专业实践教学在农科类跨专业学术型研究生培养中的作用

为解决跨专业学术型研究生理论知识薄弱、专业科研思维浅薄的弊端,探索新型培养模式势在必行。通过对水产养殖学专业跨专业学术型研究生专业实践教学的效果进行调查与分析,发现专业实践教学是快速对跨专业学生补缺专业理论知识与专业技能的有效方式,是拓展科研思维的一种方法,也是提升专业创新能力的重要助力。因此,建议专业实践教学应作为水产养殖学跨专业学硕型研究生培养的一个必要环节。

大口黑鲈 Nesfatin-1 蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

Nesfatin-1蛋白可以通过调节基因表达及信号通路途径影响鱼类的脂肪生成和代谢。为探究大口黑鲈(Micropterus salmoides)Nesfatin-1蛋白的生理功能,构建其原核表达质粒并进行蛋白表达纯化,制备了该蛋白的鼠源多克隆抗体。通过扩增Nesfatin-1蛋白的基因序列,构建原核表达载体获得pET32a-Nesfatin-1重组质粒。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达,镍离子亲和层析法纯化融合蛋白,并免疫Balb/c小鼠,获得针对Nesfatin-1的多克隆抗体。结果显示:大口黑鲈Nesfatin-1蛋白的基因序列为246 bp;Nesfatin-1融合蛋白在菌液上清液中的质量浓度为1.05 mg·mL−1,相对分子质量约为30 kD;Western blot结果显示多克隆抗体能与重组蛋白特异性结合;间接ELISA检测该抗体效价达到1∶204800以上;免疫组织荧光结果显示该抗体能特异性识别大口黑鲈肝胰腺中的蛋白,弥散性分布于肝胰腺中且血管周围呈强阳性反应。研究成功表达纯化出大口黑鲈Nesfatin-1融合蛋白,并制备了特异性鼠源多克隆抗体,为后续深入研究Nesfatin-1生物学作用提供了功能性蛋白与特异性抗体。

饲料蛋白质水平对克氏原螯虾幼体消化酶活性和肌肉成分的影响

用4种等能不同质量分数的蛋白质饲料(30%、35%、40%和45%)饲喂克氏原螯虾(Procambarus clarkiiGirard)幼虾(5.46g±0.51g)28d后,分析不同蛋白水平的饲料对克氏原螯虾幼虾肠道和肝胰脏消化酶活性和体成分的影响。结果表明:(1)饲料蛋白质浓度对脂肪酶和蛋白酶活性均有显著性影响(P<0.05);并随着饲料蛋白水平的提高,两酶活性都呈现先升高后降低的趋势。其中肠道蛋白酶和肝胰脏蛋白酶活性分别在饲料蛋白质浓度为40%和35%时最高;肠道和肝胰脏脂肪酶活性均在饲料蛋白质浓度为40%时最高,且各饲料组肝胰脏脂肪酶活性差异显著(P<0.05),而35%组和40%组之间的肠道脂肪酶活性无显著性差异(P>0.05)。克氏原螯虾幼体的肠道和肝胰脏淀粉酶活性随饲料蛋白质水平的升高均呈波浪式变化;35%组与45%组之间的肠道淀粉酶活性和30%与45%组之间的肝胰脏淀粉酶活性均无显著性差异(P>0.05)。(2)随着饲料中蛋白水平的升高,克氏原螯虾肌肉中蛋白质含量只有45%组显著升高(P<0.05),其他饲料组肌肉蛋白含量虽有上升趋势,但差异不显著(P>0.05)。随着饲料蛋白浓度的增加,肌肉中脂肪含量反而下降,除30%组外,各组间差异显著(P<0.05)。对克氏原螯虾肌肉灰分的测定表明,饲料蛋白浓度对肌肉中灰分含量的影响不显著(P>0.05)。

2种虫源性蛋白替代鱼粉对黄颡鱼幼鱼生长、体成分和蛋白酶活性的影响

以鱼粉作为对照,用黄粉虫、蚕蛹干粉半量和全量替代鱼粉,配制5组等蛋白质水平(40%)的饲料,对黄颡鱼幼鱼进行36 d的饲养.结果表明:对照组幼鱼的增重率、蛋白质消化率和饵料系数显著高于其他组(P<0.05),黄粉虫和蚕蛹全量替代组的增重率显著低于半量替代组(P<0.05);全黄粉虫组幼鱼的蛋白质消化率与2种半量替代组间的差异不显著(P>0.05),而蚕蛹组的蛋白质消化率显著低于其他替代组;除半量黄粉虫组幼鱼的饵料系数与对照组间的差异不显著外,全量替代组和半量蚕蛹组的饵料系数均显著高于对照组(P<0.05);除机体含水率外,各替代组幼鱼机体的粗蛋白含量只有全蚕蛹组显著低于其他组(P<0.05),而全蚕蛹组和半量蚕蛹组幼鱼的粗脂肪含量显著高于其他组(P<0.05);除半量黄粉虫组幼鱼的粗灰分含量与对照组间的差异不显著(P>0.05)外,其他3组间的差异显著(P<0.05);对照组幼鱼肝胰脏、胃、肠道的蛋白酶活性均最高,除胃蛋白酶活性与半量黄粉虫组间的差异显著外(P<0.05),肝胰脏和肠道的蛋白酶活性与半量黄粉虫组间的差异均不显著(P>0.05),但显著高于2种全量替代组(P<0.05).

不同饵料对史氏鲟仔鱼消化酶活性的影响

用活饵料(水丝蚓)、商品饵料、添加消化酶制剂的商品饵料、活饵料与商品饵料交替使用(对照组)来投喂10～40日龄(DPH,Day＿past＿hatch)的史氏鲟仔鱼。其中对照组仔鱼体内蛋白酶活性和商品饵料组及添加消化酶组的差异极显著(P<0.01),与活饵料组差异不显著(P>0.05),活饵料组仔鱼蛋白酶活性与商品饵料组差异极显著(P<0.01),与添加消化酶组差异显著(P<0.05),商品饵料组和添加消化酶组之间仔鱼的蛋白酶活性差异不显著(P>0.05);各饵料组仔鱼的淀粉酶活性差异均不显著(P>0.05);活饵料组和对照组仔鱼的脂肪酶活力与商品饵料及添加消化酶组仔鱼的脂肪酶活性差异极显著(P<0.01),在这两组之间,仔鱼的脂肪酶活性差异均不显著(P>0.05)。

史氏鲟消化器官的分化对消化酶活性变化的影响

对1～10日龄(DPH)的史氏鲟仔鱼消化道发育进行了组织学观察和消化酶活性的测定。结果表明,史氏鲟仔鱼在内源营养期,消化酶活性变化的总趋势是随着消化道的逐步发育而逐渐增强,但随着不同消化组织器官的分化,各种酶活性变化有各自特点。另外,3种消化酶出现活性的先后顺序为蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶。

课程小型化背景下普通动物学教学探索

论述了课程小型化背景下"普通动物学"教学中"教与学"关系的变革。对建立课程小型化下动物学教学中"教与学"主体的主观能动性;充实教师自身能力,发挥教师的施教主导作用;调动学生自主学习的积极性,发挥学生的受教主体作用进行了探索。

假单胞菌对鳜鱼血液指标的影响

用假单胞菌接种健康鳜鱼引起发病,然后对发病鳜鱼进行红细胞、白细胞、血栓细胞计数;血涂片染色鉴别淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞并分类计数;测定血红蛋白值及红细胞渗透脆性值并与对照组相应指标进行比较。结果表明:假单胞菌可引起鳜鱼的红细胞总数、小淋巴细胞和血红蛋白值下降,且与对照组相比,前两者存在极显著差异(p<0.01),后者存在显著差异(p<0.05);而白细胞总数显著增加(p<0.05);嗜中性粒细胞、单核细胞极显著增加(p<0.01);血栓细胞、大淋巴细胞和红细胞渗透脆性值变化不大。

长蛇鮈肠道组织结构与ghrelin的分布定位

通过组织学和免疫组织化学法对长蛇鮈肠组织形态学及ghrelin在其内的定位进行初步研究。结果显示,长蛇鮈肠壁组织由内向外由粘膜层、粘膜下层、肌层、浆膜层组成。中肠粘膜层厚度及由粘膜层形成的肠皱褶长度均显著大于前肠和后肠(P<0.05);前肠和中肠粘膜下层、肌肉层和浆膜层厚度显著高于后肠(P<0.05),但这3层的厚度在前肠和中肠不存在显著性差异(P>0.05)。ghrelin在长蛇鮈的前肠、中肠与后肠的粘膜层均无分布,但在粘膜下层均有分布,且前肠和中肠的粘膜下层呈强阳性反应,后肠粘膜下层阳性反应较弱;长蛇鮈前、中、后肠各区段肌肉层和浆膜层均见ghrelin阳性反应,但无明显差异。浆膜层ghrelin阳性反应要比肌肉层明显。因此,根据长蛇鮈肠道组织学结构差异,可将其明显的分为前肠、中肠和后肠;由ghrelin在肠道的分布规律发现其在长蛇鮈的摄食和食物消化吸收的内分泌调控中起重要调控作用。

胭脂鱼核连蛋白2/Nesfatin-1基因克隆及其在间脑与肝胰脏中的差异表达

为探索核连蛋白2(nucleobindin-2,NUCB2)对中国胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)生长发育的调节规律,利用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆其cDNA全长,并应用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)和免疫荧光染色检测主要功能蛋白Nesfatin-1神经肽在3龄和6龄胭脂鱼间脑和肝胰脏中的表达分布。结果显示:NUCB2全长为2090 bp,包括99 bp的5′非翻译区、1449 bp的开放阅读框和542 bp的3′非翻译区,编码482个氨基酸,分为23个氨基酸编码的信号肽区和459个氨基酸编码的功能肽区,后者由前肽裂解位点赖氨酸106-精氨酸107和赖氨酸179-精氨酸180分成Nesfatin-1、Nesfatin-2和Nesfatin-33个功能区域,且Nesfatin-1的M30区域在鱼类中高度保守。在2个鱼龄期,Nesfatin-1在肝胰脏中的表达均极显著高于间脑(P<0.01),而在间脑和肝胰脏中的表达无明显龄期差异(P>0.05);在肝胰脏中其主要在米粒状的胰腺细胞中呈强阳性反应;而在间脑的结节外侧核、室周前核和室前核的少量大神经元细胞中呈阳性反应。综上所述,在胭脂鱼2个典型发育阶段,Nesfatin-1在间脑中的表达水平明显低于肝胰脏,说明Nesfatin-1对胭脂鱼生长发育的调节存在明显的中枢和外周差异。

高等农业院校动物学实验教学的几点思考

本文就动物学实验教学中如何整合实验教学内容、改进实验教学方法、综合应用多种实验手段、改革实验考核方法等教学活动进行了探讨,针对农业院校动物学实验教学中存在的问题以及如何加强学生能力的培养提出了改革建议。

2种药物对蟹苗池中利氏才女虫幼虫的防治效果

质量浓度为1.5g/m3的漂白粉溶液和10mg/L的茶籽饼溶液都能对利氏才女虫的防治达到较好的效果。综合生产和经济效益等几个方面因素考虑,在河蟹育苗生产实践中选择质量浓度为10mg/L的茶饼可有效杀灭育苗池中的利氏才女虫,并在实际生产中也收到了良好的效果。

苗种的培育方式对中华绒螯蟹幼体形态特征的影响

研究了生态培育、土池培育和温室培育3种不同育苗方式对中华绒螯蟹幼蟹形态特征的影响。运用SPSS统计分析软件,先用逐步判别法找出6个最能代表其形态特征的参数并建立贝叶斯判别函数,再利用聚类分析法进行判别。聚类分析得出的典型判别函数图表明,代表生态苗、土池苗和温室苗培育的幼蟹从图象中可以比较容易地区别开来,其差异非常明显。苗种培育方式对中华鳌蟹幼蟹形态特征变化的影响显著。

蟹苗生产中饵料轮虫的培养

本文研究了蟹苗培育生产中开口饵料———轮虫的培养。发现轮虫密度和维持最大密度的时间与培育池中小球藻的密度呈正相关。此外,在适宜的温度范围内,随着温度的升高,轮虫的世代时间缩短,产量也随之增加;适宜的pH,可以促进轮虫种群增长,过高或过低的pH值都会影响种群的净增长力;适宜的溶氧浓度是轮虫休眠卵萌发的先决条件。

锦鲤循环水控温杂交繁育试验

锦鲤的观赏指标主要是体型和体色,由杂交选育而来的,性状极不稳定,且经过连续多年的人工繁殖,近交而导致群体遗传多样性降低,具优良体形与体色的子代出现率也非常低[1]。因此,改进锦鲤杂交繁殖技术,提高子代优品率,选育新颖个体,提高锦鲤养殖效益是促进锦鲤养殖产业发展的一个重要途径。为了培育出体色与体型性状新颖的锦鲤品种,该试验选用了五组不同品种的锦鲤进行人工循环水控温培育及催产杂交繁殖,现将试验情况介绍如下。

中华鳖4个品系营养成分分析与比较

为了解墨鳖的营养价值,对墨鳖、野生中华鳖、淮河鳖和日本鳖肌肉的一般营养成分、氨基酸含量、脂肪酸含量及裙边胶原蛋白进行测定和比较。结果显示:(1)4个品系鳖肌肉水分含量分别为80.84%、79.48%、81.57%和79.25%,墨鳖显著高于野生鳖和日本鳖(P<0.05);粗蛋白含量分别是17.82%、17.60%、15.93%和16.40%,墨鳖含量最高,显著高于淮河鳖和日本鳖(P<0.05);粗脂肪含量分别是0.42%、1.43%、0.65%和1.06%,墨鳖显著低于其他鳖(P<0.05);4个品系鳖灰分含量差异不显著(P>0.05)。(2)4个品系鳖肌肉中总氨基酸和呈味氨基酸含量均以墨鳖最高。(3)4个品系鳖不饱和脂肪酸含量分别为65.19%、56.44%、59.32%和54.73%,墨鳖显著高于其他鳖(P<0.05),其中墨鳖单不饱和脂肪酸含量显著低于野生鳖(P<0.05),多不饱和脂肪酸含量显著高于其他3个品系(P<0.05);饱和脂肪酸含量分别为32.50%、41.85%、39.41%和39.98%,墨鳖显著低于其他鳖(P<0.05)。(4)墨鳖肌肉中DHA和EPA含量与野生鳖差异不显著(P>0.05),显著高于淮河鳖和日本鳖(P<0.05),花生四烯酸(AA)含量显著高于其他3个品系鳖(P<0.05)。(5)4个品系鳖裙边胶原蛋白含量均较高,为160.6—170.4 mg/g。结果表明墨鳖是一种营养价值高、肉味鲜美的地方品系。

中华鳖蛋营养价值评价

本试验旨在对中华鳖蛋的营养价值进行评价。选取日本种群和黄河种群中华鳖蛋各200枚,分别进行基本营养成分、胆固醇、氨基酸与脂肪酸含量检测,以确定中华鳖蛋的营养价值。结果表明:1)2个种群中华鳖蛋蛋清中水分、粗灰分、粗蛋白质和粗脂肪含量分别为94.92%和95.18%、0.59%和0.37%、3.26%和3.20%、0.86%和0.82%;蛋黄中水分、粗灰分、粗蛋白质和粗脂肪含量分别为67.81%和69.01%、1.85%和1.98%、21.22%和21.15%、10.47%和8.91%。2)水解氨基酸含量检测结果显示,2个种群中华鳖蛋蛋清与蛋黄中均检出17种水解氨基酸,且均以谷氨酸含量最高,天冬氨酸含量次之;蛋清中氨基酸总量分别为557.61、461.43 mg/g,必需氨基酸总量分别为212.90、175.01 mg/g,呈味氨基酸总量分别为213.49、176.61 mg/g;蛋黄中氨基酸总量分别为567.72、536.04 mg/g,必需氨基酸总量分别为215.73、203.09 mg/g,呈味氨基酸总量分别为212.43、201.50 mg/g。必需氨基酸组成评价分析显示,2个种群中华鳖蛋蛋清和蛋黄中除蛋氨酸+半胱氨酸百分比外,其余必需氨基酸百分比均超过人体蛋白质氨基酸模式谱的参考值,属于优质蛋白质。游离氨基酸含量检测结果显示,2个种群中华鳖蛋蛋清中氨基酸总量分别为23.38、26.08 mg/kg,呈味氨基酸总量分别为12.12、12.63 mg/kg,分别占氨基酸总量的52%和48%;蛋黄中氨基酸总量分别为11.13、13.53 mg/kg,呈味氨基酸总量分别为3.67和4.02 mg/kg,分别占氨基酸总量的33%和30%。3)2个种群中华鳖蛋蛋黄中饱和脂肪酸总量分别为40.83%和44.85%,不饱和脂肪酸总量分别为56.80%和50.51%,胆固醇含量分别为10.49和10.84 mg/g。由此可见,中华鳖蛋水分、粗蛋白质含量高,粗脂肪含量低,必需氨基酸组成满足理想氨基酸模式,呈味氨基酸含量高,胆固醇含量低,是一种口感鲜美及营养价值较高的蛋类。

重组GnRH主动免疫对公猪体重及生长激素和IGF-I的影响

目的：探讨重组GnRH六聚体-麦芽糖结合蛋白（MBP-GnRH-6）主动免疫对公猪体重、生长激素和胰岛素样生长因子-I的影响。方法：7头公猪在9周龄时用重组GnRH主动免疫,17周龄时加强免疫,免疫和屠宰前1天称猪体重,酶联免疫分析法检测血清猪生长激素,放射免疫分析法检测血清IGF-I和睾酮水平,Pearson相关分析血清睾酮与IGF-I的相关性。结果：MBP-GnRH-6主动免疫猪血清睾酮浓度显著地低于阳性对照组（P〈0.05）,体重显著重于阴性对照组（P〈0.05）,但不影响公猪血清生长激素水平（P〉0.05）。在17~21周龄时,免疫组公猪血清IGF-I浓度显著低于阳性对照组（P〈0.05）,21~25周龄时免疫组公猪血清IGF-I显著高于阴性对照组（P〈0.05）。相关分析表明血清睾酮与IGF-I呈正相关。结论：MBP-GnRH-6主动免疫改变了公猪生长性能,增加体重,其作用途径可能是睾酮通过调控血清IGF-I水平来调控的。

长江野生中华绒螯蟹育苗性能的初步研究

2011年11月，从安徽省无为县选择野生长江中华绒螯蟹亲本1388只，到江苏省如东县进行天然海水生态育苗，其中雄蟹350只，总重80．05kg；雌蟹1038只，总重194．05kg。在面积为2．5亩的池塘中，进行对比育苗试验，繁育盐度保持在19‰～26‰，pH变化范围在8．28～8．90，比较野生长江中华绒螯蟹与普通蟹之间繁育性状的差异。结果表明，野生亲本的体重和卵重均高于普通亲本，差异极显著；野生亲本与普通亲本的成熟系数和相对繁殖力差异不显著；野生蟹产卵率（52．85％）高于普通蟹产卵率（30．91％）；野生蟹亲本组幼体发育较普通幼体发育为快，幼体个体较大，共产大眼幼体苗6．5埏，大眼幼体规格137848个kg.-1，平均125．3只·g-1；普通亲本组大眼幼体共产23kg，规格为156468个·kg-1，平均156．5只·g-1。

投喂模式对黄颡鱼幼鱼补偿生长的影响

在(25±1)℃水温和自然光照下,以4种模式投喂鲜活水蚯蚓,饲养平均初始体重为358.57mg的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco Richardson)幼鱼48d,第1种模式为对照组,每天投喂,第2、3、4种为试验组,分别是投喂3d后饥饿1d、投喂6d后饥饿2d、投喂12d后饥饿4d,4种模式分别以S0、S1/3、S2/6和S4/12表示。结果显示,3个试验组均表现出补偿生长,其中S1/3组为完全补偿生长,S2/6和S4/12组为超补偿生长,补偿生长由摄食率和饵料转化效率共同提高导致;3个试验组的成活率显著高于对照组,肥满度和内脏指数与对照组无显著差异;试验结束时,3个试验组的鱼体脂肪、蛋白质和能量含量与对照组无显著差异,但S2/6和S4/12组的鱼体干物质含量显著下降。