拉米夫定治疗活动性肝硬化的近期疗效

目的 :观察拉米夫定 ( lamivudine)治疗活动性肝硬化近期临床疗效。方法 :活动性肝硬化患者 1 4例。口服拉米夫定 1 0 0 mg,每日 1次 ,疗程 6个月。观察治疗前及治疗后 1、3、6个月HBVM:HBs Ag、HBe Ag、抗 HBc、HBV DNA变化及不良反应。结果 :治疗 1、3、6个月后 HBVDNA阴转 ( HBV DNA≤ 1 .0× 1 0 3 拷贝 /ml)分别为 1例 ( 7.1 % )、3例 ( 2 1 .4) %和 7例 ( 5 0 % ) ,血清HBe Ag/抗 Hbe转化率均为 7.1 %。ALT半年中复常率为 85 .7% ,AST复常 1 1例 ( 76.9% ) ,TBIL复常 1 2例 ( 83.3% )。治疗前与治疗后 6个月比较差异有显著性 ( P<0 .0 1 )。其中 1例高黄疸患者治疗 1个月后 HBs Ag、HBe Ag、抗 HBc及 HBV DNA均转为阴性 ,6个月复查仍为阴性 ,可能与病人感染 HBV时间短及免疫反应强有关。治疗中未见严重不良反应。结论 :拉米夫定治疗活动性肝硬化 ,可明显改善临床症状 ,恢复肝功能 ,迅速降低 HBV DNA水平 ,抑制 HBV

抑制丙型肝炎病毒NS5A基因表达的shRNA系统的构建及意义

目的:构建抑制丙型肝炎病毒NS5A基因(HCV NS5A)表达的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体系统,观察其对HCV NS5A蛋白表达的抑制作用。方法:根据HCV NS5A基因已知序列,设计3段19个碱基的HCV NS5A特异性靶序列,合成两对63 bp并含有编码shRNA序列的寡核苷酸,双链退火后,克隆到经过BamHⅠ和HindⅢ双酶切后线性的pSilencerTM3.1-H1neo载体的H1启动子下游,重组构建RNA干扰(RNAi)质粒,进行电泳,将3个不同的RNAi质粒和阴性对照质粒分别与HCV NS5A真核表达质粒共转染正常肝细胞HL-7702细胞系,用Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白表达。结果:对重新构建的pSilencerTM3.1-H1neoHCV NS5A-R1、R2、R3质粒进行测序,与设计的序列完全相同;3个质粒电泳均在4 348 bp处出现特异性条带;Western blotting印迹法测得R1、R2和R3的NS5A蛋白未见明显条带,阴性对照质粒NS5A蛋白在相对分子质量5 600处出现条带。结论:设计合成的3个不同位点的63个碱基均成功插入到预计位点,并且序列完全正确,对HCV NS5A基因表达有特异性抑制作用。

丙型肝炎病毒NS5A基因真核表达载体的构建

目的:构建HCV NS5A/pCI-neo真核表达载体,转染Huh-7细胞系,为体外高效表达NS5A蛋白奠定基础。方法:用PCR方法从带有丙型肝炎病毒NS5A基因的pC DNA 3.1(+)/HCV NS345质粒中扩增出HCV NS5A基因,然后TA克隆于pGEM-T载体中,转化大肠杆菌JM109。阳性克隆经测序鉴定,再经双酶切消化后插入真核表达载体pCI-neo上,经酶切鉴定与测序证实。结果:用PCR方法扩增出HCV NS5A基因全序列,因其cDNA的G+C含量高直接测序未成功,后经TA克隆,筛选得到的阳性克隆经测序鉴定,与设计的HCV NS5A基因序列完全一致。经酶切连接并成功插入pCI-neo上。结论:成功构建了高效表达丙型肝炎病毒NS5A基因的pCI-neo真核表达载体。

丙型肝炎病毒NS5A基因真核表达载体的构建及其在HL-7702细胞中的高效表达

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A基因的真核表达载体,并在正常人肝细胞株(HL-7702细胞)中进行表达,为今后研究HCV NS5A蛋白功能奠定基础。方法:从含HCV NS345序列的重组质粒pCDNA3.1(+)/NS345中扩增出HCV NS5A基因片段,构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒。用脂质体将其转染HL-7702细胞,通过Western blotting印迹法鉴定NS5A蛋白。结果:用PCR方法扩增的HCV NS5A基因全长1344bp,与PGEM-T重组,测序证实所克隆的NS5A基因片段大小正确;成功地构建pCI-neo/NS5A重组表达质粒,瞬时转染HL-7702细胞表达NS5A蛋白,Western blotting印迹法显示其相对分子质量约为56000。结论:HCV NS5A的真核表达载体pCI-neo/NS5A在HL-7702细胞中能有效表达NS5A蛋白,NS5A蛋白可导致病毒复制、肝细胞癌发生,且NS5A区为IFN敏感性决定区。

大剂量强的松治疗重症肌无力性上睑下垂远期疗效观察

大剂量强的松治疗重症肌无力性上睑下垂远期疗效观察中国医科大学第二临床学院眼科（１１０００３）苏秀芬，王珏，徐洪斌大剂量强的松口服治疗重症肌无力（ＭＧ）性上睑下垂，具有方法简便、长期服用、使用安全、疗效可靠等优点。首次治疗后近期有效率为１００％［１］。...

影响乙肝导向干扰素抗乙肝病毒疗效因素的探讨

本文对影响乙肝导向干扰素临床疗效的某些因素进行了初步分析。结果发现，乙肝导向干扰素对慢性活动性肝炎（ＣＡＨ）的疗效好，而对慢性迁延性肝炎（ＣＰＨ）和无症状乙肝病毒携带者（ＡＳＣ）疗效差。治疗前血清ＡＬＴ＞１００ＩＵ／Ｌ及病程４年以内者疗效好。同时还证实，慢性乙肝病人（２３．３３％）体内存在干扰素α中和抗体。乙肝导向干扰素治疗后可促进抗体的产生，并且可影响其疗效。

肝炎病人生活质量调查分析(附142份健康状况调查)

目的 :调查病毒性肝炎对病人的工作、学习、生活、情绪、社交等方面的影响。方法 :采用“简明健康状况调查表 (中文版 )SF - 36”对肝炎病人及部分健康人进行调查。调查分为两组 ,A组为肝炎病人与健康对照比较组 ,肝炎病人和健康人各 32人。B组为肝炎病人保肝治疗前后比较组 ,肝炎病人 39人 ,治疗前后各 39份答卷。结果 :肝炎病人 10 0 %对上述调查都有一定或较大影响 ,平均每个病人对表中 36项调查有影响的占83 33%。而 32例健康对照中 ,只有 6个人平均每个人对表中 36项调查有影响的只占 16 6 7%。结论 :两组比较有显著性差异 (P <0 0 1)。B组病人 ,保肝治疗前 ,平均每个病人对表中 36项调查有影响的占 84 6 1% ,而保肝治疗后 ,此比例为 5 8 97% ,两组比较有显著性差异 (P <0 0 5 )。同时还报告了肝炎不同的临床类型和病原学类型其调查结果的不同。肝炎病人的生活质量比健康人明显下降。而经过保肝治疗后病人的生活质量较治疗前提高。不同类型的肝炎病人其调查结果有所不同。

降脂酮对CCl_4诱导的脂肪肝的保护作用

目的从含有黄芩、枸杞子、山楂等6味中药的复方制剂中提取有效部位:降脂酮,观察降脂酮对四氯化碳(CCl4)诱导的脂肪肝的影响及其作用机制。方法建立CCl4脂肪肝模型,分别用低剂量、中剂量、高剂量降脂酮进行治疗,观察各组大鼠肝组织中超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(PyH)、游离脂肪酸(FFA)的活性或含量。结果与正常对照组比较,CCl4诱导的脂肪肝模型对照组大鼠SOD活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显升高(P<0.01)、肝组织匀浆游离脂肪酸、羟脯氨酸明显升高(P<0.01);与CCl4模型对照组比较,低、中、高剂量降脂酮给药组SOD活性明显升高(P<0.05);中、高剂量降脂酮给药组MDA含量明显降低(P<0.05);中、高剂量降脂酮给药组肝组织匀浆FFA有明显差异(P<0.05),高剂量降脂酮给药组Hyp有明显差异(P<0.05),余各剂量组统计学上差异不明显(P>0.05)。结论降脂酮能够减轻CCl4诱导的肝脏脂肪病变程度。其机制可能与降脂酮所具有的抗氧化的作用有关。

测序法检测丙型肝炎病毒的基因分型

测序法检测丙型肝炎病毒的基因分型牛俊奇刘媛媛苏秀芬作者单位：１３００２１白求恩医大第一临床学院丙型肝炎病毒克隆的建立和重组蛋白抗原用于丙型肝炎病毒感染的血清学诊断，使非甲非乙型肝炎的研究起到了一个突破性的进展〔１，２〕，目前已证实在大多数非肠道传播的...

Orem自理模式对颅内血肿患者自我护理行为的影响

目的:探讨Orem自理模式在颅内血肿患者护理中的应用效果。方法:选择颅内血肿患者98例作为研究对象,分为试验组和对照组,对照组采用常规护理,试验组将Orem自理模式贯穿于常规护理的全过程。结果:试验组患者Barthel评分较对照组明显提高,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Orem自理模式能提高颅内血肿患者自我护理能力和日常生活活动能力,减少患者并发症,促进康复,同时也提高了家属对颅内血肿患者相关照顾知识及满意度。

改良B-Lynch缝线术在剖宫产术中大出血的应用

[目的]探讨改良B-Lynch缝线术在治疗剖宫产术中大出血的应用。[方法]2004年7月至2007年7月对38例剖宫产术中大出血者应用改良B-Lynch缝线术治疗。[结果]采用改良B-Lynch缝线术治疗剖宫产术中产后大出血的有效率100%,术后无并发症发生,子宫恢复好。[结论]改良B-Lynch缝线术止血迅速可靠,安全可行,是治疗剖宫产术中出血首选且有效的外科止血方法,值得推广应用。

减毒伤寒杆菌为载体的甲肝疫苗候选株的构建和免疫应答

目的 :构建以减毒鼠伤寒杆菌为载体的甲肝疫苗候选株 ,并证明其免疫源性。方法 :将甲型肝炎病毒编码区 c DNA插入高效表达质粒 p BV2 2 1。转化大肠杆菌 DH5 α。用核酸探针和限制性内切酶筛选和鉴定阳性克隆。将阳性重组质粒用电转移法转化减毒鼠伤寒杆菌 BRD5 0 9。用抗生素平板筛选法筛选出转化成功的伤寒杆菌 ,用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达。结果 :蛋白质印迹法 (Western blotting)和酶联免疫吸附测定(EL ISA)检测表明 ,表达蛋白可与人抗甲型肝炎 Ig G发生特异性反应。用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠 ,小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体。结论 :以减毒鼠伤寒杆菌为载体的甲肝疫苗构建成功 ,并可在体内外产生免疫应答。

甲型肝炎病毒编码区cDNA在减毒伤寒杆菌中的高效表达

使甲型肝炎病毒基因组ｃＤＮＡ能够在减毒伤寒杆菌中表达，从而通过口服此种减毒伤寒杆菌达到对甲肝免疫的作用。将甲肝病毒编码区ｃＤＮＡ插入高效表达质粒ＰＢＶ２２１，转化大肠杆菌ＤＨ５α，筛选并鉴定阳性克隆。将阳性克隆用电转移法转化减毒的伤寒杆菌ＢＲＤ５０９。用温度诱导法诱导目的基因在伤寒杆菌中表达。通过Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ和ＥＬＩＳＡ检测表明，表达蛋白可与人抗甲肝ＩｇＧ发生特异性反应。用此伤寒杆菌口服或腹腔注射免疫小鼠，小鼠血清检测到抗甲型肝炎病毒的抗体。结论：甲肝病毒ｃＤＮＡ可以在减毒伤寒杆菌中表达，且表达的蛋白质在体内、外有免疫原性。

重症乙型肝炎病人HBV前C区A_(83)位点的变异

目的：探讨HBV前C区A(83)位点的变异和重症肝炎发病机理的关系。方法：应用多聚酶链反应，结合限制性内切酶多态性分析法及末端终止法对3例重症乙型肝炎病毒前C区变异状况进行了分析，并选择5例其他型乙肝病人作对照。结果：发现3例重症乙型肝炎病人中有2例HBV前C区A(83)位点突变；其它5例未发现变异。结论：HBV前C区A(83)位点突变和重症肝炎的发生有密切的关系。

论律师在海西航运中心构建中的法律服务

随着2009年5月6日国务院《关于支持福建省加快建设海峡西岸经济区的若干意见》[国发[2009]24号]的出台,在福建省构建海西航运中心势在必行,但海西航运中心的建设本身是一项全局性、系统性工程,不仅需要良好的基础设施等硬件条件的支撑,更需要符合国际惯例的法律、税收、金融等方面的服务保障。

丙型肝炎病毒在外周血单个核细胞中复制状态的研究

采用套式逆转录ＰＣＲ方法检测２６例丙型肝炎及丙型肝炎病毒携带者的血清，外周血单个核细胞及其末次洗液中的ＨＣＶＲＮＡ。结果２６例血清中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阳性；外周血单个核细胞中正链ＨＣＶＲＮＡ２２例阳性、负键ＨＣＶＲＮＡ１５例阳性；末次洗液中正链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性。说明ＨＣＶ不仅感染ＰＢＭＣ，而且在其中复制．与丙型肝炎的复发、慢性化及干扰素治疗的疗效不佳有关。