瞬时受体电位通道蛋白的跨膜片段分析

目的分析瞬时受体电位（TRP）通道的膜拓扑结构。方法采用糖基化的方法,对传统TRP通道TRPC5的各疏水片段进行膜整合分析。结果 TRPC5通道中,S4～S8片段按顺序分别以Ncyt/Cexo和Nexo/Ccyt的方式插入到膜中,C末端位于细胞内。而S1～S3片段可能存在2种膜整合方式：一种是S1和S3整合到膜上,S2位于细胞外;另一种是混合模式,S1和S3分别位于细胞内,其N末端均位于细胞内。结论 TRPC5通道的S4～S8为跨膜片段,S1～S3片段需进一步实验验证。

脊髓电刺激对心肌缺血再灌注损伤大鼠的作用

目的检测脊髓电刺激对心肌缺血的治疗作用。方法 36只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组、心肌缺血组和脊髓电刺激+心肌缺血组。检测各组P物质在中枢神经系统的表达及心肌缺血组和脊髓电刺激+心肌缺血组心肌缺血面积的大小。结果与对照组比较,心肌缺血组P物质在中枢神经系统的表达明显增高(P<0.05);脊髓电刺激+心肌缺血组与心肌缺血组比较,脊髓电刺激可减低P物质在心肌缺血时表达的增加(P<0.05)。心肌缺血组和脊髓电刺激+心肌缺血组心肌缺血面积占左心室面积的百分比平均值分别为(46.51±2.19)%和(35.33±3.34)%,脊髓电刺激+心肌缺血组与心肌缺血组相比降低30.0%(P<0.01)。结论脊髓电刺激使心肌缺血时传导痛觉的神经递质P物质在中枢神经系统的表达减少,且降低了心肌缺血损伤面积,对心肌缺血具有治疗作用。

绞股蓝皂苷在小鼠皮肤衰老中的抗氧化损伤作用研究

目的:探讨绞股蓝皂苷对衰老小鼠皮肤的抗氧化保护作用。方法:60只小鼠随机分成3组,青年组(A)、老年对照组(B)和老年给药组(C);A、B组灌胃生理盐水20ml/kg,C组灌胃绞股蓝皂苷提取液8g/kg,每天1次。30天后取皮肤组织,检测丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。结果:与A组比较,B组、C组皮肤组织中MDA含量增加,SOD、CAT、GSH-Px活性降低(P<0.05);与B组比较,C组皮肤组织中MDA含量减少,SOD、CAT、GSH-Px活性增加(P<0.05)。结论:灌胃绞股蓝皂苷可减轻衰老小鼠皮肤的氧化损伤,具有延缓小鼠皮肤衰老的作用。

bFGF对骨骼肌肌卫星细胞增殖的影响—PCNA免疫组化法的实验研究

目的 :试图用致中胚层来源细胞分裂剂—碱性成纤维细胞生长因子 (basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)使正常成熟骨骼肌肌卫星细胞从静止状态变成增殖活动。方法 :用 2 1只大白鼠腓肠肌为实验材料 ,随机分 3组 ,每组各 7只 ,A组肌肉内注入bFGF ;B组肌肉内注入生理盐水 ;C组肌肉内不注任何物质。连注 14d后 ,取各组腓肠肌制成HE染色和增殖细胞核抗原 (proliferatecellnucleusantigen ,PCNA)染色切片 ,最后光镜下观察和对观察相关资料做统计学处理。肌卫星细胞核 ,HE染色为蓝色 ,PCNA染色阳性为棕黄色。结果 :细胞核数量 ,A组较B、C两组多 ;B组较C组多 ;C组肌肉内几乎未见有PCNA阳性细胞核存在。结论 :bFGF可使骨骼肌的肌卫星细胞 ,由静止变成增殖状态 ,为解决成体干细胞快速增殖这一难题 。

血清类型对大鼠骨骼肌干细胞增殖的影响

目的:探讨不同血清类型对成年大鼠骨骼肌干细胞增殖的影响。方法:在体外干细胞培养中,A组加入10%胎牛血清,B组加入10%小牛血清,C组加入10%马血清。48 h后进行免疫组化染色和MTT微量比色法检测。结果:A组细胞增殖迅速,B组细胞增殖较慢,C组细胞增殖最差。结论:血清类型的差异对骨骼肌干细胞的增殖有很大影响。

树鼠句卵巢和输卵管显微结构观察

作者观察了９ 只树鼠句的卵巢和输卵管的显微结构，结果发现：树鼠句卵巢和输卵管除具有哺乳动物（包括人类）的相似结构外，尚有其结构特点，如其卵巢被膜向实质呈切迹状凹陷，原始卵泡数目少、在白膜下几乎均呈单排，透明带厚，初级与次级卵泡形成的闭锁卵泡明显的多，间质腺罕见和髓质内有被覆单层柱状上皮的管道等。实验结果不但为树鼠句的繁育研究提供了基础资料，而且为从卵巢等结构方面探讨树鼠句分类提供参考资料。

家犬正中神经缺损后腕屈肌移植的形态学研究

目的:探索失神经支配的腕屈肌在自体和异体神经移植后的形态变化,为延缓肌萎缩提高神经再生效果提供形态学依据。方法:实验于2004-01/05在沈阳市中心医院手外科研究所完成。采用8只家犬失去神经支配的腕屈肌为研究对象,分为自体神经移植组和异体神经移植组两组,自体神经移植组:左肢正中神经缺损采用自体正中神经移植;异体神经移植组:右肢正中神经缺损采用异体正中神经移植。术后不同时间取材,常规制成光、电镜标本。结果:自体神经移植组腕屈肌的细胞核增多,为(203.88±16.64)个,异体神经移植组为(112.63±12.07)个,且延续时间较长;肌萎缩变化不明显,特别是术后180d,正常肌纤维的数量自体神经移植组为(20.75±2.50)条,异体神经移植组为(11.25±1.98)条,自体神经移植组远远多于异体神经移植组;随术后时间的延长,自体神经移植组腕屈肌的运动终板和肌梭的结构逐渐恢复,明显好于异体神经移植组,尤以术后180d效果更为明显;自体神经移植组肌纤维间神经纤维束明显增多,而增生的结缔组织明显减少。结论:神经再生效果愈好,其支配的肌肉发生萎缩越慢,肌肉恢复的效果愈佳;失去神经支配的肌肉其细胞核的增多和延续,可能在延缓和恢复肌萎缩过程中有着重要作用。

8-oxodG在口腔黏膜白斑中的表达

目的:研究8-氧-7,8-二氢-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-oxo-7,8-dihydro-2'-deoxyguanosine,8-oxod G)在口腔黏膜白斑中的表达,探讨氧化性DNA损伤在口腔黏膜白斑发生发展中的作用及机制。方法:应用免疫荧光技术检测10例正常口腔黏膜和20例口腔黏膜白斑中8-oxod G和抑癌基因P53蛋白的表达。结果:HE染色可见口腔黏膜白斑中炎性细胞浸润,过角化和上皮异型性增生等组织病理学变化。免疫荧光标记显示8-oxod G在口腔黏膜白斑中生成,并可见抑癌基因P53蛋白的表达。口腔黏膜白斑中8-oxod G和P53蛋白的阳性表达率高于正常口腔黏膜(P<0.01);8-oxod G、P53在正常口腔黏膜、口腔黏膜白斑伴或不伴异型性增生的阳性表达程度具有相关性,与病变程度呈正相关(r=0.773,P<0.01)。结论:氧化性DNA损伤在口腔黏膜白斑的发生过程中起着重要作用,8-oxod G可作为口腔黏膜白斑病变程度的风险性预测标志物。

止喘消咳颗粒剂的抗炎止咳作用实验研究

目的：研究止喘消咳颗粒剂的抗炎、止咳化痰作用。方法：通过二甲苯刺激小鼠耳肿胀法及醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加的方法观察其抗炎作用，用浓氨水对小鼠引咳法及小鼠排泌酚红法观察止喘消咳颗粒剂止咳化痰作用。结果：止喘消咳颗粒剂高剂量组对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有抑制作用（P〈0．05）；其高、中剂量小鼠腹腔毛细血管通透性的急性炎症有明显的抑制作用。止喘消咳颗粒剂高、中、低各剂量对小鼠浓氨水致咳嗽次数和致咳潜伏期均有明显作用（P〈0．01）。对小鼠气管排泌酚红的化痰实验，止喘消咳颗粒剂高、中、低各剂量组均有明显祛痰作用（P〈0．01）。结论：止喘消咳颗粒剂有抗炎，止咳，化痰作用。

提高学生在组织学实习课中的自学能力和创维思维的探讨

目的：培养学生在组织学实习课中的动脑、动手和科学思维的能力，方法：将医疗系本年五年制学生分成Ａ与Ｂ两个实习班，每班３０人，通过平时及期末切片标本的观察，绘图和闭路电视教具的应用来测试学生的成绩及自学能力，结果：Ａ组学生学习成绩好于Ｂ组，Ａ组学生比Ｂ组的自学能力和思维活动均较强，较活跃。

组织结构和细胞形态变异对诊断硬化性肺细胞瘤的影响

目的探讨硬化性肺细胞瘤组织结构和细胞形态变异的特征。方法收集281例硬化性肺细胞瘤患者的临床资料,采用HE、免疫组化SP法染色,根据免疫组化结果对存在变异的组织结构和细胞形态予以确认。结果281例硬化性肺细胞瘤中有2例在同一肺叶内出现多发病灶,4例伴局部淋巴结侵袭或转移,1例合并典型类癌。同时出现4种基本结构的病例仅占17.08%,以单一结构为主的病例占30.25%(实性为主28例、乳头状为主37例、血管瘤样为主20例),大多数的硬化性肺细胞瘤表现为2~3种混合型组织结构,占52.67%(148/281)。约1/3病例出现组织结构和细胞形态变异:多核瘤巨细胞形成、模拟乳头或微乳头结构、硬化性乳头、间质细胞的梭形变和透明变、间质的黏液变以及与其它恶性肿瘤共存等。结论硬化性肺细胞瘤的组织结构复杂,且其组织结构和细胞形态常出现变异。

链霉素缓释复合降解膜植入损伤肌腱局部腱周结缔组织的变化

背景:国内外学者曾用生物、非生物及药物等方法,诸如生物膜、透明质酸钠、纤维素密封胶等材料进行大量肌腱修复防粘连研究,但到目前为止尚未取得突破性进展。目的:观察肌腱损伤局部植入链霉素复合降解膜后腱周结缔组织的增生。方法:切断SD大鼠跟腱后,随机数字表法分为3组,分别在肌腱断端缝合处植入链霉素复合缓释降解膜、维生素C复合缓释降解膜、空白缓释降解膜。术后90d行肌腱损伤局部组织学观察、羟脯氨酸含量和生物力学指标检测。结果与结论:链霉素复合缓释降解膜组肌腱缝合处内部的成纤维细胞、胶原纤维均较其腱周围、维生素C复合缓释降解膜组、空白缓释降解膜组多;腱缝合处肌腱周围多为正常结构的疏松结缔组织,很少有增生的结缔组织长入肌腱内部;肌腱与周围组织分界清晰,最大抗拉强度、羟脯氨酸含量明显优于其他两组。表明链霉素复合缓释降解膜通过抑制腱周结缔组织增生,防止腱周结缔组织增生长入腱内,从而减轻或防止粘连形成。

碱性成纤维细胞生长因子复合降解膜置入脊髓缺损局部对脊髓神经再生的作用

目的:探索碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)复合降解膜置入脊髓缺损局部抑制结缔组织增生,促进胶质细胞增殖和轴突再生,提高脊髓神经纤维的再生效果。方法:切除狗L1-2,L3-4脊髓节段,采用缝匠肌尾侧部桥接脊髓缺损局部包裹bFGF复合降解膜,术后不同时间采用行为学和形态学方法进行测试和观察。结果:膜内外结缔组织增生有明显差异。肌桥段内有再生的神经纤维,双下肢运动功能有所恢复,TarlovMotorscotol分级为2～4级。结论:bFGF复合降解膜抑制脊髓损伤局部结缔组织增生,提高神经纤维的再生效果。

bFGF复合膜对自体神经移植的影响

目的：探讨ｂＦＧＦ复合膜对自体神经移植的影响。方法：在自体神经缝接缺损神经处，分别置入含ｂＦＧＦ复合剂的非降解膜和仅含ｂＦＧＦ的非降解膜，并通过组织学和图像分析等方法对免的正中神经缺损后的再生情况进行比较观察。结果：①实验侧再生神经纤维的数量多于对照侧且有显著性差异。②实验侧再生的有髓神经纤维的平均直径大于对照侧，但没有显著性差异。③再生神经纤维的髓鞘较薄、着色较淡，但结构清晰；其中实验侧的比对照侧的形态结构更清楚。④实验侧桥接段的再生神经纤维间的胶原纤维比对照例的少。结论：在自体神经移植处置入含有ｂＦＧＦ复合剂的非降解膜，对缺损神经再生不仅有一定的促进作用，而且其作用明显大于仅含ｂＦＧＦ的非降解膜。

黄芪延缓小鼠皮肤衰老的实验研究

目的:从形态学角度研究黄芪延缓小鼠皮肤衰老的作用。方法:小鼠随机分成3组,空白组(C)灌胃生理盐水20ml/kg,黄芪低剂量组(L)和黄芪高剂量组(H)分别灌胃黄芪提取液4g/kg、16g/kg,每次20ml/kg。30天后做组织学切片检测。结果:与C组比较,L组和H组皮肤组织中真皮厚度和胶原纤维面积增加(P<0.01)。H组与L组比较,真皮厚度和胶原纤维面积显著增加(P<0.05)。结论:高剂量黄芪可使真皮厚度和胶原纤维面积明显增加,具有延缓小鼠皮肤衰老的作用。

大鼠肌源性干细胞移植对失神经腓肠肌萎缩进程的影响

背景:目前,国内外有关肌源性干细胞移植的研究主要集中在治疗肌营养不良性萎缩症方面,尚未见涉及将肌源性干细胞应用于失神经肌萎缩综合治疗的报道。目的:探讨大鼠肌源性干细胞移植对失神经腓肠肌萎缩进程的影响。设计、时间及地点:随机对照动物观察,于2007-02/2008-07在沈阳医学院完成。材料:成年健康雄性Wister大鼠19只,由沈阳医学院实验动物中心提供。方法:取3只大鼠,无菌条件下切取肱三头肌,体外分离培养肌源性干细胞,贴壁法纯化扩增。余16只大鼠均切断右后肢胫神经,建立失神经腓肠肌模型,分为2组:细胞移植组于已切断的胫神经支配的腓肠肌的内外侧注射经DAPI标记的肌源性干细胞悬液0.2mL,模型对照组于相同位置注射等量生理盐水,培养4周。主要观察指标:采用计算机生物信号采集处理系统测定反映肌张力的腓肠肌阈强度恢复率和最适强度恢复率变化,通过电子天平计算肌湿质量残存率,应用图像分析系统测定肌纤维横截面积残存率。结果:与模型对照组比较,细胞移植组失神经腓肠肌的阈强度恢复率、最适强度恢复率均明显降低(P<0.01,P<0.05),肌湿质量残存率、肌纤维横截面积残存率均明显升高(P<0.01)。结论:肌源性干细胞移植对大鼠失神经肌萎缩进程有较明显的延缓作用。

非小细胞肺癌中CIP2A的表达及与临床病理的相关性

目的探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与临床病理因素的相关性。方法采用免疫组化SP法检测92例肺癌组织及10例正常肺组织中CIP2A与c-Myc蛋白表达及相关性,干扰CIP2A的表达并检测其对细胞增殖的影响。结果在NSCLC组织中,CIP2A的表达定位于细胞质与细胞核中,以胞质表达为主。CIP2A阳性率为70.65%(65/92),高于正常肺组织(P<0.05)。c-Myc在CIP2A阴性的肿瘤中阴性率为77.78%(21/27),阳性率为22.22%(6/27);c-Myc在CIP2A阳性的肿瘤中阳性率为76.92%(50/65),阴性率为23.08%(15/65)。CIP2A、c-Myc的表达与患者不良预后相关,CIP2A阳性与患者年龄、性别、肺癌类型、TNM分期、淋巴结转移均无相关性。转染CIP2A特异性siRNA于A549和H1299肺癌细胞系中,发现CIP2A表达下降的同时,c-Myc蛋白水平明显下调,细胞增殖能力明显下降(P<0.05),集落数目明显减少(P<0.05)。结论 CIP2A在肺癌中过表达,且与c-Myc表达及患者预后明显相关,干扰CIP2A可下调c-Myc表达并抑制肺癌细胞增殖。

组胚学理论考试方式的改革与思考

开闭卷相结合的理论课考试形式既不同于传统的闭卷考试,也有别于完全的开卷考试。实践表明:这一新的理论课考核方式,不仅克服了单纯闭卷考试的局限性,而且进一步促进了学生的主动学习,同时也促进了教学过程的全面改革。