shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因对K_(ATP)通道电流的影响

目的研究shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流的变化。方法脂质体法将构建的3种shRNA质粒表达载体HK(隐性对照质粒)、K1(质粒携带干扰序列1)、K2(质粒携带干扰序列2)分别转染肝癌细胞。实验分为4组:SK组(未转染)、HK组、K1组、K2组。采用膜片钳全细胞记录方法记录KATP通道电流。高阻封接后,用10mmol/L2-脱氧-D-葡萄糖灌流液灌流10min,测量各组的电流,最后换成100μM格列本脲灌流液灌流10min,再次测量电流,再次电流相减即可得格列本脲敏感的KATP电流。绘制Ⅰ-Ⅴ曲线。结果在SK、HK、K1、K2 4组中,KATP电流分别为(n=7)(nA)(1.80±0.673)、(1.87±0.541)、(5.16±1.011)、(3.89±1.287)。K1、K2组与SK组比较差异有统计学意义。K1、K2组KATP电流的幅度明显高于HK组。结论shRNA沉默肝癌细胞Kir6.2基因后KATP通道电流改变明显。

基于FPGA的磁悬浮轴承控制器设计

磁悬浮轴承控制器是磁悬浮轴承系统运行的核心,本文设计一种基于FPGA的磁悬浮轴承控制器。完整的磁悬浮轴承控制器将以FPGA为核心主控芯片,负责数据的采样数据的处理及信号的输出,并拥有电源模块、传感器模块、A/D采样模块、滤波电路模块、光耦隔离与功率放大模块等硬件电路。为使控制器具有更好的控制性能,对于磁轴承控制策略将采用双闭环控制,外环为位置环控制,内环为电流环控制。

shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达对细胞内钙离子浓度的影响

目的研究shRNA干扰肝癌SK-Hep1细胞Kir6.2基因表达及对细胞内钙离子浓度的影响。方法脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,实验分为SK组(未转染)、HK组(阴性对照)、K1组(干扰序列1)和K2组(干扰序列2)。经G418筛选出单克隆培养,RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效序列。Fluo4-AM孵育各组细胞,流式细胞仪检测荧光强度。结果RT-PCR结果显示K1、K2组Kir6.2 mRNA的表达与HK、SK组比较均降低。K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均降低。K1和K2组钙离子浓度远远低于SK和HK组。结论shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达,钙离子浓度显著降低。

shRNA干扰肝癌细胞Kir6.2基因表达载体的构建及鉴定

目的:构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-siRNA,筛选出抑制Kir6.2基因表达的有效靶序列。方法:以Kir6.2基因为目的基因,以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板,细胞内转录合成2条siRNA,脂质体转染法将shRNA质粒载体pGenesil-3共转染SK-Hep1细胞,将细胞分为SK组(未转染)、HK组(转染阴性对照质粒)、K1组(转染重组质粒K1)和K2(转染重组质粒K2)组。经G418筛选出单克隆进行培养,用RT-PCR和Western Blotting分别检测Kir6.2 mRNA和蛋白的表达,筛选出抑制Kir6.2表达的有效siRNA靶序列。结果:SK、HK、K1和K2组Kir6.2 mRNA表达的相对量分别为0.936±0.042、0.848±0.058、0.225±0.0360、0.171±0.029,K1、K2组Kir6.2mRNA的表达与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。SK、HK、K1和K2组的Kir6.2蛋白表达的量分别为0.925±0.045、0.901±0.067、0.269±0.024、0.318±0.031,K1、K2组Kir6.2蛋白的量与HK、SK组比较均明显降低(P<0.05)。结论:shRNA抑制了肝癌细胞Kir6.2基因的表达。

重组生长激素对梗阻性黄疸大鼠肝细胞凋亡的影响

目的观察梗阻性黄疸状态下大鼠肝脏细胞凋亡的情况,探讨重组生长激素注射液的抗凋亡作用及其对肝脏的保护作用。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:假手术对照组(SO组,n=24)、梗阻性黄疸模型组(OJ组,n=24)、生长激素治疗组(RH组,n=24)。分别于建模后3、7、14 d随机从各组中取一亚组处死大鼠进行指标测定,检测血清总胆红素(TBIL)和总胆汁酸(TBA)水平变化及肝脏组织学的光镜检查,TUNEL法检测肝组织细胞原位凋亡,免疫组织化学(SP)法检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达。结果 RH组和OJ组血清TBIL、TBA水平,术后3 d时即明显升高,此后升高渐趋缓慢,并逐渐下降,但仍高于SO组。RH组术后3、7 d时TBIL和TBA水平较OJ组明显下降(P<0.05);组织学光镜观察:RH组和OJ组术后3 d即出现肝细胞损伤,并随时间延长而加重,但各时相点RH组较OJ组减轻。OJ组和RH组术后3 d即见细胞凋亡增加,7d明显增加,14 d后镜下视野见广泛细胞凋亡,RH组与OJ组比较,各时相点凋亡细胞明显减少(P<0.05)。Bcl-2蛋白表达的规律与凋亡呈一致性,但各时相点上表达RH组较OJ组明显上调(P<0.05)。结论大鼠梗阻性黄疸时肝脏存在着细胞凋亡,是梗黄状态下肝功能损害的重要机制。重组生长激素对肝细胞凋亡有明显抑制作用。

开放式腹膜前腹股沟疝修补术的临床研究(附57例报告)

目的探讨开放式腹膜前腹股沟疝修补术临床应用的手术技巧及效果。方法回顾性分析该院2005年8月～2009年12月对57例腹股沟疝患者应用椭圆形补片行开放式腹膜前置入无张力疝修补术的手术方法和治疗效果。结果本组手术均获成功,无手术死亡病例,手术时间为36～112min,平均为45.8min,术后疼痛轻微,大多可忍受,未应用麻醉镇痛药物。近期并发阴囊水肿4例,尿潴留6例,皮下积液2例,无切口感染等。本组57例均获随访,随访6～54个月,2例术后有异物感,其余无慢性疼痛,无复发患者。结论开放式腹膜前腹股沟疝修补术具有手术方式较简便、经济、易掌握、补片置入更加符合力学原理、术后恢复快、复发率低、异物感和慢性疼痛轻微,是一种较理想、值得推荐的疝修补术。

腹腔镜手术治疗胆囊切除术后胆总管结石

目的：探讨腹腔镜手术治疗胆囊切除术后胆总管结石的方法及可行性。方法：回顾分析11例胆囊切除术后胆总管结石患者行腹腔镜手术的临床资料,总结其手术适应证及疗效。结果：11例患者均采用腹腔镜手术清除结石,随访1~21个月,平均13个月,无异常。结论：腹腔镜手术治疗胆囊切除术后胆总管结石安全、可行。

原发性肝癌合并门静脉高压症的外科治疗（附37例报告）

目的 总结原发性肝癌合并门静脉高压症外科手术治疗的方法、疗效及围手术期注意事项.方法 回顾性分析我院2003年1月至2009年6月外科治疗的37例原发性肝癌患者合并门静脉高压症的临床资料.结果 术后并发症总发生率为37.8%（14/37）,其中围手术期死亡1例（死亡率2.7%）,其他创面大量渗血5例,中等量腹水4例,肺部感染3例,肝性脑病1例.随访至今死亡19例,其中18例死于肝癌复发,1例死于上消化道出血.存活17例,最长1例存活49个月,生存期2～49个月,平均18.4个月.结论 对原发性肝癌合并门静脉高压症患者行肝癌局部切除附加门奇断流、脾脏切除是安全有效和可行的,加强围手术期处理是提高近期疗效的关键.

腹腔镜改良Heller术联合Dor术式治疗贲门失弛缓症

目的探讨腹腔镜改良Heller联合Dor胃底折叠术治疗贲门失弛缓症的临床有效性及安全性。方法回顾性分析我院2009～2012年16例行腹腔镜下食管下段贲门肌层切开联合Dor(前180°胃底折叠缝合术)治疗贲门失弛缓症患者的治疗效果。结果 16例均成功完成腹腔镜手术,其中2例因食管黏膜穿孔行一期缝合修复,所有患者术后临床症状得到有效缓解,无明显并发症,治疗效果满意。结论腹腔镜改良Heller联合Dor胃底折叠术治疗贲门失弛缓症安全有效。

腹腔镜疝修补术与无张力疝修补术临床疗效比较

目的探讨腹腔镜下全腹膜外疝修补术与开放式无张力疝修补术治疗腹股沟疝(inguinal hernia IH)临床疗效。方法将104例腹股沟疝患者按手术治疗方式分为开放式无张力疝修补术(Tension-free hernia repair,TFHR)组51例和腹腔镜下全腹膜外疝修补术(total extraperitoneal prosthetic,TEP)组53例。比较2组患者术后临床疗效。结果 TFHR组与TEP患者均顺利完成手术,TEP组与TFHR组相比,出血量较少、术后疼痛较轻、下床活动较早,但总费用较高。TEP组术后尿潴留、血肿等并发症明显低于TRHR组。但切口感染,手术时间及2年内疝复发无明显差别。结论与TRHR相比,TEP术创伤小,恢复快,并发症低,但费用相对较高。

索拉菲尼片联合经肝动脉化疗栓塞术治疗原发性肝癌的临床疗效

目的:探讨索拉菲尼片联合经肝动脉化疗栓塞术(TACE)治疗不可手术切除的原发性肝癌的临床疗效及安全性。方法:选取2019年9月-2020年12月某院收治的62例不可手术切除肝癌患者为研究对象,按照均等单盲法将参与本研究的患者分为对照组和试验组各31例,对照组采用单纯TACE治疗,试验组在对照组的治疗上采用索拉菲尼片口服,统计两组治疗有效率以及药物不良反应的发生情况,并比较两组无疾病进展生存时间、总生存时间。结果:试验组的治疗有效率与疾病控制率分别为93.55%、96.77%,对照组治疗有效率与疾病控制率分别为70.97%、90.32%,试验组明显更高,差异显著(P<0.05);两组不良反应发生率对比无明显差异(P>0.05),试验组的无疾病进展生存时间、总生存时间均长于对照组,差异显著(P<0.05)。结论:对不可手术切除的原发性肝癌患者TACE术后辅助索拉菲尼片治疗,可有效提高疾病控制率与治疗有效率,提升生活质量,降低肝癌复发风险,安全性高,临床疗效显著。

胆管癌患者经开腹胆道旁路手术治疗的临床疗效研究

目的探讨开腹胆道旁路手术治疗胆管癌患者的临床疗效。方法选取2012年12月~2016年12月在本院接受治疗的200例胆管癌患者。随机分为对照组和观察组各100例。对照组行传统开腹胆管切除术治疗,观察组行开腹胆道旁路手术治疗。对两组患者手术指标、胆功能改善情况及术后并发症发生情况进行比较。结果两组治疗前胆功能指标无明显差异(P>0.05);治疗后,两组患者胆功能指标均明显改善,且观察组改善程度显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组手术时间、术中出血量、排气时间、下床时间及住院时间等均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组并发症发生率为4.00%,显著低于对照组的17.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论经开腹胆道旁路手术治疗胆管癌患者对改善患者胆功能具有显著效果,且创伤小、术后恢复快、并发症发生率低,临床应用价值较高。

结合注意力机制的双流卷积自编码高光谱解混方法

针对基于卷积自编码进行空-谱联合的高光谱解混方法中,过度引入像元光谱之间的空间相关性导致丰度过于平滑的现象,提出一种结合注意力机制的双流卷积自编码高光谱解混方法(DSCU-Net)。首先,利用双流卷积网络分别提取高光谱图像的空间特征和光谱特征;其次,为了确保空间特征和光谱特征之间的平衡性,引入通道注意力机制对提取到的空间特征进行重加权,并对光谱特征和重加权后的空间特征进行融合;最后,使用融合后的特征进行高光谱图像重构,并将重构结果送入解混网络的主干网络中进行光谱解混。通过最小化两次重构误差进行解混网络的训练。为了验证所提方法的性能,在两个真实数据集上进行实验,并对复杂场景下算法的性能表现进行分析。结果表明,DSCU-Net能够有效减少过度引入空间相关性造成丰度过于平滑的现象,具有更好的解混性能。

一种引入注意力机制的多尺度高光谱图像特征提取方法

近年来,随着深度学习的发展,基于深度学习的特征提取方法在高光谱图像领域表现出良好的发展前景。提出了一种引入注意力机制的多尺度高光谱图像特征提取方法,包括光谱特征提取网络和空间特征提取网络两个部分,并使用一种得分融合策略进行融合。在光谱特征提取网络中,引入注意力机制来缓解因光谱维数过高导致的梯度消失问题,以提取多尺度的光谱特征。在空间特征提取网络中,引入注意力机制作用于网络主干,使其关注邻域内的重要部分,帮助分支网络提取关键信息。将5种光谱特征提取方法、3种空间特征提取方法以及3种空间-光谱联合特征提取方法在3个数据集上进行对比实验,实验结果表明,所提方法能够稳定、有效地提升高光谱图像的分类准确率。

shRNA沉默Kir6．2基因表达载体的构建及其对HepG2细胞增殖和侵袭的影响

目的构建shRNA体内表达载体pGenesil-3-shRNA，研究抑制Kir6．2基因表达对HepG2细胞增殖和侵袭的影响。方法以Kir6．2基因为目的基因，以产生shRNA质粒载体pGenesil-3为表达模板，细胞内转录合成2条shRNA。重组质粒经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切鉴定和测序后，使用Lipofectamine 2000转染HepG2细胞。实验分为SK组（未转染）、SK-HK组（阴性对照）、SK-K1（转染干扰序列1）组和SK-K2（转染干扰序列2）组。G418筛选出荧光单克隆进行培养。Western blot检测Kir6．2蛋白在各组细胞中的表达。MTT法和Transwell系统分别检测各组细胞的增殖和侵袭能力。结果经酶切、测序鉴定，重组质粒符合设计要求。Western blot检测结果显示SK组、SK-HK组、SK-K1组和SK-K2组Kir6．2蛋白质相对表达量分别为0．9349±0．0443，0．9098±0．0195，0．2869±0．0295，0．3256±0．0341；和对照组相比，实验组Kir6．2蛋白减少。MTT法检测SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的增殖分数分别为0．7523±0．0681，0．7351±0．0589，0．2494±0．0485，0．2261±0．0298，F=0．2401，P=0．000。Transwell实验结果显示，SK组、SK-HK组、SK-K1组、SK-K2组细胞的穿膜数分别为47．0±7．1，40．7±8．0，14．3±5．1，15．0±3．7，F=30．74，P=0．000。和对照组相比，实验组HepG2细胞增殖和侵袭能力均明显降低。结论抑制HepG2细胞Kir6．2基因的表达可降低HepG2细胞的增殖和侵袭能力。

腹腔镜辅助胃癌根治术在老年肥胖患者的应用

目的：探讨腹腔镜辅助胃癌根治术在肥胖老年患者应用中的可行性及其临床疗效。方法：回顾性分析2008年9月-2012年9月26例接受腹腔镜辅助胃癌根治术老年肥胖患者（肥胖组）和同期67例接受腹腔镜辅助胃癌根治术非肥胖老年患者（非肥胖组）的临床资料。结果：肥胖组手术时间明显长于非肥胖组[（231．2±51．4）min vs．（208．5±53．6）min，P=0．039]，但两组术中出血量、术后住院时间差异无统计学意义（均P〉0．05）。两组术后并发症发生率差异无统计学意义（23．1％雌22．4％，P=0．589）。两组术后1，3，5d各免疫学指标差异均无统计学意义（均P〉0．05）。肥胖组术后体能评分明显高于非肥胖组（P〈0．05），而呼吸困难分、疲劳评分低于非肥胖组（均P〈0．05），余各项生活质量评分两组差异均无统计学意义（均P〉0．05）。88例（90．3％）随访2～48个月，肥胖组1，2，4年生存率分别为91．3％，78．2％，65．2％；非肥胖组1，2，4年生存率分别为93．4％，77．7％，62．3％，两组比较差异无统计学意义（X^2=0．0l1，P=0．916）。结论：肥胖能增加老年腹腔镜胃癌根治术的手术时间，但并不会影响手术安全性及近期疗效。

腹腔镜完全腹膜外腹股沟疝修补术72例报告

目的总结完全腹膜外腹腔镜疝修补术(TEP)的临床经验及效果。方法回顾性分析我院2005年3月至2011年2月采用腹腔镜下完全腹膜外腹股沟疝修补术治疗成人腹股沟疝72例共84侧的临床资料,其中单侧腹股沟斜疝42例,单侧腹股沟直疝18例,双侧腹股沟疝12例;初发疝64例,复发疝8例。结果 72例患者共行84次TEP术,3例中转行经腹腔腹膜前腹腔镜疝修补术(TAPP)。手术时间35～155min,平均73min,住院时间3～8d,平均5.5d。术后并发症5例(侧),占6.9%,均为腹股沟区或阴囊的血肿或血清肿,随访3～63个月,无复发。结论 TEP手术安全可靠,术后疼痛轻、恢复快、复发率低,且费用相对较低、易被患者接受,同其他腹腔镜疝修补术相比优势明显,应成为腹腔镜治疗腹股沟疝的主要术式。

开放式腹膜前腹股沟疝修补术43例临床应用

目的探讨开放式腹膜前腹股沟疝修补术临床应用的手术技巧及效果。方法回顾性分析我院2005年8月至2009年8月对43例单侧腹股沟疝患者行开放式腹膜前无张力疝修补术的手术方法和治疗效果。结果本组手术均获成功,无手术死亡病例,手术时间为38~97 min之间,平均为42.9 min,术后疼痛轻微,未应用麻醉镇痛药物。近期并发阴囊水肿3例,尿潴留6例,皮下积液1例,无切口感染等。本组43例均获随访,随访4~44个月,1例术后异物感,无慢性疼痛,无复发患者。结论开放式腹膜前腹股沟疝修补术具有手术方式较简便、经济、易掌握、补片置入更加符合力学原理、术后恢复快、复发率低、异物感和慢性疼痛轻微。是一种较理想、值得推荐的疝修补术。

腹腔镜下射频消融治疗特殊部位肝血管瘤

目的探讨腹腔镜下射频消融治疗特殊部位肝血管瘤的可行性及治疗效果。方法方法2009年1月至2013年1月，对郑州大学附属洛阳中心医院普外一科12例入选的患有特殊部位肝血管瘤的病例，采用腹腔镜下射频消融术治疗，2例因胆囊结石同时行腹腔镜胆囊切除术（LC），1例因瘤体累及胆囊床行LC。结果所有患者经治疗均获满意效果，术后无残留病灶，无明显并发症。结论对于特殊部位的肝血管瘤，腹腔镜射频消融术治疗安全可行，治疗效果肯定，对射频消融电极针的准确放置、展开及减少并发症的发生起到了积极的作用。

高脂血症性胰腺炎31例临床分析

我院自2005年1月至2009年6月收治急性胰腺炎（AP）289例，其中31例为高脂血症性胰腺炎（HLP），现报道如下：