌株J2-2为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens),具有抑菌广谱性,对米尔伊丽莎白菌(Elizabethella milieri)、嗜水气单胞菌(A.hydrophila)等6种水产病原菌的抑菌直径在9.6~29.5 mm。菌株J2-2的抑菌物质具有较好的酸碱稳定性、热稳定性和蛋白酶K处理的稳定性。电镜结果显示菌株J2-2的发酵产物对维氏气单胞菌的细胞膜结构具有破坏作用。通过LC-MC分析该拮抗细菌可产生至少15种不同的脂肽类化合物如杆菌霉素等。药敏试验结果显示,菌株J2-2对氨苄西林、青霉素具有耐药性,对克林霉素中度敏感,对大多数抗生素高度敏感。

一株好氧反硝化细菌的分离鉴定及其脱氮性能研究

【目的】旨在为净化富氮养殖水体筛选一株高效的好氧反硝化细菌。【方法】从虾池底泥和水样中通过微生物富集分离的方法筛选得到一株好氧反硝化细菌,并根据形态学特征和16S rDNA序列分析的结果,对菌种进行初步鉴定和利用PCR技术对反硝化功能基因进行扩增,通过单因素试验对菌株ZY-F8的脱氮条件(碳源、温度、pH)进行优化,最后研究菌株在富氮养殖水中的反硝化能力。【结果】从虾池中分离出的好氧反硝化细菌(ZY-F8)初步鉴定为斯图泽里单胞菌(Stutzerimonas stutzeri),功能基因nirS和napA在菌株ZY-F8体中被成功扩增出,说明菌株ZY-F8能在有氧条件下进行脱氮作用。菌株ZY-F8在温度为30℃、碳源为柠檬酸钠、初始pH为7.0的培养条件下生长和脱氮效果最佳,对硝氮的去除率高达99%以上,亚硝态氮的累积量均在0.0025 mg/L左右。【结论】菌株ZY-F8在处理养殖污水中表现出良好的反硝化性能,在脱氮工艺中具有良好的应用前景。

稻田小龙虾生态养殖模式的效益比较

[目的]比较稻田生态养殖小龙虾与传统养殖小龙虾模式的效益,探索稻田养虾的科学模式。[方法]2020—2022年,项目组分别在湖北潜江、洪湖、监利和公安4个市(县)选择新型农业经营主体作为具体实施单位,组织开展了稻田生态养殖小龙虾与传统人工养殖小龙虾的对比试验,比较不同养殖模式下的经济效益和生态效益。[结果]稻田生态养殖小龙虾比传统人工养殖小龙虾净收益高出27060.00元/hm^(2);化学需氧量低7.82 mg/L,水体铵态氮(NH_(4)^(+)-N)含量低2.74 mg/L,水体总磷(TP)含量低0.17 mg/L,水体总氮(TN)含量低7.26mg/L。[结论]稻田生态养殖小龙虾模式相比传统模式,节省了用工、用药、用肥成本,具有显著稳定的经济效益和生态效益。

斑点叉尾暴发性败血症病原的分离与鉴定

从3尾表现出血症状的患病斑点叉尾鱼回(Ictalurus Punctatus)体内各分离出一株病菌,测定结果显示致其急性死亡的致病菌为温和气单胞菌(Aerom onas sobria),慢性死亡的致病菌分别为嗜水气单胞菌(A.hydrophila)和温和气单胞菌(A.sobria)。药敏试验结果表明:3株菌对广谱抗生素如氨苄青霉素、青霉素、先锋霉素Ⅵ和红霉素等已产生耐药性,而对菌必治、头孢肤肟和复达欣等高度敏感;菌株Jh-1和菌株Yh-3对复方新诺明、四环素、氟哌酸和丁胺卡那霉素高度敏感,而菌株Jh-2却低度敏感;环丙沙星和诺氟沙星对3株致病菌均具较好的抑菌、杀菌作用。

不同开口饵料对泥鳅仔鱼成活率和生长的影响

采用5种不同的开口饵料(蛋黄、轮虫、豆浆、水蚯蚓和奶粉)对泥鳅(Missgurnus arguillicaudatus)进行了开口饵料的选择试验。经20d培育,结果表明,投喂轮虫和水蚯蚓的2组泥鳅仔鱼成活率较高,分别为55.23%和53.89%,显著高于其他3组;轮虫组泥鳅仔鱼的生长速度最快,其全长为18.70mm,体重为4.4429mg。其次为水蚯蚓组,其全长为13.45mm,体重为2.1095mg。所以轮虫是泥鳅最佳的开口饵料。

温度对泥鳅受精卵孵化和仔鱼活力的影响研究

[目的]了解温度对泥鳅仔鱼孵化和仔鱼活力的影响。[方法]在不同温度(18、21、242、73、0和33℃)下,研究泥鳅受精卵的培育周期、孵化周期、孵化率和畸形率,对初孵的泥鳅仔鱼进行耐饥饿试验,测定其不投饵存活系数(SAI)。[结果]当温度为18～33℃时,泥鳅受精卵的培育周期和孵化周期随温度的升高而缩短。当温度为18℃时,泥鳅受精卵的培育周期和孵化周期最长,分别为39.43和10.13 h。当温度为21～27℃时,受精卵孵化率达80%以上,且初孵仔鱼的畸形率较低。当温度为18～30℃时,初孵仔鱼在24 h和48 h存活率都相对较高。不投饵存活系数(SAI)随温度的增长呈先升后降的变化趋势。当温度为24℃时,仔鱼的SAI值最高(27.01)。[结论]泥鳅受精卵孵化的适宜温度为21～27℃,仔鱼生存的适宜温度为21～24℃。

加州鲈维氏气单胞菌拮抗菌的筛选

为筛选出对维氏气单胞菌(Aeromonas Veronii)有拮抗效果的最优菌株,本试验从湖北荆州太湖加州鲈池塘底泥中分离获得一株细菌C2-1,对其进行全基因组测序,并研究其生防作用机制。结果表明,细菌C2-1为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),具有广谱抑菌性,对希瓦氏菌(Shiva's bacteria)、溶血链球菌(Streptococcus hemolysis)等多种水产病原菌的抑菌直径达18.57~25.28 mm。菌株C2-1具有较高的酸碱稳定性且对温度适应范围较为广泛。扫描电子显微镜镜观察发现细菌C2-1的发酵产物对维氏气单胞菌具有破坏效果。液质联用(LC-MS)分析该细菌包含多种不同的脂肽类活性物质,如伊枯草菌素等。研究发现,贝莱斯芽孢杆菌C2-1是防治维氏气单胞菌的潜力菌株,对维氏气单胞菌具有较好的抑制作用,且应用前景良好。

水温对泥鳅仔鱼饥饿耐受力的影响

以人工繁殖的泥鳅(Missgurnus arguillicaudatus)初孵仔鱼为研究对象,研究了不同水温(23、25、27、29、31℃)对泥鳅仔鱼的开口时间、初次摄食率及不可逆点的影响。结果表明,在水温23～29℃时,泥鳅仔鱼的开口时间随水温的升高而提前(出膜后2～3d),最高初次摄食率均出现在开口后的第3天,均为100%;而水温31℃时,泥鳅仔鱼的开口时间在出膜后的第3天,最高初次摄食率出现在开口后的第2天,低于100%。水温23、25、27、29、31℃时泥鳅仔鱼的不可逆点出现时间分别为出膜后的第8.8天、第8.3天、第8.1天、第6.8天和第6.1天。因此,泥鳅仔鱼发育的最适水温为25～27℃。

3种单糖对大鳞副泥鳅精子活力的影响

通过观察精子的快速运动时间和寿命,研究了不同浓度梯度的葡萄糖、半乳糖、果糖溶液对大鳞副泥鳅(Paramisgurnus dabryanus)精子活力的影响。结果表明,在葡萄糖、半乳糖、果糖溶液中,大鳞副泥鳅精子快速运动时间和寿命的变化规律基本一致,即低浓度时精子活力较强,超过一定浓度精子的运动开始被抑制。大鳞副泥鳅精子分别在0.8%葡萄糖溶液、0.5%半乳糖溶液、0.3%果糖溶液中的活力最强,寿命最长。其中,在半乳糖溶液浓度为0.5%时,大鳞副泥鳅精子具最佳活力,其快速运动时间和寿命时间的最大值分别达70s和102s。因此建议在生产实践中采用0.5%的半乳糖作为大鳞副泥鳅的精子激活剂。

斑点叉尾鮰暴发性败血症的免疫预防研究

通过试验确定了嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)全菌苗的福尔马林安全灭活浓度、最佳灭活温度及时间,并选取最佳灭活方式,制备了全菌苗F-1、F-2和F-3。采用所得全菌苗免疫斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus),测定了其对斑点叉尾鮰的免疫原性。经注射接种28d后,受免斑点叉尾鮰血清中凝集抗体效价都有显著增加。受免斑点叉尾鮰血液白细胞吞噬活性的测定结果表明,3个免疫组的吞噬百分比和吞噬指数都显著地高于对照组。这表明,采用福尔马林灭活的全菌苗F-1、F-2和F-3,均能在28d内刺激斑点叉尾鮰产生较强的免疫应答。

土壤湿度及稻草基质对宽体金线蛭繁殖性能的影响

【目的】探明土壤湿度及稻草作为基质对宽体金线蛭繁殖性能的影响,为促进宽体金线蛭规模化养殖发展提供参考依据。【方法】将规格整齐的2龄性成熟且具有生殖环带的宽体金线蛭亲本放养到30%、40%、50%、60%和70%等5个土壤湿度及40%湿度稻草基质的养殖箱中,分别观察其亲本存活率、产茧数、卵茧规格、卵茧孵化率及孵化量情况。【结果】经过30 d的繁殖周期,不同土壤湿度下的宽体金线蛭亲本存活率、产卵茧数和产茧率存在显著差异(P<0.05,下同),但所产卵茧规格无显著差异(P>0.05,下同)。其中,土壤湿度为60%时,亲本存活率、产卵茧数及产茧率最高,土壤湿度为30%时最低。通过拟合的回归方程计算得出:土壤湿度为58.80%时,卵茧孵化率最高,达95.56%;土壤湿度为57.61%时,卵茧孵化量最高,为27.59尾。40%湿度稻草基质条件下的宽体金线蛭亲本存活率、产卵茧数和产茧率均显著低于相同湿度土壤基质的结果;在两种基质条件下,宽体金线蛭卵茧的孵化率和孵化量也无显著差异,孵化率均高于90.00%,孵化量为20.67~22.00尾。【结论】土壤湿度对宽体金线蛭的繁殖性能和卵茧孵化效果影响显著,但对所产卵茧规格无显著影响,其中以土壤湿度保持在60%时的效果最佳。

阿维菌素对黄鳝及棘头虫的毒性影响

采用常温静水试验法和体外杀虫试验法分别进行阿维菌素对黄鳝(Monopterus albus)和黄鳝体内棘头虫的急性毒性试验。结果表明,阿维菌素对黄鳝的24、48h的半致死浓度(95%可信区间)分别为0.0914mg·L-1(0.0799～0.1046mg·L-1)和0.0745mg·L-1(0.0655～0.0848mg·L-1),96h半致死浓度(95%可信区间)为0.0678mg·L-1(0.0598～0.0770mg·L-1),安全浓度(Sc)为0.0068mg·L-1。阿维菌素对棘头虫24、48h的半致死浓度(95%可信区间)分别为0.0539mg·L-1(0.0474～0.0613mg·L-1)、0.0452mg·L-1(0.0407～0.0526mg·L-1),96h半致死浓度(95%可信区间)为0.0411mg·L-1(0.0362～0.0467mg·L-1),安全浓度(Sc)为0.0041mg·L-1。在养殖黄鳝过程中防治棘头虫时,阿维菌素的使用浓度可以选择在0.0539～0.0678mg·L-1范围内。

黄鳝体内寄生虫感染的初步研究

对黄鳝体内寄生虫感染情况进行了研究。结果表明,黄鳝体内寄生虫主要为毛细线虫和新棘衣棘头虫;毛细线虫的感染率为18.6%～76.2%,平均54.2%,感染强度为1.2～5.1,平均4.3;新棘衣棘头虫的感染率为27.9%～86.5%,平均70.8%,感染强度为6.8～22.3,平均17.1,两种寄生虫对黄鳝的感染率和感染强度均随黄鳝体长的增大而增大。新棘衣棘头虫和毛细线虫在黄鳝体内呈聚集分布,但其寄生对黄鳝的肥满度没有产生明显的影响。

黄鳝性转变与体重、年龄的关系

研究了黄鳝(Monopterus albus Zuiew)性转变与体重、年龄的关系。结果表明,黄鳝性别与体重关系密切,体重在50.0g以下的黄鳝,均为雌性个体;体重在50.1～75.0g的黄鳝,开始出现性转变;体重在100.1～125.0g,雄性比例开始超过雌性的比例;体重在125.1～300.0g之间,随着体重的增加,雄性比例逐步增加,而雌性的比例逐步减少;体重超过300.0g的个体,则全部为雄性个体。1龄、2龄黄鳝均为雌性个体,3龄黄鳝开始出现性转变,4龄黄鳝的雄性比例超过雌性比例;5～8龄的个体,随着年龄的增长,雌性比例逐渐减少,雄性比例逐渐增加;9～11龄的个体,仍然有雌性个体。

3种不同体色黄鳝生长速度的比较

采用室内水族箱养殖,通过150d的生长试验,对黄斑鳝、青黄斑鳝、青斑鳝3种不同体色的黄鳝(Monopterus albus)的生长速度进行了比较研究。结果表明:绝对增重、增重倍数、体重绝对生长率均以黄斑鳝最高,分别为27.6g、2.88、1.84g/d;青黄斑鳝次之,分别为22.4g、2.33、1.49g/d;青斑鳝最低,分别为15.5g、1.58、1.03g/d。黄斑鳝的生长速度较青黄斑鳝和青斑鳝均存在显著差异(P<0.05),青黄斑鳝与青斑鳝之间的生长差异也显著(P<0.05)。

水产养殖专业校内外生产实习基地建设探讨

建设多类型校内外生产实习基地,培养学生的实践能力和创新能力,是复合型人才培养的重要实践环节。从校内外生产实习实践平台的构建及两者的有机统一等方面,探讨了水产养殖专业生产实习基地的建设。

高校研究性教学示范课程建设的实践与思考——以水产养殖科技动态专题为例

水产养殖科技动态专题是为水产养殖专业本科生开设的应用型实践课程,研究性教学手段应用于该课程教学中取得了较好的教学效果.从该课程的特点出发,从教学团队建设、课程教学理念与目标、教学体系建设、教学手段与考核评价以及教材建设分析了该课程在教学实践过程中的效果,并提出了下一步深化建设的合理建议.

芽孢杆菌对黄鳝养殖水体水质的影响

在黄鳝(Monopterus albus)养殖池中施用芽孢杆菌,按0.0、0.8mg/m3、1.6mg/m3、2.4mg/m3、3.2mg/m3、4.0mg/m36个梯度均匀泼洒,施用芽孢杆菌后每隔3d,分别测量养殖池水的溶氧、pH、NO2--N、NH4+-N、的含量。结果表明,施用芽孢杆菌能提高养鳝水体的溶解氧含量,到第9d达到最大值;随着施用时间的增加,水体的pH逐渐降低,使水体呈弱酸性环境;当芽孢杆菌的施用量为3.2mg/m3时,对水体的NO2-N和NH4+-N含量影响最大,显著降低NO2-N和NH4+-N含量;芽孢杆在提高溶氧、降低NO2-N和NH4+-N含量的最佳有效期为9d。

稻田网箱仿生态养殖宽体金线蛭技术

概括了稻田网箱仿生态养殖宽体金线蛭技术要点,该技术操作简单,具有很高实用价值。

黑斑蛙歪头病病原米尔伊丽莎白菌的分离、鉴定及特性分析

为查明湖北石首大垸农场养殖的黑斑蛙(Rana nigromaculata)歪头病病原与致病原理,本研究应用微生物分离技术,从病蛙脑、肝、脾和肾脏组织中分离、纯化病菌,采用形态特征、生理生化鉴定、16S rRNA基因序列分析进行细菌种类鉴定,通过组织病理学方法分析患病蛙病理损伤,及人工回归感染确定其致病性,并利用纸片扩散法进行药物敏感性试验。结果显示:分离菌(BSH3)与米尔伊丽莎白菌(Elizabethkingia miricola)聚为一支,结合该菌的形态学特征和生理生化特征,综合鉴定为米尔伊丽莎白菌。组织病理切片结果表明分离菌(BSH3)会导致蛙脑组织基质水肿,基质中出现空泡和炎性细胞浸润的现象;肝、脾和肾脏组织出现变性、坏死和炎症细胞浸润。人工回归感染试验显示,菌株可使黑斑蛙出现与自然发病蛙相似症状,半数致死浓度为6.3×10^(4) CFU/mL。药敏试验结果表明菌株已呈现多重耐药性,仅对少数检测抗生素(米诺环素、氟苯尼考、利福平和万古霉素)敏感,根据药敏试验结果及农业部水产用药规定,推荐使用氟苯尼考治疗该疾病。