龙葵碱对HepG2细胞N-乙酰转移酶1活性的研究

目的：探讨龙葵碱对人肝癌细胞中N-乙酰转移酶1（NAT1）活性的影响。方法：采用高效液相色谱法（HPLC），以对氨基苯甲酸（PABA）为底物，以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸（Ac-PABA）的量来反映NATl的活性，检测不同浓度龙葵碱作用于HepG-2完整细胞NAT1活性的影响；相同浓度龙葵碱作用不同时间（24h，48h，72h）于HepG-2完整细胞对NAT1的活性影响；不同浓度龙葵碱作用于HepG-2细胞质中NAT1活性的影响。

龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响

研究龙葵多糖对荷瘤小鼠脾指数和胸腺指数的影响,从免疫学角度初步探讨龙葵多糖的抗肿瘤药效学作用.实验采用MTT法观察龙葵多糖对Hep G-2和SGC-7901两种人肿瘤细胞的生长抑制作用.测定S180小鼠瘤重,H22荷瘤小鼠生存时间以及胸腺指数、脾指数等.实验结果表明龙葵多糖对Hep G-2细胞和SGC-7901细胞的IC50分别为189.60μg/m L和186.56μg/m L.龙葵多糖能够显著降低S180荷瘤小鼠平均瘤重,与阴性对照组比较具有显著性差异(P<0.01),龙葵多糖能明显延长H22荷瘤小鼠的生存时间(P<0.05或P<0.01),显著提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数(P<0.05或P<0.01).表明龙葵多糖的肿瘤作用是通过改善机体免疫力实现的,而不是通过细胞毒作用发挥的.

龙葵碱对HepG2细胞NAT1酶活性的影响

探讨龙葵碱对HepG2人肝癌细胞的N-乙酰基转移酶1(NAT1)酶活性的影响.采用高效液相色谱法(HPLC),以对氨基苯甲酸(PABA)为底物,以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸(Ac-PABA)的量反应NAT1酶的活性.观察不同质量浓度、不同时间龙葵碱对完整HepG2细胞NAT1酶活性的影响;龙葵碱对HepG2细胞细胞质中NAT1酶活性的影响.结果表明,在NAT1酶活性测定中,龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT1的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT1的活性,且作用具有剂量依赖性;随着时间的增加NAT1转化产物的量逐渐增加,但龙葵碱能显著降低同一时段NAT1的活性.提示龙葵碱通过抑制HepG2细胞中NAT1的活性是龙葵碱抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用机制之一.

新时代中小学生雷锋精神“三育”培养策略研究

2023年3月教育部印发《教育系统关于新时代学习弘扬雷锋精神深入开展学雷锋活动的实施方案》。方案提出,教育系统要坚持把传承雷锋精神作为立德树人的重要内容,立足战线特点和优势,坚持知信行统一,将雷锋精神深度融入学校教育教学和人才培养的全过程、各方面。湖南师大附中星城实验青石学校是一所九年一贯制学校,传承创新“让教育照鉴新人生”办学理念。如何在新时代发挥好九年一贯整体性和连贯性的办学优势,培养向上、向善、向阳的“雷小锋”。

龙葵碱对HepG2细胞NAT1酶活性及动力学影响的研究

目的探讨龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡的芳香胺N-乙酰化转移酶(NAT)1的影响。方法采用高效液相色谱法(HPLC),以对氨基苯甲酸(PABA)为底物,以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸(Ac-PABA)的量反应NAT1酶的活性。观察不同浓度、不同时间龙葵碱对完整HepG2细胞NAT1酶活性的影响;龙葵碱对HepG2细胞细胞质中NAT1酶活性的影响;通过改变底物PABA浓度,采用双倒数作图法,以底物PABA浓度的倒数(1/S)对NAT1反应速率的倒数(1/V)作直线,得出回归方程,计算Km和Vmax。结果在NAT1酶活性测定中,龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT1的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT1的活性;随着作用时间的增加Ac-PABA生成的量逐渐增加,但在相同作用时间段龙葵碱能显著降低Ac-PABA生成的量。动力学研究表明,以PABA为底物,对于HepG2完整细胞,阴性对照组的Km和Vmax分别为(1.04×10-3±8.36×10-5)mmol.L-1、(1.64×10-4±9.57×10-6)nmol.106cells-1,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(1.06×10-3±6.97×10-5)mmol.L-1和(1.48×10-4±4.28×10-6)nmol.106cells-1.h-1。对于HepG2细胞质,阴性对照组的Km和Vmax分别为(3.32×10-1±2.35×10-4)mmol.L-1、(2.60×10-3±6.79×10-6)nmol.h-1.mg pro-1,龙葵碱组的Km和Vmax分别为(3.35×10-1±1.66×10-4)mmol.L-1和(2.22×10-3±8.12×10-6)nmol.h-1.mg(Pro)-1,经统计学处理表明,对于HepG2完整细胞和细胞质,阴性对照组和龙葵碱组的Km没有差异,而Vmax差异显著。结论龙葵碱是HepG2细胞NAT1酶的非竞争性抑制剂。龙葵碱通过作用于NAT1与PABA结合位点以外的其他位点抑制NAT1酶的活性而诱导HepG2细胞凋亡。