野生二倍体草莓子叶的再生体系建立

【目的】建立野生草莓(Fragaria vesca.)Yellow Wonder子叶的高效再生体系,为其遗传转化研究与应用奠定基础。【方法】以野生草莓Yellow Wonder子叶为材料,研究不同激素配比、不同暗培养时间及不同子叶部位的不定芽诱导情况;同时研究不同IBA浓度下不定根的生长情况。【结果】在无菌条件下,草莓种子在添加3%蔗糖的1/2 MS培养基中发芽率可达90%;最佳激素配比为3.4 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA,出愈率和分化率分别为93.33%和83.33%;最佳暗培养时间为7 d;IBA浓度为0.2 mg/L时,生根率可达100%;诱导不定芽效果最佳的部位为子叶中部。【结论】建立野生草莓Yellow Wonder子叶的高效再生体系,即将Yellow Wonder草莓种子在萌发培养基(1/2 MS+3%蔗糖)中培养至发芽;将子叶中部切下,正面朝上置于子叶再生培养基(6-BA 3.4 mg/L+IBA 0.3 mg/L)上;在室温条件下暗处理7 d后,转入(25±2)℃长日照条件下培养40 d诱导出不定芽;不定芽转接到继代培养基(MS+6-BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L)上持续生长,待芽苗伸长至1~2 cm后,再转接到生根培养基(MS+IBA 0.2 mg/L)中进行生根培养。